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福建植物根组织外泌体透射电镜检测

来源: 发布时间:2023年02月18日

    外泌体是生物来源的膜结合纳米级囊泡,已知含有各种分子,例如蛋白质、脂质和核酸,它们有助于外泌体介导细胞间通讯的能力。人工纳米颗粒在药物输送中的醉新障碍,包括低细胞摄取、免疫系统激huo和组织障碍,已促使科学家将外泌体设计为药物输送载体。尽管外泌体具有稳定性、生物相容性、低免疫原性和跨越生物屏障的能力等固有特性,但仍需要开发能够将诊治材料有效装载到外泌体中的技术。在这里,我们介绍了一种简单的肽装备技术,可以在温和的装载环境中增强外泌体的货物装载潜力。具体而言,一种已知的细胞穿透肽YARA,源自人类免疫缺陷病毒-1转录反式激huo因子,与哺乳动物microRNAmiR-21-5p共价结合。然后将缀合物YARA-miR-21-5p与从间充质干细胞或ai细胞中分离出来的外泌体一起孵育,以进行加载。YARA-miR-21-5p的外泌体加载具有时间依赖性,并且通过孵育证明miR-21-5p的外泌体加载效率提高了倍。在有效的细胞摄取后,负载的外泌体迅速将YARA-miR-21-5p递送到哺乳动物细胞中。相对于未加载的外泌体和游离的YARA-miR-21-5p,加载的外泌体显着增强了人和小鼠成纤维细胞的增殖、迁移和侵袭,这是伤口愈合的重要步骤。 人体内多种细胞在正常及病理状态下均可分泌外泌体,包括干细胞、免疫细胞、内皮细胞、及平滑肌细胞等。福建植物根组织外泌体透射电镜检测

    细菌细胞外囊泡(EV)已被证明可以调节各种肺部疾病,但它们在asthma中的功能仍不确定。为了证明藤黄微球菌衍生的EV(MlEV)在asthma中的临床意义,我们招募了45名asthma患者(20名中性粒细胞性asthma[NA]患者,25名嗜酸性粒细胞性asthma[EA]患者)和40名健康对照者(HC)。当通过ELISA评估血清中MlEV特异性IgG1和IgG4的流行率时,发现asthma患者中的MlEV特异性IgG4(但不是IgG1)水平低于HC。在asthma患者中,NA患者的MIEV特异性IgG4水平显着低于EA患者。此外,血清MlEV特异性IgG4水平与FEV1(%)值呈正相关。在asthmaC57BL/6小鼠中,MlEVs通过减少支气管肺泡灌洗液中IL-1β和IL-17的产生以及肺组织中第3组先天性淋巴样细胞(ILC3s)的数量,显着减轻中性粒细胞气道炎症。为了阐明MlEV在NA中的功能机制,离体研究了MlEV对气道上皮细胞(AEC)和免疫细胞的影响。根据微阵列分析,MlEV上调了AEC中的hsa-miR-4517表达。此外,这种miRNA可以抑制单核细胞产生IL-1β,从而抑制ILC3激huo和中性粒细胞募集。这些发现表明,MlEV可能是一种新型诊治剂,可通过调节AEC中的miRNA表达来管理未解决的NA。 福建海洋动物组织外泌体鉴定流式细胞分选法纯度高,能特异性分选某种细胞来源的外泌体,不适于大体积样本的分选。

    基于毛nang来源的间充质干细胞(HF-MSC)的疗法可预防急性胰腺炎(AP)。然而,越来越多的证据表明,基于MSC的诊治主要涉及通过旁分泌作用分泌MSC衍生的小细胞外囊泡(MSC-sEV)。因此,本研究调查了HF-MSC-sEVs在AP中的诊治效果及其潜在机制。从培养的HF-MSC上清液中纯化SEV。sEVs在体外对雨蛙素模拟的胰腺腺泡细胞(PACs)的影响进行了分析。在雨蛙肽诱导的AP模型中检查了sEV在体内的诊治潜力。通过近红外荧光(NIRF)成像确定小鼠sEV的organ分布。收集血清标本和胰腺组织以分析体内炎症和细胞焦亡的抑制作用,以及适当的输注途径:腹膜内(ip)或静脉内(iv)注射。HF-MSC-sEVs被PACs吸收并提高了体外细胞活力。在体内,sEVs大量存在于胰腺中,与AP组相比,sEV处理小鼠的胰腺炎指标,包括淀粉酶、脂肪酶、炎症反应、髓过氧化物酶(MPO)表达和组织病理学评分均有显着改善,特别是通过尾静脉注射。此外,我们发现sEV可明显下调PAC和AP组织中关键细胞焦亡蛋白的水平。我们创新地证明了HF-MSC-sEVs可以减轻AP中PAC的炎症和细胞焦亡,这表明AP是一种令人耳目一新的无细胞疗法。

