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PeproTech重组蛋白产品

来源: 发布时间:2022年07月17日

不同表达系统所生成的重组蛋白间有何主要区别?以赛默飞为例,Thermo Fisher Scientific™ 所提供的重组蛋白产品通常在大肠杆菌,昆虫细胞或哺乳动物细胞等不同的表达系统中产生。不同表达系统之间产生的重组蛋白的主要差别在于这些蛋白所携带的翻译后修饰,如糖基化修饰。在大肠杆菌中生成的重组蛋白未经糖基化。在昆虫细胞中产生的重组蛋白通常经有部分糖基化,但不含半乳糖和唾液脱盐酸,糖链也无复杂分支。在哺乳动物细胞中生成的重组蛋白会发生附带完全的糖基化修饰。备注:Mimic™ Sf9 昆虫细胞(来源于sf9昆虫细胞系,经改造可稳定表达多种哺乳动物糖基转移酶)可产生用于表达带末端唾液酸和半乳糖的复杂的N-糖链。选择合适的重组蛋白表达系统,至关重要。PeproTech重组蛋白产品

体外生产重组蛋白的表达系统中,哺乳动物细胞表达系统能够为重组人源蛋白提供较接近于天然状态的翻译后修饰,在蛋白表达过程中会形成接近天然蛋白的蛋白质折叠和聚合,具备活性蛋白所必须的空间结构和修饰。哺乳动物细胞翻译后再加工修饰产生的外源重组蛋白质,在活性方面高于原核表达系统及酵母、昆虫细胞等真核表达系统,更接近于天然蛋白质。这些特性使得哺乳动物细胞表达系统在重组蛋白药物,特别是重组单抗药物的研发和生产中的具有极大的应用。PeproTechWnt3重组蛋白怎么样重组蛋白无论是保存还是运输,请避免反复冻融。

单克隆抗体是一类重组蛋白,不论是科研还是医疗中,都有很大应用。突出的表达重组单克隆抗体的宿主细胞系是CHO、NS0、SP2/0、HEK293和PER.C6。然而,大多数文献都是关于CHO细胞的,该细胞仍然是现今工业生产重组蛋白药物的主力,占到了70%(Jayapal等人,2007)。CHO细胞是于1986年一个被批准的重组生物制药的表达系统(组织型纤溶酶原actin物;t-PA)。从那时起,CHO细胞就是是重组蛋白表达的选择。尽管有其他哺乳动物表达系统可用,CHO细胞仍然是优化重组蛋白表达研究的中心。

糖基化是指糖基转移酶作用下将糖转移至蛋白质,和蛋白质上的氨基酸残基形成糖苷键。蛋白质经过糖基化作用,形成糖蛋白。糖基化是对蛋白的重要的修饰作用,有调节蛋白质,帮助蛋白质折叠功能作用。在大多数情况下,生长因子或细胞因子的糖基化作用不会直接影响该蛋白与受体之间的结合。所以在体外研究中,重组生长因子或细胞因子的生物活性不会受糖基化作用的过多影响。不过,糖基化蛋白通常对蛋白酶的降解更不敏感具耐受性,所以在体内的半衰期比未经无糖基化的同种蛋白更长。因此在体内研究中,以选择哺乳动物表达系统或昆虫表达系统生产的重组蛋白可能是比大肠杆菌中生产的同种重组蛋白效果更好的一个选择要好。重组蛋白干粉如何重溶?

对于临床使用的 GMP 级蛋白,批次间一致性是重要的指标之一。其次,要符合 GMP 要求的质量管理体系,至少,所选供应商应通过 ISO 9001: 2008/2015 相关认证的质量管理体系(QMS),质量管理体系是经过认证的符合相关政策的大量的文件和记录管理系统以及生产过程的可追溯性。而后,要挑选无动物源性的重组蛋白,相较于普通实验条件生产的重组蛋白,Animal-free 重组蛋白具有如下突出的优势:不会引入疯牛病病毒或者其它未知病原体;不会引起异种免疫排斥和过敏反应;不会因微量动物活性成分引发副作用。严格的质量控制系统, 才能保证重组蛋白产品的生物活化与一致性。R&DSystemsBMP-1重组蛋白

重组蛋白的活性高低,是实验成功的关键。PeproTech重组蛋白产品

蛋白质生物学不仅包含研究内容,也包含了研究所需的工具。即基于蛋白质结构及功能的研究,和利用抗体、蛋白及多肽等作为纯化、检测和分析生物系统的工具。有些蛋白分析方法(如western blotting和ELISA等)已作为实验室的常规实验方法使用了多年。其它方法如定量蛋白质谱的实验方法则是相对较新的实验技术,并且正在快速发展中。针对重组蛋白纯化,赛默飞提供种类丰富的标签选择,包括6xHis, GST, DYKDDDDK (FLAG), c-myc, 和 HA。还提供一系列磁珠和树脂等纯化产品,磁珠、磁性琼脂糖、散装树脂、离心柱或试剂盒,FPLC层析柱,96孔过滤板等,用于从大肠杆菌、酵母、昆虫或哺乳动物表达系统中纯化从微克(μg)到低千克(kg)级重组蛋白。可满足大多实验的需求,包括高通量筛选、批量处理、中试和工艺纯化等。PeproTech重组蛋白产品

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