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来源: 发布时间:2022年06月30日

Luminex液相悬浮芯片是基于高通量微孔板的多重检测抗体芯片技术。其基本原理是将高度特异的捕获单克隆抗体偶联到不同荧光标记的磁珠上,将不同种类磁珠混合后悬浮于96孔微孔板中。在检测时,一束激光照射磁珠上的荧光,识别磁珠标记的捕获抗体,从而获知该磁珠可检测哪种细胞因子,从而实现“定性”作用。进一步,通过加入生物素标记的高亲和配对检测抗体,同步识别磁珠抓取的目标细胞因子,形成“三明治”结构,并加入SA-PE偶联上生物素,通过另一束激光照射进行信号放大检测,实现“定量”作用。LabEx提供抗体蛋白质芯片,sengenics服务!GRO

LUMINEX常见问题及解答(二)6)客户自己提供抗体,是否可以进行LUMINEX检测?Luminex和ELISA检测试剂都需要两个配套的特异性抗体。我们公司具有开发Luminex试剂盒的经验。但是,需要一系列的开发工作才能保证结果的特异性、重复性和可靠性。7)除了蛋白,LUMINEX技术是否还可以用于其它指标的检测?可以用于基因表达,基因多态性和HLA配型分析。8)如何判定LUMINEX数据表达水平差异有无意义?表达差异主要取决于标本的性质和数量,我们公司为客户提供专业的数据统计服务。9)LUMINEX实验和流式细胞仪的优劣比较?Luminex技术是流式细胞仪和微球相结合的蛋白、核酸检测技术,检测对象是蛋白质、DNA等大分子。普通流式细胞仪主要用于检测整体细胞表面或细胞内的蛋白表达情况。Luminex检测蛋白和标本数目大,是一种高通量检测技术。普通流式细胞仪每次只能检测几种蛋白分子,而且检测速度较慢,不适合高通量分析。由此可见,两种方法应用方向有很大差别。GROLabEx多因子检测:luminex平台**pannel,筛选验证同步进行,省时省力。

多重荧光免疫组化,主要的技术原理来自TSA技术,TSA即酪酰胺信号放大技术(Tyramidesignalamplification),是一类利用辣根过氧化酶(HRP)对靶蛋白或核酸进行高密度原位标记的酶学检测方法。该技术可与高性能染料AlexaFluor、传统荧光染料和比色检测系统相兼容。简单来说,用这种方法做多重免疫荧光是利用二抗上带有的HRP(而不是直接偶联荧光素),来催化后续添加入体系的非活性荧光素。荧光素在HRP和过氧化氢的作用下被活化,跟临近蛋白的酪氨酸残基共价偶联,使得蛋白样品与荧光素稳定结合。然后微波处理,前一轮非共价结合的抗体被洗掉,共价结合的荧光素还留存在样品上。再换个一抗来第二轮孵育,周而复始。等到所有抗体孵育结束,荧光素都结合好后,然后去检测结果。

液相悬浮芯片技术产品多因子技术可同时检测多个样本的多个指标,如通路中多个相关蛋白的共检测。虽然液相蛋白定量检测的技术很多,但是大多数的技术能对样本进行单一指标的检测,同时检测多个指标时则需要提供大量的样本分批检测,操作繁琐,且各指标间差异性较大。对于样本量较少或需要对比各指标的用户,传统的技术无法满足需要。日常实验中,常需对溶液体系中的可溶性蛋白进行定量检测,如细胞培养上清或血清中的细胞因子含量的定量分析,由于这些因子的含量较少,低于一般常规方法的检测下限,使用常规的蛋白检测方法如WesternBlot等很难检测。而多因子技术样本需求量少(25~60μL/孔),检测指标多,可兼容血清/血浆,细胞上清,细胞/组织裂解液,脑脊液等多种生物学体液。其灵敏度高(部分panel可达到亚fg/ml),宽线性范围(达到6个log),具有高重复性(板内CV<6-8%,板间<10%,批间<15%),适宜多类型指标的同时测定(炎症,趋化,代谢……)。LabEx提供单细胞功能组学(IsoPlexis)服务!

炎症相关的生物标志物包括:(1)肠道微生物因子:肠道菌群可能受到饮食,益生菌,益生元,外源酶,粪便菌群移植和其他环境因素的影响(2)免疫相关:肠道菌群驱动炎症的扩大,细胞浸润固有层,包括T细胞、B细胞、巨噬细胞、树突状细胞(DCs)和中性粒细胞;活化的固有层细胞产生高水平局部组织促炎细胞因子,包括TNF,IL-1β,IFN-γ和IL-23/Th17细胞途径。(3)炎症介质:如自由基、白三烯,趋化因子和促炎细胞因子(如IL-12,IL-23,IL-17,IL-18和TGF-β)等。LabEx 样本制备平台:以P2细胞房,磁珠分选,gentleMACS,为下游实验提供样本。GRO

LabEx多因子检测技术--液相悬浮技术。GRO

免疫组化,是应用免疫学基本原理——抗原抗体反应,即抗原与抗体特异性结合的原理,通过化学反应使标记抗体的显色剂(荧光素、酶、金属离子、同位素)显色来确定组织细胞内抗原(多肽和蛋白质),对其进行定位、定性及定量的研究,称为免疫组织化学技术(immunohistochemistry)或免疫细胞化学技术(immunocytochemistry)。LabEx提供IHC/ICC(免疫组化/免疫荧光)实验服务,提供样本细胞涂片、细胞爬片、组织冰冻切片、组织石蜡切片;或组织、蜡块均可。一抗(可帮忙提供,费用另计)。GRO

上海乐备实生物技术有限公司专注技术创新和产品研发,发展规模团队不断壮大。目前我公司在职员工以90后为主,是一个有活力有能力有创新精神的团队。上海乐备实生物技术有限公司主营业务涵盖标志物筛查,多因子检测,Luminex检测,MSD技术服务,坚持“质量保证、良好服务、顾客满意”的质量方针,赢得广大客户的支持和信赖。公司深耕标志物筛查,多因子检测,Luminex检测,MSD技术服务,正积蓄着更大的能量,向更广阔的空间、更宽泛的领域拓展。

标签: 多因子检测

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