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上海血浆外泌体透射电镜检测

来源: 发布时间:2022年10月10日

基于免疫细胞来源的外泌体能够介导和调节机体对中流的免疫反应,外泌体在中流免疫zhiliao方面的潜力受到广fan关注。其中树枝状细胞产生的外泌体包含大量的MHC-多肽复合物和免疫刺激相关的分子,能够激huo相关的T细胞,介导体内抗中流应答,在多个临床试验中表现出良好的抗中流疗效。Morse等考察了树枝状细胞外泌体对非小细胞肺ai患者的疗效。结果表明,患者对树枝状细胞外泌体耐受性良好,1/3患者表现出了对树枝状细胞外泌体的T细胞响应,2/4患者自然杀伤细胞活性得以激huo。微流控技术是利用外泌体在微量体上的物理和生物化学特性来进行快速有效地分离,省时高效。上海血浆外泌体透射电镜检测

外泌体(exosomes)是一类由细胞分泌到胞外的囊泡。与其他两种胞外囊泡(微囊泡和凋亡小体)相比,外泌体在产生方式、尺寸、密度和内容物等方面存在明显差异。不同于微囊泡“出芽”的形成方式,外泌体主要通过胞吐过程释放至细胞外:首先细胞膜向内凹陷形成早期核内体(earlyendosomes),早期核内体进一步内陷形成多泡体(multivesicularbodies,MVBs),其中一部分多泡体与溶酶体(lysosome)融合,进而降解;另一部分与细胞膜融合,将其内部所包含的囊泡释放至胞外,即为外泌体。外泌体具有独特的物理化学性质,其直径为30~200nm,密度为1.13~1.19g/mL,组成包括细胞来源相关的脂质、蛋白质、RNA、DNA等物质,在其表面连接有大量的糖链,如甘露糖、聚乳糖胺和α2,6-唾液酸等。上海体液外泌体small RNA测序妊娠期间,胎盘可释放外泌体到母体循环,在正常妊娠或胎盘相关妊娠并发症中发挥重要作用。

在免疫系统中,淋巴细胞、树突状细胞、巨噬细胞、肥大细胞等均可以产生外泌体。研究表明免疫细胞来源的外泌体能够明显影响机体的免疫调节机制,包括调节抗原呈递、免疫激huo、免疫监督等。不同免疫细胞来源的外泌体功能不同,以树突状细胞(该细胞具有免疫刺激能力,是目前能够激huo初始T细胞的抗原递呈细胞)来源的外泌体为例,其外泌体的免疫刺激作用取决于来源细胞的成熟状态。成熟的树突状细胞外泌体内包含能够直接激huoT细胞的MHCclassⅠ和MHCclassⅡ,共刺激分子如CD40、CD8、CD86和热激蛋白,这些分子使树突状细胞来源的外泌体具有抗原呈递、调节免疫响应的生物功能。

除运输药物进行疾病zhiliao之外,外泌体还能进行免疫zhiliao,外泌体免疫zhiliao和载药zhiliao。进行免疫调节时,外泌体通常运载TGF-β1、粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)或MAGE抗原等物质。在这些研究中,分泌外泌体的母代细胞往往选用具有很好抗原递呈(antigenpresentation)能力的树突细胞或者中流细胞。Cao等采用鼠B淋巴瘤细胞作为母代细胞,通过热处理的方式使淋巴瘤细胞分泌的外泌体含有更多的热休克蛋白(HSP60和HSP90)和其他一些刺激免疫的分子,如主要组织相容性复合物(MHC-I和MHC[1]II)以及CD40、CD86等,与未热处理的鼠B淋巴瘤细胞分泌的外泌体相比,热处理后分泌的外泌体可以增强对T细胞的激huo能力,从而增强这种基于外泌体的疫苗的抗中流能力。外泌体由于包含的内容物具有明显的组织特异性,为其能成为瘤早期诊断的生物标志物提供了重要保障。

外泌体(Exosome)是由细胞分泌而来的微小囊泡,直径约为30-200 nm,形态也呈现出多样性。长链非编码RNA(long non-coding RNA)是一类转录本长度超过200nt、不编码蛋白的RNA。 近年来的研究表明lncRNA能在标贯遗传、转录及转录后水平上调控基因表达,参与了X染色体沉默、基因组印记以及染色质修饰、转录jihuo、转录干扰、核内运输等多种重要的调控过程,与人类疾病的发生、发展和防治都有着密切联系。 lncRNA芯片对lncRNA进行功能研究也被更多的关注,通过设计不同的lncRNA探针,可以更加快速、高通量地筛选出疾病或特定生物学过程中差异表达的lncRNA和mRNA信息,找到lncRNA的靶基因位点深入分析调控机制。外泌体在人体内分布广fan,可以穿过细胞膜,不易引起免疫反应,作为药物载体具有独特优势。湖北外泌体摄取

在选择外泌体作为中流诊断与预后监测的分子标志物时应考虑到中流异质性的发生机制。上海血浆外泌体透射电镜检测

血清中的miR-122和miR-145非常不稳定, 将血清在4 °C短期保存期间即发生降解, 这可能是由外泌体的异质性所导致的。–80 °C保存被公认是保存各种生物标本如尿、牛奶、血液和支气管肺泡灌洗液适宜的保存环境, 虽然这样保存血浆可能产生含有大量“污染物”的外泌体。4 °C保存虽然容易导致外泌体中蛋白和核酸的损失, 但却能够避免冻融过程造成的囊泡破坏。外泌体虽然建议保存于-80 °C环境下, 但在处理或运输过程中有时很难维持这种低温条件。CHAROENVIRIYAKUL等提出一种冻干法以保存外泌体, 在冷冻过程中使用海藻糖作为保护剂, 海藻糖可以提供生物保护作用, 如稳定蛋白质、细胞膜和脂质体; 减少冷冻过程中冰的形成; 防止蛋白质以及外泌体的聚集; 减少分离和保存过程中细胞外囊泡的损失等。上海血浆外泌体透射电镜检测

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