人血清中的抗体多种多样,B淋巴细胞可产生的抗体种类在108以上,可与众多不同抗原发生特异性结合。抗体多样性的原因主要有两方面:1.外源性因素环境中抗原种类甚多,每种大分子抗原又有多种抗原表位,每种抗原表位均可选择启动体内一个B细胞克隆,产生一种特异性抗体。2.内源性因素抗体多样性的另一个原因是由基因的结构及功能特征所决定的。编码人Ig重链及κ、λ型轻链的基因分别位于第14、2、22号染色体上。其中编码Ig重链的基因包括编码可变区的V、D、J及编码恒定区的C基因;编码Ig轻链的基因包括编码可变区的V、J及编码恒定区的C基因。多克隆抗体可以通过亲和层析或凝集素亲和纯化方法进行纯化,以获得较高纯度的抗体。广州免疫抗体
抗体的分类:1、免疫球蛋白可分为两种类型:(1)分泌性免疫球蛋白:存在于血清、体液以及分泌液中,具有抗体的各种功能。(2)膜型免疫球蛋白:位于B淋巴细胞的表面,即膜表面免疫球蛋白(mIg),是B淋巴细胞的抗原识别受体(BCR)。2、根据所对应的抗原分:3、根据有无抗原刺激分:4、根据与抗原反应的性质分:5、根据抗原性分:免疫球蛋白的理化性质;免疫球蛋白是多链糖蛋白,具有蛋白质的通性,对物理及化学因素敏感,不耐热,在60~70℃时即被破坏,能被多种蛋白水解酶裂解破坏,可在乙醇、三氯醋酸或中性盐类中沉淀。因此,通常用50%饱和硫酸铵或硫酸钠从免疫血清中提取抗体。广州PRR11多克隆抗体公司排行单克隆抗体可以用于诊断和调理多种疾病。
抗体的多样性:每种基因片段是以多拷贝的形式存在,其中编码重链V区的VH、DH和JH的基因片段数分别为50、23和6个;编码K轻链V区的Vx和JK基因片段数分别为60和5个,编码入轻链V区的VX和J入基因片段数分别为30和7个。这些基因在胚系阶段以分隔的形式存在。在B细胞的分化发育过程中,这些基因片段发生重排和组合,从而产生数量巨大、能识别特异性抗原的BCR。每种具有特异性BCR的B细胞克隆可识别相应的抗原,产生一种特异性抗体。Ig基因重组是B细胞合成无数特异性抗体的主要原因。
选择性培养的目的是筛选融合的杂交瘤细胞,一般采用HAT选择性培养基。在HAT培养基中,未融合的小鼠骨髓瘤细胞中DNA的从头合成途径会被阻止;未融合的骨髓瘤细胞又因缺乏次黄嘌呤-鸟嘌呤-磷酸核糖转移酶(HGPRT),不能利用补救途径合成DNA;这样未融合小鼠骨髓瘤细胞的两个DNA合成途径都被阻止,骨髓瘤细胞DNA不能复制而死亡。 未融合的B淋巴细胞虽具有次黄嘌呤-鸟嘌呤-磷酸核糖转移酶,但其本身不能在体外长期存活也逐渐死亡。 只有融合的杂交瘤细胞由于从B淋巴细胞获得了次黄嘌呤-鸟嘌呤-磷酸核糖转移酶,可以通过补救途径合成DNA,并具有骨髓瘤细胞能无限增殖的特性,因此,杂交瘤细胞能在HAT培养基中存活和增殖。多克隆抗体具有较高的多样性,可以覆盖更普遍的抗原特异性。
IgE抗体是人体内非常重要的一类免疫球蛋白,在正常情况下,其含量是所有免疫球蛋白中很低的一种。但在病理情况下,如过敏性疾病,或寄生虫传染时,IgE水平可明显升高。在过敏性疾病时,IgE可与致敏原结合,进而再与肥大细胞,或嗜碱性粒细胞表面相应的受体结合,即可引起上述细胞脱颗粒,释放白三烯和组胺类的物质,从而引起临床上过敏反应。在寄生虫传染时,IgE可与抗原结合,进而再与嗜酸性粒细胞表面相应的受体结合。嗜酸性粒细胞活化后,通过ADCC的作用,可对寄生虫进行吞噬。除外,还有病理情况,如浆细胞瘤,即血液科较常见的多发性骨髓瘤,可出现IgE水平的升高,这时应完善血尿、免疫固定电泳,判断患者是否存在单克隆增生的免疫球蛋白,除外患者是否有血液系统的疾病。多克隆抗体的制备过程通常包括免疫小鼠、收集细胞、混合细胞液以及纯化抗体等步骤。江苏同种抗体补给公司
单克隆抗体的制备要求高精度的实验操作。广州免疫抗体
抗体特性和功能:IgM占血清Ig总量的5%~10%,血清浓度约为1mg/ml。单体IgM以膜结合型表达于B细胞表面,构成B细胞抗原受体,只表达mlgM是未成熟B细胞的标志。分泌型IgM为五聚体,是分子量很大的Ig,沉降系数为19S,称为巨球蛋白(macroglobulin),一般不能通过血管壁,主要存在于血液中。五聚体IgM含有10个Fab段,具有很强的抗原结合能力;含有5个Fc段,比IgG更易启动补体。天然血型抗体为IgM,血型不匹配的输血,可导致严重的溶血反应。IgM是个体发育过程中很早合成和分泌的抗体,在胚胎发育晚期的胎儿即能产生IgM,故脐带血lgM升高提示胎儿有宫内传染(如风疹病毒或巨细胞病毒等传染)。IgM也是初次体液免疫应答中很早出现的抗体,是机体抗传染免疫的“先头”;血清中IgM升高,提示新近发生传染,可用于传染的早期诊断;广州免疫抗体