一种基于鼠尾胶原蛋白制备的可吸收止血的优点:1、本发明制作的止血材料采用温和的冷冻干燥操作工艺不光光提高了生产效率,同时避开了使用其他设备带来的成本上升问题。2、本发明专利生产的止血材料(止血海绵),其动物实验表明其具有非常好的止血效果。也可应用于内脏出血。具有广阔的应用前景。3、本发明制备的止血材料具有可完全被人体吸收,与出血创面一接触,其接触面迅速形成凝胶而粘附在出血创面上,外面则形成连续的压迫干层。启动凝血因子。同时,聚乙烯醇为成膜材料,两种的协同效应形成了一种理想的止血状态和结构。方法制作鼠尾胶原,观察全细胞膜片钳实验中,自制的鼠尾胶原对前庭毛细胞的贴壁黏附作用。金华鼠尾胶原直销价
实验应用:探讨应用鼠尾胶原在豚鼠前庭毛细胞膜片钳实验中的促进毛细胞贴壁效果。方法制作鼠尾胶原,观察全细胞膜片钳实验中,自制的鼠尾胶原对前庭毛细胞的贴壁黏附作用。结果无鼠尾胶原时,前庭毛细胞悬浮于外液,不宜封接;有鼠尾胶原时,前庭毛细胞贴附于培养皿底壁,易于封接和长时间(约8h)的观察和记录。鼠尾胶原对前庭毛细胞具有良好的贴壁黏附促进作用。结论鼠尾胶原能促进毛细胞贴壁,涂布鼠尾胶原有利于膜片钳实验的长时程记录,并且制作简便,成本低廉。宁波正规鼠尾胶原价格制备鼠尾胶原:离心,4000转/分,10-15分钟。
鼠尾胶原蛋白Ⅰ型使用方法及注意事项:通过醋酸抽提、氯化钠沉淀、磷酸氢二钠沉淀等步骤制备的。鼠尾胶原蛋白可用于包被细胞培养器皿,培养一些在普通细胞培养器皿中不易贴壁的细胞。也可用于制备三维胶,模拟真实的生长环境,使细胞在三维环境中生长。1,在使用鼠胶原蛋白型包被的细胞培养皿中检查到PC-12细胞的贴壁和生长。1mg/ml浓度以上,pH左右时可形成具有一定强度的三维胶,检查到NIH-3T3细胞在三维胶内正常生长、PC-12细胞在三维胶表面正常生长。使用方法:1、细胞培养器皿的表面包被推荐浓度:1-5ug/cm0.012mg/ml。按以下表格体积加到相应的培养器皿中。论鼠尾胶原能促进毛细胞贴壁,涂布鼠尾胶原有利于膜片钳实验的长时程记录,并且制作简便,成本低廉。
鼠尾胶原醋酸溶解:1.将鼠尾胶原加入到0.1M的醋酸中,制备成浓度为0.1%的溶液。在室温中搅拌1-3小时直到完全溶解。2.建议将溶液转移到拧口的玻璃瓶中,并小心的在瓶底铺上一层氯仿。氯仿的量约为胶原溶液的10%。不要晃动或搅拌。在2-8度中放置过夜。在无菌条件下转移上层的胶原溶液。我们不建议用过滤的方法无菌化。已经发现该方法会导致丢失蛋白。3.稀释一定数量的胶原溶液。4.按照6-10ug/cm2的浓度包被培养瓶。在室温或37度结合数小时或者2-8度过夜。利用鼠尾Ⅰ型胶原构建与人类自体骨组织化学成分和分子结构相近的仿生骨材料。
一种生物医用鼠尾胶原蛋白的提取方法:1.用0.03〜0.06mol/L的柠檬酸溶液溶解沉淀物,成透明澄清黏稠溶液;在冰水浴中,调节pH=6.5,用的3〜6mol/L的NaCl溶液缓慢加入上清液中,不断搅拌至溶液中白色的絮状物不再析出,4°C沉淀10小时,去除上清液,去除上清液,絮状溶液高速冷冻离心处理,收集沉淀;2.用0.03〜0.06mol/L的柠檬酸再次溶液溶解沉淀物,成透明澄清黏稠溶液,冰水浴中,调节PH=6.5;溶液依次通过阳离子交换树脂、阴离子交换树脂进行脱盐处理;(8)将脱盐后的胶原蛋白溶液,-40至-20°C预冻2〜4小时,然后真空冷冻干燥,冻干产品经进一步处理得到含水率在3%以下的胶原蛋白微粉,灭菌、包装,得到成品胶原蛋白粉末。注意事项:在室温下pH 中性时可迅速成胶,在操作过程中要 尽量保持低温。郑州正规鼠尾胶原销售厂家
一种基于鼠尾胶原蛋白:各材料重量配比为鼠尾胶原蛋白聚乙烯醇壳聚糖为5% 2% 1%,余量的水。金华鼠尾胶原直销价
鼠尾胶原蛋白I型在浓度1mg/ml以上,pH7左右时可形成具有一定强度三维胶,建议成胶浓度1-2mg/ml。胶原蛋白溶解于0.006mol/L乙酸中,在成胶过程中需要加入0.06X体积的0.1mol/LNaOH来中和。需要的溶液(均需要无菌、预冷):10xPBS(可含10mg/L的酚红用于pH指示)或10x培养液,0.1mol/LNaOH,0.1mol/L乙酸(一般不用),双蒸水不含细胞的三维胶原的制备(以配制1毫升,1mg/ml三维胶为例):将200ul生友鼠尾胶原蛋白I型(5mg/ml)加到置于冰浴的离心管中,加入690ulH2O。然后加到12ul0.1mol/LNaOH中(如果反过来把12ul0.1mol/LNaOH加到胶原溶液中,会由于NaOH不能迅速混匀而产生局部的胶原凝结),立即混匀。再加入100ul10xPBS或10x培养液,混匀后立即加到培养器皿中(混匀后pH为7左右,如果PBS或培养液中没有加酚红,初次使用时需要用pH试纸测试)。金华鼠尾胶原直销价