多克隆抗体免疫动物:抗原的免疫剂量是依照给予动物的种类、免疫周期以及所要求的抗体特性等不同而不同。剂量过低,不能引起足够强的免疫刺激,免疫剂量过多,有可能引起免疫耐受。在一定的范围内,抗体的效价是随注射剂量的增加而增高。蛋白质抗原的免疫剂量比多糖类抗原宽。一般而言,小鼠的初次免疫剂量为 50μg~400μg/次, 大鼠为100μg~1 000μg/次, 兔为 200μg~1 000μg/2次。加强剂量为初次剂量的 1/5~2/5。免疫剂量与注射途径有关,一般而言,静脉注射剂量大于皮下注射,而皮下注射又比掌内和跖内皮下注射剂量大,也可采用淋巴结内注射法。抗体调理在自身免疫性疾病等领域显示出了巨大的潜力。杭州多克隆抗体供应商
多克隆抗体可以采用以下各种方法之一进行免疫。皮下多点注射法:①家兔两侧掌(跖内各注射含有完全佐剂抗原 0.10ml(IgG 含量5mg/ml) ;②7~10 天后,脊柱两侧多点(颈、胸、腰椎各两点、共 6 点)皮下注射含不完全佐剂5的抗原,每点 0.50ml;③7~10 天后,脊柱两侧重复注射一次;④7~10 天后试血。不合格者重复步骤③。多途径联合注射法:①两侧掌(跖)内侧皮下注射含完全佐剂抗原 0.50ml(IgG 量为 5mg/ml) ;②14 天后,多点皮下注射含有不完全佐剂抗原;③7 天后,耳静脉注射不含佐剂的抗原 2ml;④测定血清抗体效价,不合格者重复步骤③,并适当递增 IgG 量。浙江IgE抗体供应商抗体的亲和力决定了其与抗原结合的强度,高亲和力的抗体能更有效地中和病原体。
抗体的多样性:人血清中的抗体多种多样,B淋巴细胞可产生的抗体种类在108以上,可与众多不同抗原发生特异性结合。每种基因片段是以多拷贝的形式存在,其中编码重链V区的VH、DH和JH的基因片段数分别为50、23和6个;编码K轻链V区的Vx和JK基因片段数分别为60和5个,编码入轻链V区的VX和J入基因片段数分别为30和7个。这些基因在胚系阶段以分隔的形式存在。在B细胞的分化发育过程中,这些基因片段发生重排和组合,从而产生数量巨大、能识别特异性抗原的BCR。每种具有特异性BCR的B细胞克隆可识别相应的抗原,产生一种特异性抗体。Ig基因重组是B细胞合成无数特异性抗体的主要原因。
多克隆抗体特异性鉴定:抗体的亲和力 是指抗体和抗原结合的牢固程度。亲和力的高低是由抗原分子的大小、抗体分子的结合位点与抗原决定簇之间立体构型的合适度决定的。有助于维持抗原抗体复合物稳定的分子间力有氢键、疏水键、侧链相反电荷基因的库仑力、范德华力和空间斥力。亲和力常以亲和常数K表示,K的单位是L/mol,通常K的范围在 108 ~1010 /mol,也有多达 1014 /mol。抗体亲和力的测定对抗体的筛选,确定抗体的用途,验证抗体的均一性等均有重要意义。抗体能识别特定外来物的一个独特特征,该外来目标被称为抗原。
抗体主要功能:中和有害素和阻止病原体入侵。识别并特异性结合抗原是抗体的主要功能,执行该功能的结构是抗体的V区,其中CDR部位在识别和结合特异性抗原中起决定性作用。抗体有单体、二聚体和五聚体,因此结合抗原表位的数目也不相同。抗体结合抗原表位的个数称为抗原结合价。Ig单体可结合2个抗原表位,为双价。SIgA是二聚体,可结合4个抗原表位,为4价。IgM是五聚体,理论上可以结合10个抗原,应该是10价,但由于立体构象的空间位阻,使IgM一般只能结合5个抗原表位,故为5价。多克隆抗体是由多个不同的B细胞产生的抗体,具有普遍的特异性。四川单克隆抗体怎么购买
抗体在疫苗接种后的产生是一种主动免疫应答,提供长期的保护作用。杭州多克隆抗体供应商
单克隆抗体技术在临床应用中为疾病的诊断、调理提供了新手段,作为调理用药物,单克隆抗体主要应用于瘤细胞、自身免疫疾病、部位移植排斥及病毒传染等领域。单克隆抗体也可用于瘤细胞的导向调理,将针对某一瘤细胞抗原的单克隆抗体与化疗或放疗药物连接,利用单克隆抗体的专一性识别结合特点,将药物携带至靶细胞并直接将其杀伤。由于单克隆抗体具有特异性强、纯度高、均一性好等优点,极大促进了单克隆抗体检测试剂盒的发展,在病原微生物、瘤细胞、免疫细胞及细胞因子的检测诊断中广泛应用。若将放射性标记物与单克隆抗体连接,注入患者体内后可进行放射免疫显像,协助瘤细胞的诊断。杭州多克隆抗体供应商
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