重庆RPMI-1640细胞培养基源头直供

    Ham’sF-12营养混合物（Ham’sF-12NutrientMixture）Ham’sF-12营养混合物（Ham’sF-12NutrientMixture）是由Ham在1969年以Ham’sF-10营养混合物为基础设计而成的，初用于CHO细胞的无血清培养。Ham’sF-12常作为无血清培养的基础培养液，在低血清含量下时，特别适合单细胞培养和克隆化培养，添加血清后也广泛应用于细胞和原代细胞的培养，如大鼠肝细胞、大鼠前列腺上皮细胞、软骨细胞、大鼠成肌细胞、鸡胚胎细胞等。此外，Ham’sF-12与DMEM等体积混合后，得到的DMEM/F12培养基营养更为丰富，使用更为较广。Ham’sF-12营养混合物（Ham’sF-12NutrientMixture）L-谷氨酰胺（Glutamine）是细胞培养中所必需的一种营养元素，但其在溶液中不稳定，会自发降解，不含L-谷氨酰胺的培养基，可以根据研究需要任意调整L-谷氨酰胺的用量，在使用时添加新鲜的L-谷氨酰胺或其替代物更利于细胞的生长。 TNM-FH昆虫培养基可用于各种鳞翅类昆虫细胞的培养。含有多类细胞培养所需的氨基酸、无机盐等多种成分。重庆RPMI-1640细胞培养基源头直供

    无血清培养基中通常需要添加一些额外的组分，才能帮助细胞贴壁生长，包括以下几大类物质：1）促贴壁物质：一般为细胞外基质，如纤连蛋白、层粘连蛋白等。它们还是重要的分裂素以及维持正常细胞功能的分化因子，对许多细胞的繁殖和分化，起着重要作用。纤连蛋白主要促进来自中胚层细胞的贴壁与分化，这些细胞包括成纤维细胞、肉瘤细胞、粒细胞、肾上皮细胞、肾上腺皮质细胞、CHO细胞、成肌细胞等。2）促生长因子：针对不同细胞添加不同的生长因子。也是刺激细胞生长、维持细胞功能的重要物质，有些是许多细胞必不可少的，如胰岛素。3）酶抑制剂：培养贴壁生长的细胞，需要用胰酶消化传代，在无血清培养基中需含酶抑制剂，以终止酶的消化作用，达到保护细胞的目的。常用的是大豆胰酶抑制剂。4）结合蛋白和转运蛋白：常见如转铁蛋白和牛血清白蛋白。牛血清白蛋白的添加量比较大，可增加培养基的粘度，保护细胞免受机械损伤。许多旋转式培养的无血清培养基都含有牛血清白蛋白。5）微量元素：硒是常见的。安徽DMEM细胞培养基Ham’s F-12常作为无血清培养的基础培养液，在低血清含量下时，特别适合单细胞培养和克隆化培养。

    1.细胞培养基的种类按照细胞培养基的发展历史，细胞培养基大致可分为平衡盐溶液、天然细胞培养基、合成细胞培养基、无血清细胞培养基、限定化学成分细胞培养基等几大种类。（balancedsaltsolution，BSS）BSS主要是由无机盐、葡萄糖组成，它的作用是维持细胞渗透压平衡，保持pH稳定及提供简单的营养。其主要用于细胞的漂洗、配制其他试剂等。几种常用的BSS配方如下（表1-1）。D-Hank's与Hank's的一个主要区别是前者不含有Ca2+和Mg2+，因此D-Hank's常用于配制胰酶溶液。因为Ca2+、Mg2+是细胞膜的重要组成成份，参与细胞粘附等功能，使用不含Ca2+、Mg2+的BSS可避免细胞结团。此外，Hanks液和Earle液是常用的BSS基础溶液，前者缓冲能力较弱，适合于密闭培养；后者缓冲能力较强，适合于5%CO2的培养条件。天然培养基指来自动物体液或利用组织分离提取的一类培养基，如血浆、血清、鸡胚浸出液等。其优点是营养成分丰富，培养效果良好，但缺点是成分复杂，来源受限且制作过程复杂、批间差异大。目前使用的天然培养基是血清，另外各种组织提取液、促进细胞贴壁的胶原类物质在培养某些特殊细胞也是必不可少。水解乳蛋白是乳白蛋白经蛋白酶和肽酶水解的产物。

