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普欣BDNF重组蛋白

来源: 发布时间:2022年07月18日

蛋白质生物学不仅包含研究内容,也包含了研究所需的工具。即基于蛋白质结构及功能的研究,和利用抗体、蛋白及多肽等作为纯化、检测和分析生物系统的工具。有些蛋白分析方法(如western blotting和ELISA等)已作为实验室的常规实验方法使用了多年。其它方法如定量蛋白质谱的实验方法则是相对较新的实验技术,并且正在快速发展中。针对重组蛋白纯化,赛默飞提供种类丰富的标签选择,包括6xHis, GST, DYKDDDDK (FLAG), c-myc, 和 HA。还提供一系列磁珠和树脂等纯化产品,磁珠、磁性琼脂糖、散装树脂、离心柱或试剂盒,FPLC层析柱,96孔过滤板等,用于从大肠杆菌、酵母、昆虫或哺乳动物表达系统中纯化从微克(μg)到低千克(kg)级重组蛋白。可满足大多实验的需求,包括高通量筛选、批量处理、中试和工艺纯化等。重组蛋白的生物活性接近于天然蛋白质,因此在生物制药领域应用广泛。普欣BDNF重组蛋白

在昆虫细胞表达系统中,昆虫细胞需要杆状病毒作为重组蛋白表达的中间体。杆状病毒是一组不同的DNA病毒,能够侵染各种昆虫细胞。它们就像一个穿梭机,将目标基因导入给定的宿主细胞。加州亲笔多核多角体病毒(AcMNPV) 在利用杆状病毒这方面表现出突出的特征。简单地说,将编码感兴趣蛋白质的基因插入一个主要载体,然后将其克隆到一个名为Bacmid的次要载体上。Bacmid被转移到一株细菌(通常是大肠杆菌)中进行初步病毒生产和组装,以获得一代杆状病毒(P1)。P1病毒在昆虫细胞中被扩增(例如sf9)以获得合适的滴度(P2),然后P2病毒被用于侵染相同或不同的昆虫细胞系(例如High-five)以实现重组蛋白表达。人BMP-3重组蛋白定制不同的重组蛋白系统有不同的优缺点。

重组蛋白是应用了重组DNA或重组RNA技术而获得的蛋白质。用于体外生产重组蛋白的宿主细胞主要是细菌(枯草芽孢杆菌、大肠杆菌)、酵母、昆虫细胞、哺乳动物细胞。 生产的蛋白在活性和应用方法方面均有所不同。根据自身的下游运用选择合适的蛋白表达系统,提高表达成功率。重组蛋白已被广泛应用于蛋白结构研究、免疫检测试剂、重组蛋白药物、诊断试剂开发、抗体药物靶点、CAR-T细胞靶点、Fc受体、流感病毒蛋白和细胞因子等大多数热门研究领域。

重组蛋白的细菌表达系统有各种各样的载体和宿主菌可供选择,大部分工程菌的增殖时间短,不仅便于快速评价实验结果,而且降低了技术和设备无菌要求的严格性。无害大肠杆菌是肠道正常微生物群的一部分与生物体为共生关系,可以通过产生维生素K 2使机体受益,并防止病原菌在肠道增殖。大肠杆菌是用于重组蛋白生产的宿主菌,它不仅具有遗传背景清楚、培养操作简单、转化和转导效率高、生长繁殖快、成本低廉,可以快速大规模地生产目的蛋白等优点,而且其表达外源基因产物的水平远高于其它基因表达系统,表达的目的蛋白量甚至能超过细菌总蛋白量的30%,对小分子蛋白的生产具有极大的优势,因此大肠杆菌是目前应用多的重组蛋白质表达系统。重组蛋白疫苗有着天然的优势。

重组蛋白溶液在低浓度的冰冻条件下冻存时通常不是很稳定。在冻融过程中,溶液中的某些蛋白会粘附在容器壁上,如果蛋白的起始浓度较低,则上述原因可能会导致造成蛋白浓度的进一步下降。因此,重组蛋白溶液中要添加载体蛋白用于减少此类损失。常用的载体蛋白包括牛血清白蛋白(BSA),人血清白蛋白(HSA)或胎牛血清(FBS)。这些载体蛋白通常的使用浓度是在0.1%。依根据经验数据,如果重组蛋白的浓度低于0.5 mg/mL,则推荐加入一些载体蛋白。常见国产重组蛋白品牌:北京义翘神州,武汉普健生物,上海普欣生物,近岸蛋白质科技,武汉华美生物,北京百普赛斯生物等。常见进口重组蛋白品牌:R&D Systems,PeproTech,ProSpec,Gibco等。进口重组蛋白质量好,能保证实验结果。进口EGF重组蛋白

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