生化实验室常用的缓冲系主要有磷酸、柠檬酸、碳酸、醋酸、巴比妥酸、Tris(三羟甲基氨基甲烷)等系统,生化实验或研究工作中要慎重地选择缓冲体系,因为有时影响实验结果的因素并不是缓冲液的pH值,而是缓冲液中的某种离子。如硼酸盐、柠檬酸盐、磷酸盐和三羟甲基甲烷等缓冲液都可能产生不需要的化学反应。硼酸盐:硼酸盐与许多化合物形成复盐、如蔗糖。柠檬酸盐:柠檬酸盐离子容易与钙结合,所以存在有钙离子的情况下不能使用。磷酸盐:在有些实验,它是酶的抑止剂或甚至是一个代谢物,重金属易以磷酸盐的形式从溶液中沉淀出来。而且它在pH7.5以上时缓冲能力很小。三羟甲基氨基甲烷:它可以和重金属一起作用,但在有些系统中也起抑制作用。其主要缺点时温度效应。这点往往被忽视,在室温pH是7.8的Tris缓冲液,4℃时是8.4,37℃时是7.4,因此,4℃配制的缓冲液在37℃进行测量时,其氢离子浓度就增加了10倍。在pH7.5以下,其缓冲能力极为不理想。艾伟拓稳定供应注射级海藻糖、蔗糖、TRIS/TRIS-HCl、HEPES等生物保护剂与缓冲盐。安徽HEPES批发
HEPES缓冲溶液的制备方法:一.500ml1MHEPES,pH=7.0Stocksolution的制备将19.15ghepes溶解在400ml蒸馏水中,加入0.5~1M的NaOH水溶液,调整至至少所需的pH(HePeS的有效ph范围为6.8~8.2),然后用蒸馏水定容至500ml,在4保存。二.加入少量盐的HEPESBuffer***(500ml)用HEPES6.5g、NaCl8.0g、Na2HPO4.7H2O0.198g、0.5MNaOH水溶液调节pH,*后定容。.2HEPES缓冲盐溶液的制备将1.6gNaCl、0.074gKCl、0.027gNa2HPO4.2H2O、0.2g葡聚糖(glucanordextran)和1gHEPES溶解在90ml蒸馏水中,用0.5MNaOH调节至所需的pH值,再用蒸馏水定容至100ml即可。辽宁羟乙基哌嗪乙磺酸HEPES需求AVT稳定供货注射级HEPES!
HEPES的使用方法:1)HEPES可以按所需浓度直接加入制备的培养液中进行过滤除菌。每1000ml培养液中加入2.38克HEPES,溶解后用lNNaOH调节ph7.2,过滤除菌后使用。此时HEPES的使用浓度为10mmol/L。2)亦可配成100x贮存液(lmol/L),使用前取99ml培养液加入lml贮存液,*终应用浓度仍为10mmol/L。lmol/L(100x)HEPES贮存液配制方法:取23.8gHEPES溶于90ml双蒸水中,用lNNaOH调pH至7.5一8.0,然后用水定容至100ml,过滤除菌,分装小瓶(2ml/瓶),4℃或-20℃保存。
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HEPESBuffer(1M,7.5pH)PreparationandRecipeHEPESbufferisoneoftheGood'szwitterionicbufferwithapHrangeof6.8-8.2.ItiscommonlyusedincellculturemediumasitspHiswellmaintainedwithchangesincarbondioxideconcentration.ToprepareLofHEPESBuffer(1M,7.5pH):ChangethevalueinthetextboxabovetoscaletherecipevolumeTable1.RequiredcomponentsComponentAmountConcentrationHEPES(mw:238.30g/mol)238.3g1MPrepare800mLofdH2Oinasuitablecontainer.Add238.3gofHEPEStothesolution.AdjustsolutiontodesiredpHby10NNaOH.AdddH2Ountilvolumeis1L.于4摄氏度保存。艾伟拓长期稳定供应注射级HEPES生物保护剂与缓冲盐。海南供注射用HEPES如何购买
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