北京医用细胞培养基厂家直销

    Dulbecco’s改良培养基–DMEM（Dulbecco’sModifiedEagleMedium）是在MEM培养基的基础上研制的，与MEM培养基相比，氨基酸的含量增加了2倍，维生素的含量增加了4倍，同时还增加了非必须氨基酸、微量铁离子以及**酸钠。DMEM培养基**初设计葡萄糖含量为1000mg/L（低糖型），后来又发展出葡萄糖含量为4500mg/L（高糖型），现已广泛应用于各种细胞的培养。高糖型培养基普遍应用于生长快、粘附性低的细胞、杂交瘤的骨髓瘤细胞、克隆细胞、DNA转染的转化细胞、各种原代病毒宿主细胞、单一细胞的培养以及疫苗的生产，例如利用CHO细胞表达EPO和生产乙肝疫苗。低糖培养基更适合代谢作用较慢、依赖性贴壁细胞的培养。不含葡萄糖的培养基可以根据研究需要，随意调节葡萄糖的浓度，方便快捷。L-谷氨酰胺（Glutamine）是细胞培养中所必需的一种营养元素，但其在溶液中不稳定，会自发降解，不含L-谷氨酰胺的培养基，可以根据研究需要任意调整L-谷氨酰胺的用量，在使用时添加新鲜的L-谷氨酰胺或其替代物更利于细胞的生长。 本产品含有多类细胞培养所需的氨基酸、维生素、无机盐等多种成分，故此产品需搭配血清或无血清添加物使用。北京医用细胞培养基厂家直销

    1.细胞培养基的种类按照细胞培养基的发展历史，细胞培养基大致可分为平衡盐溶液、天然细胞培养基、合成细胞培养基、无血清细胞培养基、限定化学成分细胞培养基等几大种类。（balancedsaltsolution，BSS）BSS主要是由无机盐、葡萄糖组成，它的作用是维持细胞渗透压平衡，保持pH稳定及提供简单的营养。其主要用于细胞的漂洗、配制其他试剂等。几种常用的BSS配方如下（表1-1）。D-Hank's与Hank's的一个主要区别是前者不含有Ca2+和Mg2+，因此D-Hank's常用于配制胰酶溶液。因为Ca2+、Mg2+是细胞膜的重要组成成份，参与细胞粘附等功能，使用不含Ca2+、Mg2+的BSS可避免细胞结团。此外，Hanks液和Earle液是常用的BSS基础溶液，前者缓冲能力较弱，适合于密闭培养；后者缓冲能力较强，适合于5%CO2的培养条件。天然培养基指来自动物体液或利用组织分离提取的一类培养基，如血浆、血清、鸡胚浸出液等。其优点是营养成分丰富，培养效果良好，但缺点是成分复杂，来源受限且制作过程复杂、批间差异大。目前使用的天然培养基是血清，另外各种组织提取液、促进细胞贴壁的胶原类物质在培养某些特殊细胞也是必不可少。水解乳蛋白是乳白蛋白经蛋白酶和肽酶水解的产物。广东RPMI-1640细胞培养基源头直供MEM α 培养基不含核苷和脱氧核苷的MEM α培养基常常用作DG44和其他DHFR-缺陷型细胞的筛选培养基。

    Leibovitz’sL-15培养基的缓冲系统由磷酸盐和游离碱基氨基酸组成，代替了传统的碳酸氢钠缓冲系统，同时，用半乳糖和**酸钠代替葡萄糖可以防止酸性代谢副产物的形成，有助于维持培养液PH的稳定，适合用于非CO2平衡环境的细胞培养。Leibovitz’sL-15培养基适用于猴肾细胞和HEP-2的培养、原代（如胚胎和成人组织）细胞分离、多种病毒的培养以及神经元的培养等。L-谷氨酰胺（Glutamine）是细胞培养中所必需的一种营养元素，但其在溶液中不稳定，会自发降解，不含L-谷氨酰胺的培养基，可以根据研究需要任意调整L-谷氨酰胺的用量，在使用时添加新鲜的L-谷氨酰胺或其替代物更利于细胞的生长。

