对铜绿假单胞杆菌的复苏,要先准备一个茶缸或1000毫升的烧坏,内装2/3杯37摄氏度的温水,从液氮中取出冻存管、迅速置于温水中并不断搅动。使冻存管中的冻存物在1分钟之内融化。打开冻存管,将细胞悬液吸到离心管中。1000rpm离心10分钟,弃去上清液。沉淀加10毫升培养液,吹打均匀,再离心10分钟,弃上清液。加适当培养基后将细胞转移至培养瓶中,37摄氏度培养,第二天观察生长情况。器材通常为液氮罐、冻存管(塑料螺口冻存管或安瓿瓶)、离心管、吸管、离心机等。试剂通常为0.25%胰酶、培养基、含保护剂的培养基(即冻存液)。冻存液配制是培养基加入甘油或DSMO,使其终浓度达5—20%。保护剂的种类和用量视不同细胞而不同。配好后4摄氏度下保存。大肠杆菌在动物群体间的传染的季节发病特征不是非常明显。北方中间根瘤菌菌株
传染部位:1、肠内传染:急性腹泻病,对于抵抗力差的老人及儿童甚至可引起溶血尿毒综合征。肠外传染:(1)尿路传染:泌尿系统是大肠埃希菌常见的肠道外传染部位,其发生与年龄、性别和生殖泌尿系统畸形等因素有关。(2)腹腔传染:大肠埃希菌是肝硬化患者自发性腹膜炎常见的致病菌,其来源主要包括腹腔内排泄物污染。腹腔或腹腔内脏脓肿、胰腺假性囊肿、阑尾炎、小肠憩室炎症穿孔及全身传染等。此外腹腔内传染多合并厌氧菌传染,脓液多有臭味。卡坦青霉菌种霉菌也是常见的菌株,包括绿霉菌、黄曲霉等。
导致腹泻的大肠埃希菌根据血清型的不同,分为肠侵袭性大肠杆菌(EIEC)、肠致病性大肠杆菌(EPEC)、肠产毒性大肠杆菌(ETEC)、肠出血性大肠杆菌(EHEC)、肠集聚型大肠杆菌(EAEC)、产志贺毒的大肠杆菌(STEC,可引起出血性结肠炎和溶血尿毒综合征)等。大肠杆菌主要是侵袭力、内有害物质、肠有害物质等致病因素引起各种炎症,如胆囊炎、泌尿系传染、肺炎、新生儿脑膜炎、伤口传染、菌血症及腹泻等。大肠杆菌肠有害物质是引起腹泻的主要致病因子。内有害物质还可引起发热、休克、DIC等。
抗体和补体对细菌的溶解作用:在许多传染中,机体能产生相应抗体(lgG、lgM、lgA),当细菌表面抗原和lgG、lgM结合的免疫复合物一旦通过经典途径使补体活化或由分泌型 lgA或聚合的血清lgA通过替代途径活化补体,即可引起细胞膜的损伤,发生溶菌。实验证明补体的溶菌作用只对革兰氏阴性菌,其中包括霍乱弧菌、大肠杆菌、痢疾杆菌、伤寒杆菌等发挥作用。但这种作用往往并不彻底,只使杆菌菌体膨大或变为球形,不引起溶解。但若于试验中系统中加入适量的溶菌酶,则可出现溶菌现象。菌株与人类健康之间存在紧密关系,在疾病预防中有普遍的应用前景。
大肠杆菌又称大肠埃希菌,革兰氏阴性短杆菌,隶属肠杆菌科,大小2.0-6.0um。有鞭毛,能运动,有菌毛,无芽孢,为需氧或兼性厌氧菌。大肠埃希菌抗原主要有O(菌体抗原)、K(表面抗原)、H抗原三种。大肠埃希菌为人类肠道内的正常菌群,正常情况下对人体不致病,当宿主抵抗力降低或细菌入侵肠外部位时,可成为条件致病菌而引起传染,如尿路传染、菌血症、败血症、伤口传染、肺炎、腹膜炎、阑尾炎、胆囊炎和脑膜炎等。大肠埃希菌某些血清型可致胃肠炎,与食入污染的食品和饮水有关,为肠外来源致肠内传染。大肠杆菌在常用的生化特性检测项目中,甲基红试验呈阳性。北方中间根瘤菌菌株
当前菌株资源的共享和利用也面临着知识产权和产权保护等问题。北方中间根瘤菌菌株
铜绿假单胞杆菌的冻干菌种是经冷冻干燥并抽真空保存的,开启后必须一次使用完,不能留菌粉下次再用,另外安瓿管里大部分仍是用牛奶作为保护剂,里面菌体为少数,复苏时要全部菌悬液接在新鲜培养基上,否则可能造成复苏不成功。菌种活化前,如要长期保藏,请将安瓿管保存在4-10摄氏度的环境下。操作前如有不明白之处,应先咨询专业人员,避免不必要的损失。菌种操作应在在无菌条件下进行;转钟完毕,废弃物应经灭菌再做丢弃处理,以免污染周围环境。复苏后,微生物菌种应保藏于建议的温度、清洁和干燥的地方,室温放置时间过长或导致菌种衰退。北方中间根瘤菌菌株
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