多克隆抗体免疫动物:免疫用的动物建议选择适龄的健康雄性动物,雌性动物特别是妊娠动物用于制备免疫抗体则非常不合适,有时甚至不产生抗体。由于对免疫应答的个别差异,免疫时应同时选用数只动物进行免疫。 抗原是多种多样的,而且千差万别。就其化学成分而言,有蛋白质抗原、类脂抗原、多糖类抗原和核酸抗原等。就抗原性而言,有完全抗原和不完全抗原。为了获得较好的抗血清,建议是选用蛋白质抗原,如要制备用于筛选细菌表达的 cDNA 文库或免疫印迹的抗血清,建议选用可降解的蛋白质抗原。不同的抗原,其免疫原性的强弱均不相同,这种免疫原性的强弱取决于抗原的分子量、化学活性基团、立体结构、物理形状和弥散速度等。抗体工程可以通过改变抗体的结构和特性来提高其疗效和稳定性。广州专业抗体哪家好
抗体(antibody)是指机体由于抗原的刺激而产生的具有保护作用的蛋白质。它(免疫球蛋白不只是抗体)是一种由浆细胞(效应B细胞)分泌,被免疫系统用来鉴别与中和外来物质如细菌、病毒等的大型Y形蛋白质,只被发现存在于脊椎动物的血液等体液中,及其B细胞的细胞膜表面。抗体能识别特定外来物的一个独特特征,该外来目标被称为抗原。抗体是一类能与抗原特异性结合的免疫球蛋白。抗体按其反应形式分为凝集素、沉降素、抗毒、溶解素、调理素、中和抗体、补体结合抗体等。北京PRR11多克隆抗体抗体的结构多样性使得它们能够识别和结合各种形状和性质的分子。
抗体主要功能:中和有害素和阻止病原体入侵。识别并特异性结合抗原是抗体的主要功能,执行该功能的结构是抗体的V区,其中CDR部位在识别和结合特异性抗原中起决定性作用。抗体有单体、二聚体和五聚体,因此结合抗原表位的数目也不相同。抗体结合抗原表位的个数称为抗原结合价。Ig单体可结合2个抗原表位,为双价。SIgA是二聚体,可结合4个抗原表位,为4价。IgM是五聚体,理论上可以结合10个抗原,应该是10价,但由于立体构象的空间位阻,使IgM一般只能结合5个抗原表位,故为5价。
抗原上那部分可以引起机体产生抗体的分子结构,叫做抗原决定簇。一个抗原上可以有好几个不同的抗原决定簇,因而使机体产生好几种不同的抗体,然后产生出抗体是浆细胞。只针对一个抗原决定簇起作用的浆细胞群就是一个纯系,纯系的英文为Clone,音译就是克隆。由一种克隆产生的特异性抗体叫做单克隆抗体。单克隆抗体能目标明确地与单一的特异抗原决定簇结合,就象导弹精确地命中目标一样。另一方面,即使是同一种抗原决定簇,在机体内也可以由好几种克隆来产生抗体,形成好几种单克隆抗体混杂物,称为多克隆抗体。抗体也可以通过血液透析、免疫球蛋白输注等方式进行passively transfer。
多克隆抗体佐剂应用:1.佐剂的类型 实践中常应用的佐剂有氢氧化铝胶、明矾、弗氏佐剂、脂质体和石蜡油等。也有采用结合杆菌等分枝杆菌、白喉杆菌以及细小棒状杆菌等。⑴ 弗氏不完全佐剂(incomplete Freund's adjuvant,IFA)羊毛脂 1 份;石蜡油 5 份;混合,高压灭菌后保存。用时加热融化,冷却至 50℃左右,加抗原进行乳化处理。⑵ 弗氏完全佐剂(complete Freund's adjuvant,CFA);弗氏不完全佐剂 10ml;卡介苗 10mg~200mg 卡介苗可 100℃10min 灭活处理。初次免疫时,建议用弗氏完全佐剂,以刺激机体产生较强的免疫反应。再次免疫时,一般不用完全佐剂,而采用弗氏不完全佐剂。但在研究分枝杆菌及相关抗原时,一般不用弗氏完全佐剂,以免卡介苗的干扰。抗体可以通过中和病原体、启动免疫细胞和调节免疫反应等方式发挥作用。杭州IgM抗体研发制造
抗体疗法是一种利用人工合成的抗体来调理疾病的新兴疗法。广州专业抗体哪家好
抗体特性和功能:IgG于出生后3个月开始合成,3~5岁接近成人水平。IgG是血清和体液中含量很高的抗体,占血清总Ig的75%~80%。人lgG有4个亚类,根据其在血清中浓度的高低排序,分别为IgG1、IgG2、IgG3、IgG4。IgG的半衰期为20~23天,是再次免疫应答产生的主要抗体,其亲和力高,在体内分布普遍,具有重要的免疫效应,是机体抗传染的“主力军”。IgG1、IgG2和IgG3可以穿过胎盘屏障,在新生儿抗传染免疫中起重要作用。IgG1、lgG2和IgG3能通过经典途径活化补体,并可与巨噬细胞、NK细胞表面Fc受体结合,发挥调理作用、ADCC作用等;人IgGl、IgG2和IgG4可通过其Fc段与葡萄球菌蛋白A(SPA)结合,借此可纯化抗体,并用于免疫诊断。某些自身抗体如抗甲状腺球蛋白抗体、抗核抗体,以及引起Ⅱ、Ⅲ型超敏反应的抗体也属于IgG。广州专业抗体哪家好