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来源: 发布时间:2024年04月08日

单克隆抗体:通过该技术融合形成的杂交瘤(hybridoma),既具有骨髓瘤细胞大量扩增和永生的特性,又具有免疫B细胞合成和分泌特异性抗体的能力。每个杂交瘤细胞由一个B细胞融合而成,而每个B细胞克隆只识别一种抗原表位,因此经筛选和克隆化的杂交瘤细胞只能合成和分泌识别单一抗原表位的特异性抗体,称为单克隆抗体。其优点是结构均一、纯度高、特异性强、效价高、血清交叉反应少、制备成本低;缺点是鼠源性mAb对人具有较强的免疫原性,反复免疫人体后可诱导产生人抗鼠抗体,从而削弱了其作用,甚至导致机体组织细胞的免疫病理损伤,因此需要进一步通过抗体工程技术制备人一鼠嵌合抗体、人源化抗体或人源抗体。单克隆抗体的制备方法包括杂交瘤技术和免疫原法。合肥Prestige抗体费用

抗体规律:凡能产生抗体的高等动物(包括人类),当注入胸腺依赖性抗原(TD抗原)进行免疫时都有着相同产生抗体的规律,即存在初次免疫应答(primary immune response)和再次免疫应答(secondary immune response)。初次免疫应答是指机体初次接触某种抗原物质引起特异性抗体产生的过程。其特点是潜伏期长(一周以上),产生的抗体滴度(效价)低、维持的时间短,产生的抗体以IgM为主;再次免疫应答是指机体以后再次接触同样的抗原后所产生的抗体应答过程。其特点是产生抗体的潜伏期短、抗体滴度高,维持的时问长,产生的抗体以IgG为主。非胸腺依赖性抗原(TI抗原)引起的体液免疫由于不产生记忆细胞,因此只有初次免疫应答,没有再次免疫应答。合肥Prestige抗体费用单克隆抗体的生产过程需要大量的细胞培养和纯化步骤。

抗体的功能与其结构密切相关。同一抗体的V区和C区的氨基酸组成和顺序的不同,决定了其功能上的差异。不同抗体的V区和C区在结构变化上具有一定的规律,又使得其在功能上存在共性。V区和C区的组成和结构,决定了抗体的生物学功能。识别并特异性结合抗原是抗体的主要功能,执行该功能的结构是抗体的V区,其中CDR部位在识别和结合特异性抗原中起决定性作用。抗体有单体、二聚体和五聚体,因此结合抗原表位的数目也不相同。抗体结合抗原表位的个数称为抗原结合价。

抗体重链和轻链:轻链分子量约为25 000,由214个氨基酸残基构成。轻链可分为两种,分别为kappa(κ)链和lambda(λ)链。据此,可将Ig分为两型(type),即κ型和λ型。一个Ig分子上两条轻链的型别总是相同的。不同类Ig既存在κ型,也存在λ型。同一个体内可同时存在κ型和λ型的Ig分子,不同种属生物体内两型轻链的比例不同。正常人血清Ig的κ:λ约为2:1,而在小鼠则为20:1。Ig的κ与λ的比例异常可以反映免疫系统的异常。根据λ链恒定区个别氨基酸的差异,又可将λ链分为λ1、λ2、λ3和λ4四个亚型(subtype)。多克隆抗体的希望主要集中于富集特定细胞亚群,开发更多临床应用。

1975年分子生物学家G.J.F.克勒和C.米尔斯坦在自然杂交技术的基础上,创建了杂交瘤技术,他们把可在体外培养和大量增殖的小鼠骨髓瘤细胞与经抗原免疫后的纯系小鼠B细胞融合,成为杂交细胞系,既具有瘤细胞易于在体外无限增殖的特性,又具有抗体形成细胞的合成和分泌特异性抗体的特点。将这种杂交瘤作单个细胞培养,可形成单细胞系,即单克隆。利用培养或小鼠腹腔接种的方法,便能得到大量的、高浓度的、非常均一的抗体,其结构、氨基酸顺序、特异性等都是一致的,而且在培养过程中,只要没有变异,不同时间所分泌的抗体都能保持同样的结构与机能。这种单克隆抗体是用其他方法所不能得到的。单克隆抗体在恶性症调理中具有潜在的应用价值。新基因PRR11抗体补给公司

单克隆抗体可以用于筛选药物候选物。合肥Prestige抗体费用

单克隆抗体:解决多克隆抗体特异性不高的理想方法是制备识别单一表位特异性的抗体。如果能获得只针对单一表位的浆细胞克隆,并使其在体外扩增分泌抗体,就有可能获得单一表位特异性的抗体。然而,浆细胞在体外的寿命较短,难以培养。为克服这一缺点,Kohler和Milstein将可产生特异性抗体但短寿的B细胞与不产生抗体但长寿的骨髓瘤细胞融合,获得了可以产生单克隆抗体的杂交瘤细胞,从而建立了单克隆抗体制备技术。通过该技术融合形成的杂交瘤(hybridoma),既具有骨髓瘤细胞大量扩增和永生的特性,又具有免疫B细胞合成和分泌特异性抗体的能力。合肥Prestige抗体费用

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