抗体可变区和恒定区:通过分析不同Ig重链和轻链的氨基酸序列发现,重链和轻链靠近N端的约110个氨基酸序列变化很大,其他部分氨基酸序列相对恒定。因此,将Ig轻链和重链中靠近N端氨基酸序列变化较大的区域称为可变区(variable region,V),分别占重链和轻链的1/4和1/2;将靠近C端的氨基酸序列相对稳定的区域,称为恒定区(constant region,C),分别占重链和轻链的3/4和1/2。恒定区 重链和轻链的C区分别称为CH和CL。不同型(κ或λ)Ig的CL长度基本一致,但是不同类Ig的CH长度不同,例如IgG、IgA和IgD包括CH1、CH2和CH3,而IgM和IgE则包括CH1、CH2、CH3和CH4;多克隆抗体的结合位点通常存在多种结合位点,可以有不同的结合特异性。苏州异嗜性抗体生产厂家
抗体结构域:轻链有VL和CL两个结构域;IgG、IgA和IgD的重链有VH、CH1、CH2和CH3四个结构域;IgM和IgE的重链有五个结构域,即多一个CH4结构域。每个结构域由约110个氨基酸组成,氨基酸序列具有相似性,其二级结构是由几条多肽链折叠形成的两个反向平行的β片层(anti-parallel β sheet)构成的,两个β片层中心的两个半胱氨酸残基由一个链内二硫键垂直连接,形成一个“β桶状(βbarrel)”或“β-三明治 (β sandwich)”结构,这种折式称为免疫球蛋白折叠(immunoglobulin folding)。许多膜型和分泌型的蛋白质分子也含有这类独特折叠的二级结构,因此,这类分子被统称为免疫球蛋白超家族(immunoglobulinsuperfamily,IgSF)。杭州IgM抗体供应商多克隆抗体适用于各种实验和临床应用,如免疫染色、免疫印迹、流式细胞术等。
单克隆抗体:通过该技术融合形成的杂交瘤(hybridoma),既具有骨髓瘤细胞大量扩增和永生的特性,又具有免疫B细胞合成和分泌特异性抗体的能力。每个杂交瘤细胞由一个B细胞融合而成,而每个B细胞克隆只识别一种抗原表位,因此经筛选和克隆化的杂交瘤细胞只能合成和分泌识别单一抗原表位的特异性抗体,称为单克隆抗体。其优点是结构均一、纯度高、特异性强、效价高、血清交叉反应少、制备成本低;缺点是鼠源性mAb对人具有较强的免疫原性,反复免疫人体后可诱导产生人抗鼠抗体,从而削弱了其作用,甚至导致机体组织细胞的免疫病理损伤,因此需要进一步通过抗体工程技术制备人一鼠嵌合抗体、人源化抗体或人源抗体。
人血清中的抗体多种多样,B淋巴细胞可产生的抗体种类在108以上,可与众多不同抗原发生特异性结合。抗体多样性的原因主要有两方面:1.外源性因素环境中抗原种类甚多,每种大分子抗原又有多种抗原表位,每种抗原表位均可选择启动体内一个B细胞克隆,产生一种特异性抗体。2.内源性因素抗体多样性的另一个原因是由基因的结构及功能特征所决定的。编码人Ig重链及κ、λ型轻链的基因分别位于第14、2、22号染色体上。其中编码Ig重链的基因包括编码可变区的V、D、J及编码恒定区的C基因;编码Ig轻链的基因包括编码可变区的V、J及编码恒定区的C基因。多克隆抗体可以用于动物模型的研究,以探索抗原的功能和影响。
IgE抗体是人体内非常重要的一类免疫球蛋白,在正常情况下,其含量是所有免疫球蛋白中很低的一种。但在病理情况下,如过敏性疾病,或寄生虫传染时,IgE水平可明显升高。在过敏性疾病时,IgE可与致敏原结合,进而再与肥大细胞,或嗜碱性粒细胞表面相应的受体结合,即可引起上述细胞脱颗粒,释放白三烯和组胺类的物质,从而引起临床上过敏反应。在寄生虫传染时,IgE可与抗原结合,进而再与嗜酸性粒细胞表面相应的受体结合。嗜酸性粒细胞活化后,通过ADCC的作用,可对寄生虫进行吞噬。除外,还有病理情况,如浆细胞瘤,即血液科较常见的多发性骨髓瘤,可出现IgE水平的升高,这时应完善血尿、免疫固定电泳,判断患者是否存在单克隆增生的免疫球蛋白,除外患者是否有血液系统的疾病。多克隆抗体是一种通过小鼠或其他动物产生的抗体,可以与多个不同的抗原结合。山东富含脯氨酸11抗体研发制造
多克隆抗体的制备过程需要严格的动物伦理管理,确保动物的福利。苏州异嗜性抗体生产厂家
单克隆抗体的大量制备主要采用动物体内诱生法和体外培养法。(1)体内诱生法取BALB/c小鼠,首先腹腔注射0.5ml液体石蜡或降植烷进行预处理。1-2周后,腹腔内接种杂交瘤细胞。杂交瘤细胞在小鼠腹腔内增殖,并产生和分泌单克隆抗体。约1-2周,可见小鼠腹部膨大。用注射器抽取腹水,即可获得大量单克隆抗体。(2)体外培养法将杂交瘤细胞置于培养瓶中进行培养。在培养过程中,杂交瘤细胞产生并分泌单克隆抗体,收集培养上清液,离心去除细胞及其碎片,即可获得所需要的单克隆抗体。但这种方法产生的抗体量有限。各种新型培养技术和装置不断出现,极大提高了抗体的生产量。苏州异嗜性抗体生产厂家