糖原染色是病理学中常规的染色方法之一,McManus在1946年较先使用高碘酸-雪夫技术显示黏蛋白,该法常用来显示糖原和其他多糖,该染色试剂盒不仅能够显示糖原,还能显示中性黏液性物质和某些酸性物质以及软骨、垂体、霉菌、色素、淀粉样物质、基底膜等。过碘酸(又称高碘酸)是一种强氧化剂,它能氧化糖类及有关物质中的1,2-乙二醇基,使之变为二醛,醛不Schiff试剂能结合成一种品红化合物,产生紫红色。由于高碘酸还可氧化细胞内其他物质,使用时应注意选择好高碘酸浓度和氧化时间,使氧化控制在既能把乙二醇基氧化成醛基又不至于过氧化,这是很关键的步骤。PAS技术是很少可检测不同种类的黏液物质(如糖原、黏蛋白和糖蛋白)的方法,但PAS技术却不能区别黏蛋白和糖原。若要冸确鉴别黏液物质(如黏蛋白或糖原),需加入糖原消化步骤。大多数情冴下可用α–淀粉酶或麦芽淀粉酶来催化糖原的糖苷键水解,形成水溶性的双糖-麦芽糖,在应用PAS技术之前将糖原从组织切片上除去。人类的唾液被认为是消化糖原的一种有效手段,但是出于安全以及缺乏标冸唾液的考虑,不主张应用唾液过碘酸将血细胞内的糖原氧化,生成醛基。江苏正规糖原染色试剂盒厂家直销
糖原及粘液染色法注意事项:1、糖原的固定要及时,而且标本要新鲜。2、如用无水酒精作糖原的固定剂,有它的弊病,因无水酒精渗透较慢,而且容易产生极化,(极化是糖原颗粒趋向于细胞的一端)。故用Gendre氏固定液效果较佳,其配法如下:苦味酸饱和于95%酒精85ml40%甲醛10ml冰醋酸5ml3、各种试剂必须化学纯,亚硫酸钠须有浓厚气味,器皿必须洁净而干燥,染色缸亦是。4、如果Schiff氏试剂,在经过活性碳吸附漂白后不显无色,首先应考虑试剂中的偏重亚硫酸钠是否失效。如果偏重亚硫酸钠气味不浓,使用时可考虑适当的增加用量。其次考虑碱性品红本身,常常虽属同一生产厂家,但不同批号,其效果就可能不同,应特别引起注意~上海咨询糖原染色试剂盒厂家供应糖原染色应用的范围比较广。
糖原染色在使用过程中需要注意以下几个方面:PAS染色时需于暗处加盖反应,染色时间10~20min(染色时间长短取决于试剂的质量和环境温度,SO浓度高,染色时间适当缩短;环境温度高,染色时间也应适当缩短,反之则需适当延长反应时间)。染色过程中不能接触伊红,以免造成颜色误差[4]。作糖原染色时,较好作消化对照,即取两张连续切片,其中一张脱蜡至水后,用1%淀粉酶于37℃消化30min,水洗后与不经消化处理的切片一起置0.5%高碘酸液氧化,如经消化处理的切片染色阴性,不经消化处理的切片染色阳性,即肯定为糖原[6]。偏重亚硫酸钠(钾)溶液配置后,不能保存,因此,必须现配现用,用过一次即应废弃。各种试剂必须是化学纯或者分析纯。器皿、染色缸必须洁净而干燥。
糖原染色:方法固定液Carnoy固定液:纯酒精60ml冰醋酸10ml氯仿30ml,也可以选用75%酒精配制1)过碘酸酒清夜配法:过碘酸(HIO.2HO)0.4g95%酒精35mlM/5醋酸钠(2.72g+蒸馏水100ml)5ml蒸馏水10ml保存于冰箱内,用棕色瓶,可用两周.2)Schiff氏液:0.5克碱性品红加入100毫升蒸馏水中,时时摇动三角瓶5分钟,使之充分溶解.冷却至50℃后过滤加入10毫升1N盐酸.冷却至25℃,加入0.5-1克偏重硫酸钠,在室温中至少静置24小时,然后密封冰箱保存.3)Schiff氏酒配置Schiff氏液11.5ml1NHCI0.5ml纯酒精23ml4)亚硫酸水1%偏重亚硫酸蒸馏水180ml的树胶溶解亚硫酸钠须有浓厚气味,器皿必须洁净而干燥。
糖原染色是病理学中常规的染色方法之一,McManus在1946年较先使用高碘酸-雪夫技术显示黏蛋白,该法常用来显示糖原和其他多糖,该染色试剂盒不仅能够显示糖原,还能显示中性黏液性物质和某些酸性物质以及软骨、垂体、霉菌、色素、淀粉样物质、基底膜等。过碘酸(又称高碘酸)是一种强氧化剂,它能氧化糖类及有关物质中的1,2-乙二醇基,使之变为二醛,醛不Schiff试剂能结合成一种品红化合物,产生紫红色。由于高碘酸还可氧化细胞内其他物质,使用时应注意选择好高碘酸浓度和氧化时间,使氧化控制在既能把乙二醇基氧化成醛基又不至于过氧化,这是很关键的步骤。PAS技术是很少可检测不同种类的黏液物质(如糖原、黏蛋白和糖蛋白)的方法,但PAS技术却不能区别黏蛋白和糖原。0.5%过碘酸水溶液5分钟。或1%过碘酸95%酒精溶液。福建提供糖原染色试剂盒生产厂家
动物材料取用时需对动物施以麻醉,常用的麻醉剂有氯仿和。江苏正规糖原染色试剂盒厂家直销
糖原pas染色液配制及使用方法:1、常规固定,常采用10%的福尔马林,常规脱水包埋。2、石蜡切片脱蜡入蒸馏水;冰冻切片直接入蒸馏水。3、自来水冲洗2~3min,再用蒸馏水浸洗2次。4、入过碘酸溶液,室温放置,一般不宜超过10min。5、自来水冲洗1次,再用蒸馏水浸洗2次。6、入SchiffReagent,置于室温阴暗处浸染。7、自来水冲洗10min。8、入苏木素染色液,染细胞核。9、酸性乙醇分化液分化。_x005f_x005f_x005f_x000c_10、自来水冲洗10~15min,更换蒸馏水清洗,使其返蓝。11、逐级常规乙醇脱水。二甲苯透明,中性树胶封固。江苏正规糖原染色试剂盒厂家直销