糖原染色的原理与操作方法是什么:(1)原理:过碘酸将血细胞内的糖原氧化,生成醛基。醛基与雪夫液中的无色品红结合,形成紫色化合物,定位于细胞质中。(2)操作方法:干燥涂片,滴加甲醛固定液固定10分钟,流水冲洗,晾干。滴加过碘酸溶液作用20分钟,流水冲洗,晾干。滴加雪夫液作用60分钟,流水冲洗,晾干。滴加甲基绿溶液复染10分钟,流水冲洗,晾干镜检。细胞的组织化学方法,是研究细胞成分常用的方法之一。它是利用化学试剂与细胞内的某些物质进行化学反应,从而在细胞局部形成有色沉淀物,再通过显微镜对组织内的生物化学成分进行定性、定位、定量研究。遇醋酸发生沉淀,胃粘蛋白则除外。天津口碑好的糖原染色试剂盒进货价
糖原染色法:染色原理细胞胞浆中存在糖原或多糖类物质(如糖蛋白、粘多糖、糖脂、粘蛋白等),过碘酸能使细胞内的多糖乙二醇基氧化为二醛基,其与Schiff试剂中的无色品红结合后呈现紫红色,沉积在细胞内多糖所在之处。染色步骤:1.组织石蜡包埋切片后脱蜡至水,蒸馏水洗2min(细胞爬片4%多聚甲醛固定后水洗);2.滴加过碘酸溶液,氧化5min;3.蒸馏水洗10min;4.滴加Schiff试剂,侵染10-20min;5.倾去Schiff试剂,流水冲洗10min;6.滴加苏木素染色液,染核1-2min;7.流水冲洗5min;8.酸性乙醇分化液分化口碑好的糖原染色试剂盒服务电话切取的材料应小而薄,便于固定液迅速渗入内部。
糖元染色试剂盒细胞生物学研究有以下几个方面。细胞生物学的研究内容十分普遍,主要包括。①细胞核、染色体以及基因表达的研究。②生物膜与细胞器的研究。③细胞骨架体系的研究。④细胞增殖及其调控。⑤细胞分化及其调控。⑥细胞的衰老与编程性死亡(凋亡)⑦细胞的起源与进化。⑧细胞工程。PAS染色,全称过碘酸雪夫染色(PeriodicAcid-SchiffStain),主要用来显示糖原和其他多糖物质,因此也称作糖原染色。另外,此染色方法还可以显示中性黏液性物质和某些酸性物质,以及软骨、垂体、色素、淀粉样物质、基底膜、霉菌等。PAS法的检测原理在于:过碘酸(也成为高碘酸)是一种强氧化剂。
糖原及粘液染色法:操作方法:(1)石蜡切片脱蜡至水。(2)0.5%过碘酸水溶液5分钟。或1%过碘酸95%酒精溶液(过碘酸再结晶应重新配制使用)。(3)蒸馏水洗,70%酒精洗。(4)Schiff氏液15-30分钟。(Schiff氏液从冰箱取出升至室温使用)(5)流水冲洗10分钟。(6)苏木素浸染细胞核2-3分钟。(7)脱水、透明、封盖。结果:糖原呈红色,细胞核呈蓝色。试剂配制:(1)0.5%过碘酸(HIO4)水溶液或70%酒精溶液。(2)Schiff氏试剂。碱性品红1g蒸馏水200ml1N盐酸(98.3ml比重1.16盐酸,加入蒸馏水成1000ml)20ml偏重亚硫酸钠或钾1g碱性品红1g加入200ml蒸馏水,搅拌加热沸腾,待冷却至50℃过滤,加入当量盐酸至25℃时加入偏重亚硫酸钠。置于暗处,两天后溶液变桔黄色或草黄色,然后加入少量活性碳并震荡、过滤,此时溶液应为无色。保存冰箱备用。溶液如显浅红色或草黄色,染色效果较差。该依据切片厚薄、组织的类别等决定。
染色流程相对简便、染液易配制的染色方法;选择染色流程简便的方法,无论对于量较多的整批次染色,还是较少量的染色均能够节省时间、更为便捷。选择染液易配制的方法,对自配染液(尤其是保存较短的染液)是较为重要的选择,不容易造成因染液配制问题而影响染色结果。如显示弹性纤维。醛品红染色法无论是从染色流程,还是染液配制都要比铁苏木精、间苯二酚碱性品红等染色方法要简单方便、省时,同时阳性着染对比度也很明显。特异性高、传统或经典的染色方法;特异、传统/经典的一些染色法在特殊染色方法的选择中往往作为选择。如显示淀粉样物质。过碘酸氧化时间不宜过久,氧化时的温度以18~22℃佳。浙江糖原染色试剂盒销售厂家
待冷却至50℃过滤,加入当量盐酸至25℃时加入偏重亚硫酸钠。天津口碑好的糖原染色试剂盒进货价
糖原及粘液染色法注意事项:1、糖原的固定要及时,而且标本要新鲜。2、如用无水酒精作糖原的固定剂,有它的弊病,因无水酒精渗透较慢,而且容易产生极化,(极化是糖原颗粒趋向于细胞的一端)。故用Gendre氏固定液效果较佳,其配法如下:苦味酸饱和于95%酒精85ml40%甲醛10ml冰醋酸5ml3、各种试剂必须化学纯,亚硫酸钠须有浓厚气味,器皿必须洁净而干燥,染色缸亦是。4、如果Schiff氏试剂,在经过活性碳吸附漂白后不显无色,首先应考虑试剂中的偏重亚硫酸钠是否失效。如果偏重亚硫酸钠气味不浓,使用时可考虑适当的增加用量。其次考虑碱性品红本身,常常虽属同一生产厂家,但不同批号,其效果就可能不同,应特别引起注意~天津口碑好的糖原染色试剂盒进货价
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