抗体可变区和恒定区:通过分析不同Ig重链和轻链的氨基酸序列发现,重链和轻链靠近N端的约110个氨基酸序列变化很大,其他部分氨基酸序列相对恒定。因此,将Ig轻链和重链中靠近N端氨基酸序列变化较大的区域称为可变区(variable region,V),分别占重链和轻链的1/4和1/2;将靠近C端的氨基酸序列相对稳定的区域,称为恒定区(constant region,C),分别占重链和轻链的3/4和1/2。恒定区 重链和轻链的C区分别称为CH和CL。不同型(κ或λ)Ig的CL长度基本一致,但是不同类Ig的CH长度不同,例如IgG、IgA和IgD包括CH1、CH2和CH3,而IgM和IgE则包括CH1、CH2、CH3和CH4;单克隆抗体可以用于免疫疗法,增强机体的免疫系统。上海Prestige抗体基因
1975年分子生物学家G.J.F.克勒和C.米尔斯坦在自然杂交技术的基础上,创建了杂交瘤技术,他们把可在体外培养和大量增殖的小鼠骨髓瘤细胞与经抗原免疫后的纯系小鼠B细胞融合,成为杂交细胞系,既具有瘤细胞易于在体外无限增殖的特性,又具有抗体形成细胞的合成和分泌特异性抗体的特点。将这种杂交瘤作单个细胞培养,可形成单细胞系,即单克隆。利用培养或小鼠腹腔接种的方法,便能得到大量的、高浓度的、非常均一的抗体,其结构、氨基酸顺序、特异性等都是一致的,而且在培养过程中,只要没有变异,不同时间所分泌的抗体都能保持同样的结构与机能。这种单克隆抗体是用其他方法所不能得到的。上海Prestige抗体基因多克隆抗体可以用于调理某些疾病,如自身免疫性疾病等。
抗体J链和分泌片:Ig轻链和重链除上述基本结构外,某些类别的Ig还含有其他辅助成分,如J链和分泌片。J链(joining chain)是一条富含半胱氨酸的多肽链,由浆细胞合成,其主要功能是将多个Ig单体连接为多聚体。2个IgA单体由J链相互连接形成二聚体,5个IgM单体由二硫键相互连接,并通过二硫键与J链连接形成五聚体。IgG、IgD和IgE常为单体,无J链。分泌片(secretory piece,SP)又称为分泌成分(secretory component,SC),是分泌型IgA分子上的一个辅助成分,为一种含糖的肽链,由黏膜上皮细胞合成和分泌,以非共价形式结合于IgA二聚体上,使其成为分泌型IgA(SIgA),并一起被分泌到黏膜表面。分泌片能保护SIgA的铰链区不被蛋白水解酶降解。
抗体IgG可通过其Fc段与表面具有相应受体的细胞结合,产生不同的生物学作用。调理作用(opsonization)指IgG抗体(特别是IgG1和IgG3)的Fc段与中性粒细胞、巨噬细胞表面相应的Fc受体结合,从而增强吞噬细胞的吞噬作用。例如,细菌特异性的IgG抗体可通过其Fab段与相应的细菌抗原结合后,以其Fc段与巨噬细胞或中性粒细胞表面相应的Fc受体结合,通过IgG的Fab段和Fc段的“桥联”作用,促进吞噬细胞对细菌的吞噬。抗体依赖的细胞介导的细胞毒作用(antibody-dependent cell-mediated cytotoxicity,ADCC)指具E有杀伤活性的细胞(如NK细胞)通过其表面的Fc受体识别包被于靶细胞表面抗原(如病毒感染细胞或肿瘤细胞)上的抗体的Fc段,直接杀伤靶细胞。NK细胞是介导ADCC的主要细胞。抗体与靶细胞上的抗原结合是特异性的,而表达Fc受体细胞的杀伤作用是非特异性的 。多克隆抗体的制备过程相对复杂,需要较长时间和资源。
IgE是什么?与过敏有什么关系?过敏,全球第六大慢性疾病,全世界有30%至40%的普通人被过敏问题困扰,约有2.5亿人食物过敏,3.58亿人喘症,4亿人患有过敏性鼻炎。世界卫生组织早已把过敏性疾病列为21世纪重点研究和防治的疾病之一。过敏群体暴增,患病人群数以亿计。这其中包括我国同样正在经历过敏性疾病患病人群从稀少到众多的发展,严重影响患者的生活质量,为社会带来沉重的经济负担,随着环境和生活方式的改变,不少人群面临着过敏性疾病的重大冲击。近几年来,IgE一词逐渐进入我们的视野,也给不少人带来一定的困扰。IgE与过敏性疾病到底有什么关系,IgE升高有没有必要引起重视。多克隆抗体的制备过程通常包括免疫小鼠、收集细胞、混合细胞液以及纯化抗体等步骤。安徽专业抗体报价
多克隆抗体可以通过融合细胞和单克隆化技术转变为单克隆抗体。上海Prestige抗体基因
单克隆抗体:解决多克隆抗体特异性不高的理想方法是制备识别单一表位特异性的抗体。如果能获得只针对单一表位的浆细胞克隆,并使其在体外扩增分泌抗体,就有可能获得单一表位特异性的抗体。然而,浆细胞在体外的寿命较短,难以培养。为克服这一缺点,Kohler和Milstein将可产生特异性抗体但短寿的B细胞与不产生抗体但长寿的骨髓瘤细胞融合,获得了可以产生单克隆抗体的杂交瘤细胞,从而建立了单克隆抗体制备技术。通过该技术融合形成的杂交瘤(hybridoma),既具有骨髓瘤细胞大量扩增和永生的特性,又具有免疫B细胞合成和分泌特异性抗体的能力。上海Prestige抗体基因