芯弃疾JX-8B数字ELISA产品每个生物实验室都用得起的单分子免疫检测SiMoA通过将单个酶产生的荧光团限制在极小范围内,从而能够检测到非常低浓度的酶标记物体积(~50fL),导致荧光产物分子的局部高浓度。为了在免疫测定中实现这种定位,在第二步中,将珠子加载到一个阵列为离散的微升大小的孔(图1C)。本研究中使用的2毫米宽阵列有~50,000个孔,孔径为μm,孔深为μm。加载后的阵列在含有荧光酶底物液滴的情况下,用橡胶密封圈密封。Rissin等人,第3页将每个微球隔离在飞升反应室中。具有单一酶的微球标记的免疫复合物在50飞升的反应室中产生局部高浓度的荧光产物(图1D)。通过使用标准显微镜光学系统获取阵列的时间变化荧光图像,可以区分与单一酶分子相关的微球(“开启”孔)和不与酶相关的微球(“关闭”孔);补充图1显示了“开启”和“关闭”孔的荧光直方图。成像阵列可以成千上万的单个免疫复合物同时检测。通过测定供试品中的蛋白质浓度来确定计算含有珠子和荧光产物的孔数相对于含有珠子的孔数(图1D)。使用SiMoA,浓度是因此,我们称SiMoA应用于检测单个免疫复合物为数字ELISA。 芯弃疾JX-8B数字ELISA,每个实验室都能用的单分子检测;IVD数字ELISA快速检测
芯弃疾JX-8B数字化高灵敏ELISA芯片检测产品,与sioma产品的区别:
simoa产品为什么很难普及:主要问题:效果好、但成本高、平台庞大、不灵活、不开放;大部分实验室买不起设备!即使公用平台上了设备,大部分课题组也用不起耗材试剂!仪器:巨大,价格>300万;芯片+试剂:每套1万元以上;
Simoa的技术方案很难小型化,大部分反应流程都在芯片外进行,必须依赖大型自动化设备,与大部分生物实验室、医学实验室的灵活、低成本使用场景不符。 单分子检测数字ELISA检测用时芯弃疾JX-8B数字ELISA,低成本单分子检测;
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8孔芯片+自动加样仪+自动扫描仪,实现8个样本或更多同时反应测试;自动加样仪:占地面积小,多功能用途,也可用来实验室自动加液;
适合的使用场景:突出主推产品:性能、客户案例、解决什么问题;优势:总反应时长30min、灵敏度高(可达到0.2pg/mL)CV好、(片内片间10%)操作方便稳定、微量样本测试2-6项指标:更小样本只10uL
使用更新的fg级超敏免疫检测simoa单分子产品原理;只强度变化的单个信号二维离散化、阵列单分散排布,形成数万个荧光信号;将传统的模拟信号转化为新型的数字化信号;创新型原理,有效提高检测灵敏度,可达fg/aM级!
芯弃疾JX-8B数字ELISA高敏检测产品;具有以下特点:多重、超敏微量、极速灵活、开放;
只有少量分泌蛋白可测量的可能性突显了蛋白质测量领域面临的挑战:医学上相关的生物标志物可能存在于非常低的丰度中。免疫测定仍然是是蛋白质生物标志物敏感和特异性测量的基础。然而,传统的免疫分析技术在检测不可测量的生物标志物时灵敏度不足,这些生物标志物肯定位于当前可检测范围之下。主流的传统免疫分析方法——包括酶联免疫吸附试验(ELISA)、化学发光和电化学发光——的灵敏度下限约为10^-13M(~<0.1pM)。许多降低灵敏度的方法已被描述,包括拉曼增强信号检测、电感耦合等离子体质谱,但这些方法的数据表明其成功有限。非常规方法如亚飞摩尔级检测具有明显的权衡,例如程序较长或无法提供定量答案。
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将200,000个功能化DNA捕获探针与100μL孵育含有目标DNA的溶液(5‘-TTGACGGCGAAGACCTGGATGTATTGCTCCTCTGAACGGTAGCATCTTGACAAC-3‘孵育2小时后,移除DNA靶标溶液,用0.2×SSC缓冲液洗涤珠子三次含有0.1%Tween-20的微球重新悬浮并与10nM混合生物素标记的信号探针(5‘-TACATCCAGGTCTTCGCCGTCAA/生物素/-3’)对目标DNA具有特异性,孵育1小时。然后将珠子在去除信号探针后用含0.1%吐温-20的0.2×SSC缓冲液洗涤三次。随后向珠子沉淀中加入10pMS阝G溶液,混匀并混合1小时。然后将珠子分离并在含0.1%吐温-20的5×PBS缓冲液中洗涤六次。重悬于10μLofPBS中并加载到飞升微升孔阵列上。 数字化ELISA芯片,帮您数字化高灵敏检测,且微量样本多重指标检测;医疗检测用数字ELISA微量样本
芯弃疾单分子ELISA检测盒,使用灵活开放,少于8孔即可测试,可使用客户自研各用试剂!IVD数字ELISA快速检测
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我们继续在两个关键领域改进SiMoA技术。首先,在两个关键领域可能再增加两个灵敏度等级基于对酶标记的敏感性(图2)可以检测蛋白质,如果非特异性相互作用可以更小化背景信号。单个珠子上分离和询问单个分子的能力为区分抗体-抗原结合事件和非特异性结合复合物。其次,我们简化了检测的物流。然而,即使在目前的形式下,我们相信数字ELISA有可能促进疾病的早期诊断和治理。 IVD数字ELISA快速检测