糖原及粘液染色法:操作方法:(1)石蜡切片脱蜡至水。(2)0.5%过碘酸水溶液5分钟。或1%过碘酸95%酒精溶液(过碘酸再结晶应重新配制使用)。(3)蒸馏水洗,70%酒精洗。(4)Schiff氏液15-30分钟。(Schiff氏液从冰箱取出升至室温使用)(5)流水冲洗10分钟。(6)苏木素浸染细胞核2-3分钟。(7)脱水、透明、封盖。结果:糖原呈红色,细胞核呈蓝色。试剂配制:(1)0.5%过碘酸(HIO4)水溶液或70%酒精溶液。(2)Schiff氏试剂。碱性品红1g蒸馏水200ml1N盐酸(98.3ml比重1.16盐酸,加入蒸馏水成1000ml)20ml偏重亚硫酸钠或钾1g碱性品红1g加入200ml蒸馏水,搅拌加热沸腾,待冷却至50℃过滤,加入当量盐酸至25℃时加入偏重亚硫酸钠。置于暗处,两天后溶液变桔黄色或草黄色,然后加入少量活性碳并震荡、过滤,此时溶液应为无色。保存冰箱备用。溶液如显浅红色或草黄色,染色效果较差主要用来显示糖原和其他多糖物质,因此也称作糖原染色。天津如何使用糖原染色试剂盒报价
糖原及粘液染色法注意事项:1、糖原的固定要及时,而且标本要新鲜。2、如用无水酒精作糖原的固定剂,有它的弊病,因无水酒精渗透较慢,而且容易产生极化,(极化是糖原颗粒趋向于细胞的一端)。故用Gendre氏固定液效果较佳,其配法如下:苦味酸饱和于95%酒精85ml40%甲醛10ml冰醋酸5ml3、各种试剂必须化学纯,亚硫酸钠须有浓厚气味,器皿必须洁净而干燥,染色缸亦是。4、如果Schiff氏试剂,在经过活性碳吸附漂白后不显无色,首先应考虑试剂中的偏重亚硫酸钠是否失效。如果偏重亚硫酸钠气味不浓,使用时可考虑适当的增加用量。其次考虑碱性品红本身,常常虽属同一生产厂家,但不同批号,其效果就可能不同,应特别引起注意浙江品质好的糖原染色试剂盒厂家供应糖原染色试剂盒的作用是什么?
糖元染色试剂盒细胞生物学研究有以下几个方面。细胞生物学的研究内容十分普遍,主要包括。①细胞核、染色体以及基因表达的研究。②生物膜与细胞器的研究。③细胞骨架体系的研究。④细胞增殖及其调控。⑤细胞分化及其调控。⑥细胞的衰老与编程性死亡(凋亡)⑦细胞的起源与进化。⑧细胞工程。PAS染色,全称过碘酸雪夫染色(PeriodicAcid-SchiffStain),主要用来显示糖原和其他多糖物质,因此也称作糖原染色。另外,此染色方法还可以显示中性黏液性物质和某些酸性物质,以及软骨、垂体、色素、淀粉样物质、基底膜、霉菌等。PAS法的检测原理在于:过碘酸(也成为高碘酸)是一种强氧化剂
糖原染色法:染色原理细胞胞浆中存在糖原或多糖类物质(如糖蛋白、粘多糖、糖脂、粘蛋白等),过碘酸能使细胞内的多糖乙二醇基氧化为二醛基,其与Schiff试剂中的无色品红结合后呈现紫红色,沉积在细胞内多糖所在之处。染色步骤:1.组织石蜡包埋切片后脱蜡至水,蒸馏水洗2min(细胞爬片4%多聚甲醛固定后水洗);2.滴加过碘酸溶液,氧化5min;3.蒸馏水洗10min;4.滴加Schiff试剂,侵染10-20min;5.倾去Schiff试剂,流水冲洗10min;6.滴加苏木素染色液,染核1-2min;7.流水冲洗5min;8.酸性乙醇分化液分化对盐基性染料有亲合力,因此在HE染色中、切片上的粘液呈污秽蓝色。
糖原染色:细胞内含1,2-乙二醇基的多糖类经过碘酸氧化后产生醛基,与特殊染液作用,使无色品红变成红色化合物,沉淀于胞质之中。红色的深浅与细胞中起反应的1,2-乙二醇基的量呈正比。用于不典型巨核细胞与李—斯细胞的鉴别,前者PAS反应为强阳性,后者为阴性或弱阳性;用于高雪细胞和尼曼一匹克细胞的鉴别,前者PAS反应为强阳性,而后者反应为阴性或弱性。正常值正常情况下,红细胞系统的原、幼红细胞和成熟红细胞;粒细胞系统的原粒细胞、原单核细胞和大多数淋巴细胞为阴性反应。自早幼粒阶段以后的粒细胞和幼单核细胞可呈弱阳性反应。冷冻切片染色时间尽量要短。福建如何使用糖原染色试剂盒服务电话
特殊染色方法及化学试剂的选择。天津如何使用糖原染色试剂盒报价
特殊染色方法选择应遵循:染色结果对比鲜明、结果易保存、阳性突出的染色方法;突出的阳性结果在于所选择方法表达的色调及如何进行背景的复染。结果能够长时间保存、不褪色对于后续的调阅、科研、论文均较为有利。如显示淀粉样物质,甲基紫染色法虽然流程较为简单,但结果不易保存,阳性对比度相对不突出;刚果红染色法阳性结果明显,长时间保存不褪色,流程简便,更是实用的方法。如显示弹性纤维,地衣红染色染液虽配制较方便,但结果对比度相对欠佳,与其他几个染色法相比,多不选择使用。天津如何使用糖原染色试剂盒报价