利用反义maka啉环寡核苷酸(Morpholino)特异性阻断mRNA的翻译或正确剪切,从而降低基因的表达水平,用于胚胎早期发育中基因功能研究;利用CRISPR/Cas9技术特异性地瞬时破坏基因的编码序列,从而降低基因蛋白产物的表达水平来研究基因的功能,用于各个阶段的基因功能研究。破坏该基因正常表达,主要用于在动物模型中研究基因的功能等。定点插入外源核酸片段,用于标记基因的精细表达模式、破坏该基因正常表达、构建点突变、实现时间空间上控制基因表达等。斑马鱼的神经系统相对简单,便于研究神经信号传导机制。怎么做斑马鱼基因敲除
斑马鱼 cdx 实验在胚胎发育研究领域占据着极为重要的地位。cdx 基因家族在斑马鱼胚胎的后端发育过程中发挥着关键的调控作用。在实验中,通过多种先进的分子生物学技术,如基因敲低或过表达,可以精细地操控 cdx 基因的表达水平。当 cdx 基因表达异常时,斑马鱼胚胎的体轴形成、尾部结构发育以及肠道的分化都会出现明显变化。借助高分辨率显微镜对胚胎进行实时观察,能够清晰地记录下这些发育异常的表型特征,为深入探究 cdx 基因在胚胎发育程序中的分子机制提供了直观且可靠的依据,有助于科学家们逐步揭开胚胎发育过程中复杂的基因调控网络奥秘。斑马鱼课题申请其肝脏在物质代谢等方面承担重要任务。
中国斑马鱼技术产业应用史,就是环特生物的发展史。凭借在斑马鱼PDTX技术及科研服务方面逾20年的深厚积累,环特生物以斑马鱼转基因、基因敲除、敲入,尤其是国际带动的基因置换技术为关键,专注于提供各种遗传工程斑马鱼的定制、斑马鱼基因编辑技术及斑马鱼疾病模型开发等专业技术服务,不仅可以实现构建复杂基因敲入,包括点突变、条件性敲除等难度较高斑马鱼基因编辑技术服务,而且可以通过斑马鱼基因编辑可视化技术,实现可视化基因型筛选,减少其它动物模型中大量的基因型筛选和鉴定工作,比较大化发挥斑马鱼模型未来的应用优势。
新药研发耗时漫长、成本高昂,斑马鱼Cdx高通量药物筛选技术打破僵局,为制药产业注入强劲动力。斑马鱼繁殖迅速、单次产卵量多,加之胚胎及幼鱼体型微小,养殖占地少、成本低,天然适合大规模实验。基于Cdx技术搭建药物筛选平台,关键在于利用斑马鱼Cdx基因异常引发的疾病模型,如脊柱畸形、肠道功能紊乱模型。将海量候选药物以溶液形式加入斑马鱼养殖水体,药物经皮肤、鳃快速吸收进入体内。若某药物旨在矫正因Cdx基因缺陷导致的脊柱弯曲,筛选过程中可实时观察幼鱼脊柱恢复情况;医疗肠道疾病药物,则聚焦肠道蠕动、绒毛修复指标。研究斑马鱼的细胞凋亡机制可为疾病医疗提供思路。
斑马鱼的胚胎发育过程极具研究价值。其胚胎在体外发育,并且在早期阶段是透明的,这一特性使得研究人员能够借助显微镜直接观察到胚胎内部细胞的分裂、分化以及各种organ的形成过程,犹如在一个天然的 “透明实验室” 中见证生命的孕育与成长。在受精后的 24 小时内,斑马鱼胚胎就已经开始分化出多个胚层,随后,心脏、神经管、眼睛等重要organ逐渐形成,整个胚胎发育过程在较短时间内完成,通常在 3 - 5 天内幼鱼即可孵化。这种快速而有序的发育模式为研究发育生物学的基本原理和机制提供了较好的机会。斑马鱼的视网膜结构复杂,对光的感知和处理精细。斑马鱼敲除技术
它的肠道微生物群落对其消化和健康有重要作用。怎么做斑马鱼基因敲除
模型清晰展示,Cdx基因精细调控着中胚层与内胚层的分化走向。正常情况下,在其引导下,一部分细胞规规矩矩地发育为强健有力的肌肉组织,为斑马鱼日后敏捷游动提供动力源泉;另一部分投身肠道建设,搭建起营养摄取与消化的关键“流水线”。一旦借助基因编辑技术干扰Cdx基因功能,斑马鱼胚胎瞬间陷入“发育泥沼”:脊柱好似失去支撑的藤蔓,扭曲变形;尾部发育戛然而止,短小干瘪,幼鱼丧失在水中自如转向、加速冲刺的本领;肠道更是“一塌糊涂”,绒毛稀疏杂乱,蠕动功能瘫痪,营养运输受阻,幼鱼成长岌岌可危。深入剖析斑马鱼Cdx模型,会发现背后蕴藏的精妙调控网络。Cdx基因宛如一位“总调度师”,有序jihuo下游如hox基因簇等关键靶点,驱使细胞依序迁移、分化,如同指挥一场盛大的细胞“阅兵式”,从胚胎细微结构布局到整体躯体架构成型,全程把控,一丝不紊,让科研人员得以洞悉胚胎发育的关键机制。怎么做斑马鱼基因敲除