北京永诺数字PCR解决方案

精细诊断是精细医学的关键环节，液体活检作为一种无创、均一的检测技术，迅速成为精细诊断领域的新星，2015年被《麻省理工大学科技评论》评选为年度**突破技术，2017年入选世界经济论坛评出的全球**新兴技术，引发了全球科研、临床和产业界的极大热情，已在**、产前诊断、***移植等疾病领域***被应用。数字PCR技术与高通量的二代测序技术，共同组成液体活检领域的两大利器；数字PCR技术是公认的液体活检领域灵敏度比较高的检测方法，采用有限稀释的方法将目标分子分割到**的反应体系中，在不依赖标准曲线条件下实现靶标***定量检测，能检测低至0.01%的突变基因；Bio-Rad及ThermoFisher目前是这一领域的主导者，分别采用微滴或芯片方式将样本分割成两万份，MiniDrop™创新性采用高压驱动的方法将样本分割成50万份，打破了国外厂商在微滴式数字PCR领域的垄断。单次微滴生成*需2分钟。北京永诺数字PCR解决方案

数字PCR采用的策略概括起来非常简单，就是“分而治之”（divideandconquer）［1］，这种做法非常类似于计算机科学中的“分治算法”，将一个标准PCR反应分配到大量微小的反应器中，在每个反应器中包含或不包含一个或多个拷贝的目标分子(DNA模板)，实现“单分子模板PCR扩增”，扩增结束后，通过阳性反应器的数目“数出”目标序列的拷贝数。在实际的数字PCR实验中，事实上是通过呈现两种信号类型的反应器比例和数目进行统计学分析，计算出原始样本中的模板拷贝数。北京永诺数字PCR解决方案分辨率——低至0.1倍基因表达差异。

数字PCR（DigtalPCR）是一种核酸定量精密检测的新兴技术手段，于20世纪由Vogelstein等提出。它是将稀释后的核酸模板分配到大量不同的反应单元中，使每个反应单元中有一个或没有核酸。利用PCR扩增的同时，加入可检测荧光。待扩增结束时，使用统计学方法采集每个反应单元出现的荧光次数，从而定量检测样本中的核酸浓度。基于分液方式的不同，数字PCR主要分为3种：微流体数字PCR(MicrofluidicdigitalPCR，mdPCR)、微滴数字PCR(DropletdigitalPCR，ddPCR)和芯片数字PCR(ChipdigitalPCR，cdPCR)。

MicroDrop-100微滴式数字PCR是具有国内自主知识产权的第三代JUE对定量PCR系统，整套系统由MicroDrop-100A微滴生成仪、MicroDrop-100B微滴检测仪以及结果数据分析设备等构成。系统通过自主设计的微流控芯片，利用油水相不兼容的原理，在2分钟时间内将PCR体系分割成100,000油包水的体系，每个体系为的PCR反应体系，体积约为0.2nL，单次实验一次可生成8个样本的油包水体系 。由于油包水体系的分割效应，使得数字PCR受PCRYi制物的影响相对较小，有利于复杂环境样本的实验操作。区别于荧光定量PCR的过程性判读方法，数字PCR结果判读为终点法，故其对PCR扩增效率的依赖也相对较小。液体活检：早筛、用药、监测、复发。

相对于二代测序、基因芯片和定量PCR而言，数字PCR具备以下优势:●灵敏度可达到单个核酸分子：检测限低至0.001%，主要系为数字PCR可以实现靶标DNA/RNA的生物浓缩；●无需标准曲线活参照基因进行对比来测定核算量，可对靶分子起始量进行***定量，直接独处DNA分子 的个数；●适合环境复杂样品的检测：终点PCR检测，不依赖Ct值，不依赖扩增效率，能克服PCR 剂的影响，避免样品间的交叉 问题，适合各类复杂环境中的样本进行 定量，如动血样、粪便、尿液、痰液、水样、土壤、植物等；线性范围达到6个数量级，灵敏度高达万分之一。深圳MicroDrop-100数字PCR销售电话

高灵敏度——数字PCR的灵敏度与同体积反应体系的分割份数成正比。北京永诺数字PCR解决方案

数字PCR为juedui定量，qPCR为相对定量，数字PCR较qPCR更精细、更灵敏。所以说，未来数字PCR将成为qPCR的重要补充，在部分领域逐步替代荧光定量PCR。未 来这些领域将广泛应用到数字PCR：科研：高校（生命科学学院、环境学院、医学院、药学院）等。医院：病理科、血液科、妇产科、心血管科、检验科、转化医学中心：研究院单位、疾控中心、海关（出入境检验检疫）、质监局、环境/环保局等。企业：第三方检测机构、IVD(分子体外诊断试剂)、生物制药等。北京永诺数字PCR解决方案

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