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生物实验室数字ELISA微量

来源: 发布时间:2024年12月29日

芯弃疾JX-8B数字ELISA产品

每个生物实验室都用得起的单分子免疫检测

动力学上,对于200,000个微球分散在100μL中,珠子之间的平均距离约为80μm。大小为TNF-α和PSA(分别为17.3和30kDa)的蛋白质将在不到1min的时间内扩散80μm。表明,在2小时的孵育过程中,蛋白质分子的捕获不会受到限制动力学上。其次,必须有足够的珠子被加载到阵列上以限制泊松噪声。200,000个珠子加载到50,000孔阵列中,通常会导致20,000–30,000个微球被困在1mL孔中。对于典型的背景信号为1%活性微球(见下文),这种装载导致背景信号为200-300个活性微球检测到,对应于泊松噪声的可接受变异系数(CV)为6-7%。第三,过高的微球浓度可能导致:a)非特异性结合增加,降低信噪比;以及b)分析物与微球的比例过低,导致活性微球的比例过低,从而导致泊松噪声引起的高CV。这些因素的平衡NatBiotechnol.作者手稿;可在PMC2010年12月1日获得。Rissin等人第5页因素意味着每100μLoftest样品含有20万到100万颗珠子是比较好的数字ELISA。同时,为了获得可接受的背景信号(1%)和泊松噪声)。 芯弃疾JX-8B数字ELISA,微量检测,使用微量样本就能测试;生物实验室数字ELISA微量

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单分子POCT产品,帮您数字化高灵敏检测,且微量样本多重指标检测;

低成本便捷检测:数字ELISA芯片,分为手动版和自动版,其中手动版可以直接使用移液枪加液检测;更少可以使用单片4孔芯片(同时做4个test)、8孔芯片(同时做8个test)进行检测;(活动期8孔芯片只需要200元即可测试实验);芯片内只需要微量样本(10-20ul)即可完成检测,所需要的试剂量也明显降低,且每个芯片孔内可同时检测2-4个检测指标,分摊下来检测成本有效降低;其中自动版可搭配小型多通道加样仪,也可以进行高通量的ELISA芯片同时检测。1)检测快速:数字ELISA芯片高敏检测试剂盒,搭配预埋的磁珠和荧光量子点试剂,整体反应在芯片的微小流道内进行,反应速度快、清洗速度快;更短只需要15-20min,就可以进行完整的检测流程,接近POCT检测产品,可以有效节省您的实验时间。2)高灵敏检测数字ELISA高灵敏度检测芯片,使用单分子免疫检测的原理(原理同simoa等产品,使用反应微球单分散阵列排布的原理,将反应信号进行单分子单分散检测),在快速、便捷检测的同时,仍能保持高灵敏度,常规指标轻松达到0.2-1pg/ml的灵敏度 单分子免疫检测数字ELISA精密度数字化ELISA芯片,帮您数字化高灵敏检测,且微量样本多重指标检测;

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创新性的解决方案:芯弃疾JX-8B数字ELISA

我公司推出的数字化高灵敏ELISA芯片检测产品应用场景:适合生物实验室、医学实验室、科研市场、产品预研、产品开发、ELISA检测、动物病情检测等各种应用场景应用范围:各种高灵敏多重免疫检测,可替代各种ELISA试剂盒,及其他免疫检测产品。

用DNA捕获探针(5‘-NH2/C12-GTTGTCAAGATGCTA)功能化的微球CCGTTCAGAG-3‘)是按照制造商的说明制备的。这些珠子与生物素化互补DNA的1μM(5’-生物素-CTCT)孵育。在含有0.5MNaCl和0.01%Tween-20的TE缓冲液中过夜(16h)孵育GAACGGTAGCATCTTGACAAC-3‘。孵育后,用PBS洗涤珠子三次含0.1%Tween-20的缓冲液。将珠子样品分装至微孔板中100μL中每孔给予400,000个微球。从微孔板孔中吸取缓冲液,将微球重悬后与不同浓度的ofSβG孵育。

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数字ELISA测量蛋白质浓度远低于传统ELISA的能力源于两种效应:1)SiMoA对酶标记的高度敏感性;以及2)通过数字化蛋白质检测可以实现的低背景信号。任何免疫测定的灵敏度由其灵敏度决定。检测技术到标签,抗体亲和力,试验背景,以及背景测量值的变异(%CV)27.SiMoA对酶非常敏感标签(图2)为在数字ELISA中检测亚飞摩尔浓度的标记蛋白提供了基础。也就是说,对于给定亲和力的抗体,其灵敏度为免疫测定将由测定背景决定,SiMoA的高标记灵敏度有助于降低这种背景。对照实验表明,数字ELISA的背景来自于检测抗体和酶的非特异性结合(NSB)与捕获珠表面结合(补充表2)。AsSiMoA相比传统检测方法具有更高的标记灵敏度,明显减少了检测抗体(~1nM)和酶标记物(1–50pM)的需要,以检测结合事件,与传统方法相比(标记试剂浓度~10nM)。降低的标记物浓度减少了NSB到捕获表面,从而导致背景信号明显降低。 芯弃疾JX-8B单分子普惠化ELISA检测产品,超敏检测,理论可达飞克级;

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通过SiMoA对酶标记物进行数字检测的线性动态范围由区分“开启”和“关闭”孔的能力决定。在酶与珠子的比例较低(小于约1:10)时,泊松统计表明,只有统计学上有效果的群体珠子是指含有零和一个酶的珠子。只要足够多的珠子被检测,单个酶就可以被检测到,并且活性珠子的数量会超过泊松分布计数活性微球的噪声。在酶与微球的高比率(大于约(1:10),活性珠子的比例变得更高,泊松统计表明有大量含有多种酶的微球。为了定量检测到的酶的数量并保持含有多种酶的微球亚群中的线性对于酶,我们使用泊松统计法将活性珠子的数量转换为检测到的酶的数量 芯弃疾JX-8B单分子普惠化ELISA检测产品,人人都用能得起的单分子检测;进口数字ELISA制造商

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人类形式的蛋白质被加入到25%牛血清中以代替临床测试样本;通常使用四倍稀释因子以减少免疫测定中的基质效应4。使用数字ELISA检测25%血清中的PSA,从该实验中确定了LOD为~50aM(1.5fg/mL),相当于整个血清中的LOD为~200aM(6fg/mL)。检测到的比较低浓度为250aM,相当于25%血清中的1fMin全血清。由于LOD是通过外推背景浓度来确定的加上背景的三个标准差,不同运行的LOD取决于背景的CV。在具有典型背景方差的几个实验中,全血清PSA的亚飞摩尔LOD得以保持。相比之下,一种前列的商业PSA检测方法(ADVIACentaur,西门子)报告在人血清中的LOD为3pM(0.1ng/mL),并且已经报道了LOD在10-30fM17,26。 生物实验室数字ELISA微量

标签: 数字ELISA