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美国布鲁克多光子显微镜成像区域

来源: 发布时间:2024年07月10日

单束扫描技术可以高速遍历大视场(FOV)的神经组织:使用MPM对神经元进行成像时,通过随机访问扫描—即激光束在整个视场上的任意选定点上进行快速扫描—可以只扫描感兴趣的神经元,这样不仅避免扫描到任何未标记的神经纤维,还可以优化激光束的扫描时间。随机访问扫描(图1)可以通过声光偏转器(AOD)来实现,其原理是将具有一个射频信号的压电传感器粘在合适的晶体上,所产生的声波引起周期性的折射率光栅,激光束通过光栅时发生衍射。通过射频电信号调控声波的强度和频率从而可以改变衍射光的强度和方向,这样使用1个AOD就可以实现一维横向的任意点扫描,利用1对AOD,结合其他轴向扫描技术可实现3D的随机访问扫描。但是该技术对样本的运动很敏感,易出现运动伪影。目前,快速光栅扫描即在FOV中进行逐行扫描,由于利用算法可以轻松解决运动伪影而被普遍的使用。与传统的荧光显微镜相比,多光子显微镜具有更好的深度穿透能力和较低光损伤性,可以观察更深层的组织结构。美国布鲁克多光子显微镜成像区域

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作为一个多学科、知识密集型和资金密集型的高科技产业,多光子显微镜涉及医学、生物学、化学、物理学、电子学、工程学等多个学科。其生产工艺相对复杂,进入门槛较高。它是衡量一个国家制造业和高科技发展水平的重要标准之一。在过去的五年里,多光子显微镜的市场是集中的。由于投产成本高,技术难度大,目前涌现的新企业并不多。显微镜作为传统的高科技产业,并没有被其他技术颠覆,而是一直在不断融合发展相关技术,在医疗等精密检测领域发挥更大的作用。显微镜的商业化发展已进入成熟阶段,主要需求来自教学、生命科学研究和精密测试等。全球市场呈现温和增长趋势。而显微镜产品(如多光子显微镜、电子显微镜)正在刺激市场需求,多光子显微镜市场发展潜力巨大。美国多光子显微镜实验操作点扫描多光子显微镜可以深入样本并捕捉高质量的图像,但这个过程极其缓慢,因为图像是一次形成一个点。

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2020年,TonmoyChakraborty等人提出了加速2PM轴向扫描速度的方法[2]。在光学显微镜中,物镜或样品缓慢的轴向扫描速度限制了体成像的速度。近年来,通过使用远程聚焦技术或电调谐透镜(ETL)已经实现了快速轴向扫描。但远程对焦时对反射镜的机械驱动会限制轴向扫描速度,ETL会引入球差和高阶像差,无法进行高分辨率成像。为了克服这些限制,该小组引入了一种新的光学设计,可以将横向扫描转换为无球面像差的轴向扫描,以实现高分辨率成像。有两种方法可以实现这种设计。***个可以执行离散的轴向扫描,另一个可以执行连续的轴向扫描。如图3a所示,特定装置由两个垂直臂组成,每个臂具有4F望远镜和物镜。远程聚焦臂由振镜扫描镜(GSM)和空气物镜(OBJ1)组成,另一个臂(称为照明臂)由浸没物镜(OBJ2)组成。两个臂对齐,使得GSM与两个物镜的后焦平面共轭。准直后的激光束经偏振分束器反射进入远程聚焦臂,由GSM进行扫描,使OBJ1产生的激光焦点可以进行水平扫描。

多光子激光扫描显微镜行业发展,世界多光子激光扫描显微镜产业主要布局在德国和日本,德国是以徕卡显微系统和蔡司为,而日本以尼康和奥林巴斯公司为,2020年,上述企业占据着世界多光子激光扫描显微镜市场64.44%的市场份额,其发展战略左右着多光子激光扫描显微镜市场的走向。目前世界市场对多光子激光扫描显微镜的需求在增长,中国市场这方面的需求增长更快,未来五年多光子激光扫描显微镜市场的发展在中国将具有很大的发展潜力。多光子显微镜可以更好的了解神经信号之间复杂动态的编码过程。

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对于双光子(2P)成像,散焦和近表面荧光激发是两个相对较大的深度限制因素,而对于三光子(3P)成像,这两个问题**减少。然而,由于荧光团的吸收截面远小于2P,三光子成像需要更高的脉冲能量才能获得与2P相同激发强度的荧光信号。功能性3P显微镜比结构性3P显微镜要求更高,后者需要更快的扫描速度以便及时采样神经元活动。为了在每个像素的停留时间内收集足够的信号,需要更高的脉冲能量。复杂的行为通常涉及大规模的大脑神经网络,这些网络既有本地连接,也有远程连接。为了将神经元的活动与行为联系起来,需要同时监测***分布的超大型神经元的活动。大脑中的神经网络将在几十毫秒内处理输入的刺激。为了理解这种快速神经元动力学,MPM需要快速成像神经元的能力。快速MPM方法可分为单束扫描技术和多束扫描技术。双光子显微镜可以在保持细胞活性的情况下进行成像,这对于研究细胞生理学和生物化学过程非常有用。美国荧光多光子显微镜Ultima Investigator

双光子共聚焦显微镜比单光子共聚焦显微镜具有更亮的横向分辨率和纵向分辨率。美国布鲁克多光子显微镜成像区域

在生物成像中,我司多光子显微镜具有清晰,快速,深层,活这四个方面。结合了多光子上转化材料以及时间编码的结构光超分辨技术,实现了快速(50MHz的扫描速度),超分辨(超衍射极限)成像。作为一种新的高速,超高分辨率的成像系统,MUTE-SIM可以帮助我们对快速运动的生物图像进行分辨率高的成像。尽管关于深度成像的应用我们没有进一步展示,但是结合1560nm近红外光相对于可见光更佳的穿透性,我们相信该技术将有利于对生物组织进行高速,超分辨,高深度地成像,有助于生物影像学的发展。滔博生物TOP-Bright是一家集研发,生产,销售于一体的专注于神经科学产品及致力于向高校、科研机构等领域提供实验室一体化方案的高科技企业。业务服务范围已遍布至全国各地几百家实验室。目前公司主营产品是享誉全球的国际品牌和产品,这些仪器设备都是科学研究所必备且不可替代的基础仪器。美国布鲁克多光子显微镜成像区域