    L-谷氨酰胺（Glutamine）是细胞培养中所必要的一种营养，但其在溶液中不安定，会自发降解生成氨和焦谷氨酸，其中氨对细胞危害；而L-丙氨酰-L-谷氨酰胺在水溶液中格外的安定，不会自发的降解。细胞运用其机制是：在细胞培训时，细胞会日益向培养液中获释一种肽酶，将L-丙氨酰-L-谷氨酰水解成L-丙氨酸和L-谷氨酰胺，而后细胞会将这两种水解产物吸收运用。细胞运用L-丙氨酰-L-谷氨酰的过程与流加培养方针相像，连续的将低浓度水准的L-谷氨酰胺加入到培养液中，从而提高了L-谷氨酰胺的利用率，且不会生成剩余的氨，更有利于细胞的生长。L-丙氨酰-L-谷氨酰可以取而代之等摩尔的L-谷氨酰胺，适用于所有的细胞，几乎无须适应，并且可以延长细胞的培养时间，缩减传代次数，即节约了时间也节省了钱财。与添加L-谷氨酰胺的培养基中培训的细胞相比之下，活性减低得更慢。延滞期稍为延长的缘故是肽酶的释放和二肽的消化需一定的时间。NEAA（非须要氨基酸），是在MEM培养基的基本上添加L-丙氨酸、L-谷氨酸、L-天（门）冬酰胺、L-天（门）冬氨酸、L-脯氨酸、L-丝氨酸和甘氨酸7种NEAA，能下降细胞培育时细胞自身生产非须要氨基酸的副作用，有效性推动细胞增殖代谢。葡萄糖可以根据研究需。McCoy’s 5A培养基还用于组织活检培养、细胞建系，以及一些淋巴细胞和较难培养的细胞的培养。

    含丰富的多肽、氨基酸和碳水化合物。一般配制成（采用平衡盐溶液溶解）与合成培养基（如MEM细胞培养基）以1:1的比例混合使用。目前用于细胞培养的血清主要是牛血清，培养某些特殊细胞也用人血清、马血清等。牛血清对绝大多数哺乳动物细胞都是适合的，但并不排除在培养某种细胞时使用其他动物血清更合适。血清中含有各种血浆蛋白、多肽、脂肪、碳水化合物、生长因子、无机物等，这些物质对促进细胞生长或抑制生长活性是达到生理平衡的。此外，血清含一些对细胞产生毒性的物质，如多胺氧化酶，能与来自高度繁殖细胞的多胺反应（如精胺、亚精胺）形成有细胞毒性作用的聚精胺。补体、抗体等都会影响细胞生长，甚至造成细胞死亡。目前，血清多作为一种添加成分与合成培养基混合使用，使用浓度一般为5~20%，常用是10%。由于水解乳蛋白和血清成份复杂，批间差异大及存在病毒等外源污染风险，对下游生物制品的分离纯化和安全性都存在较大的影响，在生物制药行业的使用也越来越少。因此，基于对血浆成份的分析，合成细胞培养基应运而生。合成培养基是根据天然培养基的成分，用化学物质模拟合成、人工设计、配制的培养基。开发的基础培养基（minimalessentialmedium,MEM）。Ham’s F-12常作为无血清培养的基础培养液，在低血清含量下时，特别适合单细胞培养和克隆化培养。北京医用细胞培养基厂家直销

McCoy’s5A培养基是改良的Basal Medium5A，McCoy’s 5A含有还原型谷胱甘肽、细菌蛋白胨以及高浓度的葡萄糖。北京医用细胞培养基厂家直销

    细胞培养基的种类很多，按其来源分为合成培养基和天然培养基（目前使用的培养基绝大部分是合成培养基），按其物质状态分为干粉培养基和液体培养基两类。干粉培养基需由实验者自己配制并灭菌，液体培养基由专业商家提供，用户可直接使用，非常方便。1、合成培养基的主要成分有：氨基酸、碳水化合物、无机盐、维生素及其它辅助物质：氨基酸氨基酸是组成蛋白质的基本单位。不同种类的细胞对氨基酸的要求各异，但有几种氨基酸细胞自身不能合成，必须依靠培养液提供，这几种氨基酸称为必需氨基酸。其中谷氨酰胺是细胞合成核酸和蛋白质必需的氨基酸，在缺少谷氨酰胺时，细胞生长不良而死亡。因此，各种培养液中都有较大量的谷氨酰胺。但是，由于谷氨酰胺在溶液中很不稳定，应置于-20℃冰箱中保存，在使用前加入培养液内。已含谷氨酰胺的培养液在4℃冰箱中储存2周以上时，还应重新加入原来量的谷氨酰胺。碳水化合物碳水化合物是细胞生长主要能量来源，其中有的是合成蛋白质和核酸的成分。主要有葡萄糖、核糖、脱氧核糖和醋酸等。无机盐培养液中无机盐的主要功能是帮助细胞维持渗透压平衡。此外，通过提供钠，钾和钙离子，帮助细胞调节细胞膜功能。北京医用细胞培养基厂家直销

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