    将蛋白质装载到EV中的高度创新方法涉及使用WW标签修饰货物蛋白,该标签可被Ndfip1识别,Ndfip1是一种含有L结构域的泛素连接酶,可泛素化货物蛋白,在生物发生过程中将其引入EV41。与CRY2系统不同,附加到Cre的WW标签在执行其功能时与WT蛋白一样有效。WW-Cre在EV介导的递送至受体细胞后发挥功能,并且WW-Cre以依赖于Ndfip1的方式加载到EV中。该方法巧妙地利用了细胞的内源性出芽和蛋白质加载系统,该系统可以扩展以加载诊疗性蛋白质进入EV。与CRY2-CIB1加载方法相比,该系统具有一些优势。首先,WW结构域比CRY2蛋白小得多,与人类CRY2的593个残基相比,only测量了约40个残基。可以说,较大的结合蛋白会带来更高的干扰货物蛋白功能的风险,从而限制诊疗效果。 通常认为胞外囊泡为外泌体和微囊泡,分别来自核内体系统和质膜。

    外泌体在心肌梗死后的诊治中的成功应用取决于对其在心脏信号传导和调节中的作用的更好理解。在这里,我们报道了心肌梗死(MI)后循环的外泌体携带LncRNATUG1,它通过抑制HIF-1α/VEGF-α轴来下调血管生成,并且这种作用可以通过远程缺血调节(RIC)来抵消。通过左冠状动脉结扎(MI模型)和再灌注(缺血/再灌注I/R模型)诱发MI的大鼠被随机分为RIC、MI(I/R)或假手术(SO)对照。还利用了一项队列研究和一项针对MI患者的随机对照试验的数据,前者涉及未接受经皮冠状动脉介入诊治(PCI)的患者,后者涉及接受PCI的患者。外泌体浓度在大鼠(MI和I/R模型)以及人类(有和没有PCI)的干预组(RIC与对照组)之间没有差异。然而,MI和I/R外泌体减弱了HIF-1α、VEGF-α和内皮功能。LncRNATUG1在MI和I/R外泌体中增加,但在SO和RIC外泌体中减少。HIF-1α表达随MI和I/R外泌体而下调,但随RIC外泌体而增加。外泌体抑制通过RIC外泌体抑制HIF-1α上调。VEGF-α被鉴定为HIF-1α调节的靶基因。HIF-1α的敲低降低了VEGF-α、内皮细胞管形成。HIF-1α的过度表达产生相反的效果。用外泌体抑制剂GW4869和HIF-1α抑制剂si-HIF-1α转染和共转染293T细胞证实了外泌体-LncRNATUG1/HIF-1α/VEGF-α通路。 干细胞外泌体可用于中风的治理,改善神经预后,增加血管与神经生成。湖南水果外泌体透射电镜检测

PD-L1除表达于细胞膜外,还可以外泌体型或可溶型形式分泌到细胞外。福建植物根组织外泌体透射电镜检测

从体液中高精度分离小细胞外囊泡 (sEV) 对于开发下一代液体活检和再生疗法至关重要。然而,目前的 sEV 分离方法需要专门的设备和耗时的协议,并且难以产生高纯度的 sEV 亚群。在这里,我们介绍了通过波柱激发共振 (ANSWER) 进行的声学纳米级分离,它允许单步、快速(<10 分钟)、高纯度(>96% 小外泌体,>80% 外泌体)分离来自无需任何样品预处理的体液样品。粒子通过激发共振以尺寸选择性的方式迭代偏转。这种以前未发现的现象使用表面声波在流体中产生虚拟的、可调谐的柱状声场模式。无需样品预处理或复杂纳米制造方法的高精度 sEV 分离已使用 ANSWER 进行了证明,显示出作为强大工具的潜力,可以对 sEV 亚群的复杂性、异质性和功能进行更深入的研究。福建植物根组织外泌体透射电镜检测

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