美国密度精子分析VCL

CASA系统进行**分析应注意以下几点：

3.2**分析仪阈值的确定（1）精子灰度、对比度阈值：由于分析仪是根据灰度的高低来判断精子的真伪，对亮度和对比度要求特别高，检测时应多次试用，寻找能准确识别精子的比较好灰度阈值[8]。（2）碎片：测定精子浓度准确性受**中细胞成份和非精子的颗粒物质的干扰，测定活动精子的百分率也受精子中非精子物质的影响[9]，这些也是需要注意的。对于系统误认为精子的非精子成分，如精原细胞、白细胞和非白细胞颗粒等，可人为准确记数后在可删除杂质一栏将其舍去。3.3出现1次异常结果应间隔复查反复检查2�3次方能得出比较正确的结果。3.4对于无精子的患者应仔细进行视野检查注意不要将杂质误认为精子计数在内，应将**3000ɡ离心15分钟后，再涂片检查，确认无精后再出报告。 男性精液检测主要依赖计算机辅助精子分析仪(computer assistant semen analyses，CASA)。美国密度精子分析VCL

1.基本检查：是确定精液变量稳定的常规方法，不仅是男科实验室，任何开展精液检查的实验室都能遵循。精子计数依然推荐使用改良Neubauer血细胞计数板的方法，但计数的方法有了改变。明确推荐了伊红笨胺黑染色法作为精子存活率诊断的优先方法，伊红染色和低渗肿胀实验只作为备选方法。删减了参考值下限的描述。对于精子活动率大于40%的样本没有必要做存活率评估。与第5版手册中淡粉色判读为活精子不同，明确了只有精子头为白色的精子为活精子、淡粉色为死精子。临床数据表明，鉴别快速前向运动精子非常重要。因此，关于精子活力分级，第6版手册建议恢复到快速前向运动、慢速前向运动、非前向运动和不活动4个活力级别，但精子活动率的参考值范围却依然是按前向运动(PR)、非前向运动(NP)、不活动(IM)3个活力级别计算。第6版手册强调，精子形态学评估的价值不仅在于其可用于判断自然妊娠和辅助生殖技术(ART)结局的预后，还可以为男性生殖***包括睾丸和附睾功能判断提供更多诊断信息。对于3%和5%的精子“正常”形态率的判断，则要求必须由训练有素的人员评估1500个精子来完成；对于无尾精子(只有头部的精子)超过总精子数20%的精液，应单独计算并在报告中注明；浓度精子分析精子动力分析‌精子分析可以分析参数有，曲线速率（VCL）‌：精子头沿其实际曲线运动的时均速率。

美国Hamilton Thorne的TOX IVOS精子分析仪已经被FDA和国内外毒理学实验室所使用。本试验研究目的对精子分析仪和血细胞计数板在大鼠附睾精子计数结果的比较验证。方法选取三批次雄性SD大鼠60只,每批20只,对三批次雄鼠的精子计数进行比较。健康雄鼠通过戊巴比妥钠麻醉实施安乐死后,取左侧附睾尾称重,将附睾尾部放入37℃预热的含有M199培养液平皿中,剪碎附睾尾,放入培养箱中37℃孵育5 min,然后吸取1份精子悬液,用M199培养液进行一定倍数的稀释,混匀后,取1滴稀释液,滴入精子分析仪**载玻片上,将载玻片放入TOX IVOS精子分析仪载物台,进行精子计数,同时吸取稀释后的精子悬液滴入血细胞计数板内,通过光学显微镜进行计数,比较两种计数方法的差异性。结果***批次雄鼠精子分析仪和血细胞计数器的精子计数结果分别为70.2±33.2,61.0±27.1;第二批次雄鼠精子分析仪和血细胞计数器的精子计数结果分别为128.8±116.8,114.6±86.9;第三批次雄鼠精子分析仪和血细胞计数器的精子计数结果分别为165.9±91.7,140.0±59.6。三个批次的精子分析仪和血细胞计数板的精子计数结果无统计学差异(P>0.05)。结论精子分析仪是一种方便、可靠、快速、高效的研究工具,在生殖毒理学研究中具有重要的应用价值。

CASA，即计算机辅助精子分析，是一种利用技术手段对精子活力、浓度和形态进行精确评估的方法。WHO第五版指南强调，相比人工检测，CASA提供更准确的数据和精子动力学参数，如前向运动和超活化运动，以及获能精子特征参数。研究显示，CASA检测的精子参数与体内外受精成功率和受孕时间有***关联。使用CASA分析仪，通常通过相差显微镜识别活动精子，适用于精子动力学分析。但要确保可靠结果，操作者需注意标本制备、帧频率、精子浓度等因素。每份样本至少需要分析200个活动精子的运动轨迹，更多精子样本有助于分类和变异性的分析。国内已有自主研发的精子分析仪，通常进行两次分析，每次至少200个精子，结果通过统计学分析得出。CASA在评估精子浓度时，需精确测量精子体积，确保**完全液化并充分混匀。计数板的精确性和计数一致性是关键，每次检测需满足5个视野和200条以上精子的比较低要求。对于高浓度**，可能需要稀释以减少误差。形态分析方面，CASA能够定量评估精子头部、中段和主段，尾部缺陷可通过活力评估。对于碎片过多或黏稠的**，可能需要洗涤以减少背景干扰。CASA中涉及一系列术语，如VCL（曲线速度）、VSL（直线速度）等，它们反映了精子运动的不同特性。通过计算机图像处理功能对显微镜下放大的精子图像进行识别和跟踪计算，从而得出精子动静态各项参数。

男科实验室中通常所指的质量包含三个方面：实验室内部质量、医生处置的质量以及结果的质量［3］。1．实验室内部质量与**分析有关的实验室内部质量主要是工作人员的素质和所采用仪器的质量。工作人员应经过特殊的培训‚仪器必须处于正常状态、确保准确的结果‚操作应符合规程［4］。CASA系统本身的质量难于评定。硬件‚如显微镜、影像摄影机和计算机经检查便可确定其可靠性。但软件并非如此‚软件中存在不确定的因素‚算法是软件中**重要的部分‚通常制造者保守这些秘密；因此‚有关软件的数学上、信息性的、统计学的或生物测量方面的检查实验室难于进行。该设备的设计紧凑，占用空间小，适合不同规模的实验室使用。北京濒危物种精子分析ALH

精子分析仪节省时间，提高实验室的工作效率，让医生和科研人员更快速地获取实验分析结果。美国密度精子分析VCL

前沿性检查：目前不作为生育力低下男性初步评估的常规方法。这一部分包括了非常专业化的、主要用于研究的方法和其他新兴检测技术。有研究认为，氧化应激可能是影响人类精子功能和妊娠结局的重要因素；新的证据也表明了精子DNA完整性和染色质组装与生育力的关系。前沿性检查一节中详细介绍了精子氧化应激和活性氧实验、精子染色质检测(苯胺蓝和色霉素A3染色)的具体实验操作及讨论。手册重写了计算机辅助精子分析(CASA)部分，强调了CASA对于检测精子浓度的局限性与质控要求，增加了CASA检测精子超活化运动的内容。对精子跨膜离子流和转运的功能分析，可更好地了解男性不育因素和男性生殖***疾病。为此，手册新增了检测精子跨膜离子流和转运的内容。美国密度精子分析VCL