染色的一般原则:1.荧光素产品一般为微量试剂,取用前请离心集液,以及避光保存和使用。建议您在收到产品之后,分装为小份避光保存于-20℃,即用即取。2.式细胞仪只可检测单细胞悬液,如使用组织样本,首先必须制备成单细胞悬液,细胞数量不应低于1X106/ml。3.推荐使用悬浮培养细胞。如果是贴壁细胞,需用不含EDTA的胰酶消化,如消化不当,可能引起假阳性,而用细胞刮子会造成细胞粘连成团,而影响检测。可将胰酶消化后细胞的保存在含2%BSA的PBS中,防止进一步的损伤。冷冻切片染色时间尽量要短。江西糖原染色试剂盒生产厂家
糖原染色试剂盒。含乙二醇基的多糖经过碘酸氧化,产生醛基,与雪夫(Schiff)试剂中无色品红结合,形成紫红色沉淀物定位于含糖原的胞浆中。该反应称为碘酸-雪夫(PAS)反应。(1)雪夫液配制:碱性品红1g溶于200ml沸水中,冷却60℃时过滤,加1mmol/L盐酸20ml,再冷却至25℃左右,加偏重亚硫酸钠(Na2S2O5)2g,混合后放棕色瓶中,置暗处24h,无色即可放冰箱中保存,呈微红色,则加活性炭1~2g,吸附过滤使成无色液体,放冰箱中保存。若溶液变红,即不能再用。(2)10g/L过碘酸水溶液:过碘酸(HIO4·2H2O)1g,加蒸馏水至10ml。溶解后盖紧放冰箱备用,一般可用3个月,变黄则失效江西哪家生产糖原染色试剂盒服务电话应该尽可能割取生活着的组织块,并随即投入固定液。
糖原染色用于鉴别淋巴系统细胞增生的性质鉴别红细胞系统增生的性质[英文缩写]PAS[参考值]正常人淋巴细胞PAS反应积分正常人幼红细胞PAS反应积分[临床意义]恶性淋巴瘤、急慢性淋巴细胞白血病时PAS积分升高巨幼细胞性贫血、溶血性贫血、再障贫血时幼红细胞PAS反应多为阴性红血病、红白血病、骨髓增生异常综合征时幼红细胞PAS反应积分可40甚至高达100--200以上用于不典型巨核细胞与李-斯细胞的鉴别前者PAS反应为强阳性后者为阴性或弱阳性;用于高雪细胞和尼曼一匹克细胞的鉴别前者PAS反应为强阳性而后者反应为阴性或弱性。
糖原染色的参考值及临床意义:1.慢性淋巴细胞白血病、淋巴肉瘤等恶性淋巴细胞增生性疾病,其淋巴细胞的PSA染色积分值增高;等淋巴细胞良性增生时,淋巴细胞积分值正常。医|学教育网搜集整理故该试验可用于鉴别良性与恶性淋巴细胞增生性疾病。2.红白血病时幼红细胞的PAS染色呈强阳性反应,积分值增高;溶血性贫血及巨幼细胞性贫血时,幼红细胞的PAS染色积分值在正常范围内,故该试验也可用于红白血病的诊断及鉴别幼红细胞增多的性质。3.急性粒细胞白血病时,原始及幼稚粒细胞PAS染色常呈阴性反应;急性淋巴细胞白血病时,原始及幼稚淋巴细胞常呈阳性反应;急性单核细胞白血病时,原始及幼稚单核细胞多呈强阳性反应。故PAS染色有助于三种急性白血病类型的鉴别。细胞核、染色体以及基因表达的研究。
糖原染色在使用过程中需要注意以下几个方面:Schiff氏染液的配制是关键,尤其是偏重亚硫酸钠的质量,打开应是粉剂,且带有硫的气味,若成团或没有气味,则不能用,配制时使用的容器、药勺、称药天平与称药纸等必须洁净、无污染。新配制好的Schiff剂为无色透明液体[1],配好后可分成小份置于-20℃保存,用时取一份恢复到室温即可。沈洪武等通过对比染色发现,冷冻保存1年的Schiff液的染色结果与新鲜配制的染色结果一致[5]。0.5%~1%高碘酸(pH值在3.0~5.0之间),环境温度以不高于20℃为宜,室温高时氧化时间适当缩短;如果染色时环境温度较高且高碘酸作用时间长,可使某些物质成分发生非特异反应,使染色结果出现假阳性。因此,室温较高时可适当缩短反应时间。特殊染色方法及化学试剂的选择。安徽品质好的糖原染色试剂盒生产厂家
主要用来显示糖原和其他多糖物质,因此也称作糖原染色。江西糖原染色试剂盒生产厂家
染色的原理和临床意义:在同一张涂片上进行两种酯酶染色的方法称为酯酶双染色。多数采用一种特异性酯酶加一种非特异性酯酶染色,常用的有α-醋酸萘酚酯酶与氯乙酸AS-D萘酚酯酶双染色、α-丁酸萘酚酯酶与氯乙酸AS-D萘酚酯酶双染色等。反应的原理基本上同各自的染色原理,同一张涂片上的细胞要分别在两种不同的基质液中作用一定时间,较后复染、显微镜观察。酯酶双染色可同时观察两种不同的白血病细胞,因此在鉴别白血病类型方面明显优于单项染色。急性粒-单核细胞白血病该染色法在急性粒-单核细胞白血病的同一张涂片上可分别出现α-NBE染色和NAS-DCE染色阳性反应的细胞,甚至少数病例在单个细胞内同时出现以上两种酯酶染色的双重阳性反应,因此酯酶双染色反应在急性粒-单核细胞白血病的诊断上具有独特价值。江西糖原染色试剂盒生产厂家