    Leibovitz’sL-15培养基的缓冲系统由磷酸盐和游离碱基氨基酸组成，代替了传统的碳酸氢钠缓冲系统，同时，用半乳糖和**酸钠代替葡萄糖可以防止酸性代谢副产物的形成，有助于维持培养液PH的稳定，适合用于非CO2平衡环境的细胞培养。Leibovitz’sL-15培养基适用于猴肾细胞和HEP-2的培养、原代（如胚胎和成人组织）细胞分离、多种病毒的培养以及神经元的培养等。L-谷氨酰胺（Glutamine）是细胞培养中所必需的一种营养元素，但其在溶液中不稳定，会自发降解，不含L-谷氨酰胺的培养基，可以根据研究需要任意调整L-谷氨酰胺的用量，在使用时添加新鲜的L-谷氨酰胺或其替代物更利于细胞的生长。 Dulbecco’s 改良培养基–DMEM（Dulbecco’s Modified Eagle Medium）现已广应用于各种细胞的培养。

Waymouth’sMB752/1培养基是由CharityWaymouth研发出来的化学限定培养基，**初用于研究小鼠L株亚细胞系L929细胞在无血清条件下的营养、代谢和生长特性的研究。

Waymouth’sMB752/1培养基现已被拓展用于完整***以及其他许多细胞系的培养，如*细胞系的培养。

华晨阳所生产的细胞培养基含有多类细胞培养所需的氨基酸、维生素、无机盐等多种成分，但不含蛋白质、脂类或任何生长因子，有些细胞的培养可能需要搭配血清使用。

注意事项

本产品经过滤除菌，使用时应注意无菌操作，避免污染；

为保持本产品的比较好使用效果，请勿进行冻融处理；

本产品用于科研或进一步研究使用，不用于诊断疗。 Fischer’s培养基含有多类细胞培养所需的氨基酸、维生素、无机盐等多种成分。江苏细胞培养基

Dulbecco’s 改良培养基增加了非必须氨基酸、微量铁离子以及**酸钠。重庆RPMI-1640细胞培养基源头直供

    培养液的渗透压是一个非常重要的因素,细胞通常可耐受260mOsm/kg～320mOsm/kg。标准培养液的渗透压在此范围内波动。特别注意：向培养液中加入其它物质有可能会明显改变培养液的渗透压，特别是溶于强酸或强碱中的物质。向培养液中添加HEPES时需按以下方法调节钠离子浓度。缓冲系统大多数细胞所需pH在-。但是，细胞培养适pH值随培养的细胞种类不同而不同。成纤维细胞喜欢较高pH(-),而传代转化细胞系则需要偏酸pH(-)。由于多数培养液靠碳酸氢钠（NaHCO3）与CO2体系进行缓冲，因此，气相中的CO2浓度应与培养液中碳酸氢钠浓度相平衡。如果气相或培养箱空气中CO2浓度设定在5％，培养液中NaHCO3的加入量为；如果CO2浓度维持在10％，培养液中NaHCO3的加入量为。细胞培养瓶盖不应拧得太紧，以保证气体交换。HEPES是一种非离子缓冲液，在pH-范围内具有较好的缓冲能力，但是非常昂贵，在高浓度时对一些细胞可能有毒。HEPES缓冲液可与低水平的碳酸钠（）共用，以抵消因额外加入HEPES引起的渗透压增加。在这种培养条件下，细胞培养瓶的盖子应拧紧，以防止培养液中所需的少量碳酸盐散入空气中。大多数培养液中含有酚红作为pH指示剂，酸性培养液呈橙黄色，碱性培养液呈深红色。重庆RPMI-1640细胞培养基源头直供

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