在使用预装培养基时,装有培养基的容器需要以适当的温度存储,不要将其暴露在阳光下或在高温环境中存储。因为温度过高会致使培养基变质,影响实验效果。而温度过低则会导致细胞生长缓慢,也会影响实验效果。因此在使用前需要查看培养基的理想存储条件,进行妥善的保存。当使用预装培养基时,需要进行无菌操作。先用手或棉花球蘸上医用酒精、经冷却压缩器或火烧消毒的铁钻区外部表面消毒,再取样放入容器或烧杯中。在转移前,需要仔细消毒取样的容器或烧杯,以保证悬浮在空气中的细菌和病毒不会在样品中繁殖,造成别样的影响。液体培养基的配方和制备方法不同于干粉培养基,需要在满足卫生标准和生物安全操作指南的情况下进行。缓冲肉汤
预装培养基可能对某些微生物产生毒性影响。预装培养基在生产过程中可能含有某些添加剂,例如维生素、抑菌剂和染料等,以防止微生物污染。然而,这些添加剂也可能会影响微生物的生长和生命周期。比较好的做法是在不确定是否适合使用预装培养基的情况下,可以尝试使用小批量的预装培养基来进行一些试验,以确定微生物能否正常生长。什么样的微生物较适合使用预装培养基呢?通常,较为简单的微生物,例如大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、肺炎克雷伯菌等,是预装培养基的合适候选者。这些微生物有着比较简单和标准的营养需求,容易在预装培养基上生长。对于一些较为复杂的微生物,例如细菌、细胞和非典型微生物,预装培养基毫无疑问是无法满足其复杂的营养需求的。自诱导LB肉汤培养基培养基还可以根据需要进行额外的修改和调整。
培养基的pH必须控制在一定的范围内,以满足不同类型微生物的生长繁殖或产生代谢产物。各类微生物生长繁殖或产生代谢产物的较适pH条件各不相同,一般来讲,细菌与放线菌适于在pH7-7.5范围内生长,酵母菌和霉菌通常在pH4.5-6范围内生长。值得注意的是,在微生物生长繁殖和代谢过程中,由于营养物质被分解利用和代谢产物的形成与积累,会导致培养基pH发生变化,若不对培养基pH条件进行控制,往往导致微生物生长速度下降或(和)代谢产物产量下降。因此,为了维持培养基pH的相对恒定,通常在培养基中加入pH缓冲剂,常用的缓冲剂是一氢和二氢磷酸盐(如KH2PO4和K2HPO4)组成的混合物。K2HPO4溶液呈碱性,KH2PO4溶液呈酸性,两种物质的等量混合溶液的pH为6.8。当培养基中酸性物质积累导致H+浓度增加时,H+与弱碱性盐结合形成弱酸性化合物,培养基pH不会过度降低;如果培养基中OH-浓度增加,OH-则与弱酸性盐结合形成弱碱性化合物,培养基pH也不会过度升高。
细菌培养基之面粉琼脂培养基:面粉60g,琼脂20g,水1000ml把面粉用水调成糊状,加水到500ml,放在文火上煮30分钟。另取500ml水,放入琼脂,加热煮沸到溶解后,把两液调匀,补充水分,调整pH值到7.4,分装,灭菌,备用。微藻培养基,BG-11培养基:NaNO3 1.5g,K2HPO4 ·3H2O0.04g,MgSO4·7H2O0.075g,CaCl2 ·2H2O0.036g Citric Acid (柠檬酸)0.006g,Ferric ammonium citrate(柠檬酸铁铵0.006g,EDTA (dinatrium-salt) 0.001g,Na2CO3 0.02g,A5 + Co solution * (A5溶液1000×)1ml Distilled Water (蒸馏水)919ml。
在选择培养基之前,必须注意其抗性、生长速度和生长环境。
预装培养基还可以减少实验中的变量。手工制备培养基可能存在差异,例如组成有所不同、pH 值不同等,这些都会影响实验结果的准确性。使用预装培养基可以减少这些变量的影响,并提高实验结果的可重复性。预装培养基是由专业实验室制备的,并且备有合适的数量和质量保证。手工制备的培养基可能因为技术不精、物料不全等原因造成品质不佳的情况,从而影响实验效果。使用预装培养基可以保障培养基质量,从而提高实验效果的准确性。预装培养基具有更高的实验效率、更好的实验安全性、更少的变量和更高的培养基质量。与手工制备培养基相比,预装培养基在实验室研究中更具优势,可提高实验室的效率和准确性。选择培养基时,必须考虑具体微生物的生长条件。反硝化细菌培养基
常用的培养基中添加的基本营养物质包括碳源、氮源、磷酸盐、有机物、无机盐和微量元素。缓冲肉汤
在配制培养基时应尽量利用廉价且易于获得的原料作为培养基成分,特别是在发酵工业中,培养基用量很大,利用低成本的原料更体现出其经济价值。例如,在微生物单细胞蛋白的工业生产过程中,常常利用糖蜜(制糖工业中含有蔗糖的废液)、乳清(乳制品工业中含有乳糖的废液)、豆制品工业废液及黑废液(造纸工业中含有戊糖和己糖的亚硫酸纸浆)等都可作为培养基的原料。再如,工业上的甲烷发酵主要利用废水、废渣作原料,而在我国农村,已推广利用人畜粪便及禾草为原料发酵生产甲烷作为燃料。另外,大量的农副产品或制品,如鼓皮、米糠、玉米浆、酵母浸膏、酒糟、豆饼、花生饼、蛋白胨等都是常用的发酵工业原料。缓冲肉汤
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