江苏婴幼儿食品用左旋肉碱测定用试剂

乙酰辅酶A

肉碱乙酰转移酶乙酰肉碱转移酶

5,5'-二硫代双(2-硝基苯甲酸)69-78-3

N-2-羟乙基哌嗪-N-2-乙烷磺酸HEPES7365-45-9

HEPES

乙酰辅酶A三锂盐

左旋肉碱L-肉碱541-15-1

维生素BT541-15-1

乙酰辅酶A是能源物质代谢的重要中间代谢产物，在体内能源物质代谢中是一个枢纽性的物质。糖、脂肪、蛋白质三大营养物质通过乙酰辅酶A汇聚成一条共同的代谢通路——三羧酸循环和氧化磷酸化，经过这条通路彻底氧化生成二氧化碳和水，释放能量用以ATP的合成。乙酰辅酶A是合成脂肪酸、酮体等能源物质的前体物质，也是合成胆固醇及其衍生物等生理活性物质的前体物质。用于乳品肉碱的检测普誉公司为您提供各种规格乙酰辅酶A 左旋肉碱测定用，就选上海普誉科贸有限公司，欢迎您的来电！江苏婴幼儿食品用左旋肉碱测定用试剂

1试验方法——《食品安全国家标准婴幼儿食品和乳品中左旋肉碱的测定》（GB29989—2013）1.1原理概述将样品中的蛋白质用高氯酸溶液沉淀，过滤后的滤液用氢氧化钾溶液皂化，使左旋肉碱游离。在乙酰肉碱转移酶的催化作用下，游离的左旋肉碱和乙酰辅酶A反应生成乙酰肉碱和游离的辅酶A。辅酶A和显色剂发生显色反应，可从工作曲线上查得相应的质量浓度，据此计算样品中左旋肉碱的含量。1.2试验用品1.2.1试剂和标准品13%的高氯酸溶液（HClO4）;4mol/L的氢氧化钾溶液（KOH）;10mol/L的氢氧化钠溶液（NaOH）;2-硝基苯甲酸;N-2-羟乙基哌嗪-2-乙烷磺酸;乙二胺四乙酸二钠;乙酰辅酶A（CoA）;乙酰肉碱转移酶（CAT）。其中，乙酰辅酶A（CoA）和乙酰肉碱转移酶（CAT）需要在2～8℃的环境中保存。试验用水均为三级水，所用试剂均为分析纯。左旋肉碱标准品（C7H15NO3）：纯度≥98%。安徽乳品用左旋肉碱测定用试剂乙酰肉碱转移酶左旋肉碱测定用，就选上海普誉科贸有限公司，让您满意，欢迎您的来电哦！

乙酰辅酶A的提取1、细菌或培养细胞：先收集细菌或细胞到离心管内，离心后弃上清；按照细菌或细胞数量（104个）：试剂一体积（mL）为500~1000：1的比例（建议500万细菌或细胞加入1mL试剂一），超声波破碎细菌或细胞（冰浴，功率20％或200W，超声3s，间隔10s，重复30次）；8000g4℃离心10min，取上清，置冰上待测。2、组织：按照组织质量（g）：试剂一体积(mL)为1：5~10的比例（建议称取约0.1g组织，加入1mL试剂一），进行冰浴匀浆。8000g4℃离心10min，取上清，置冰上待测。测定步骤1、分光光度计预热30min，用蒸馏水于340nm处调零。2、取920μL工作液和100μL样本至1mL石英比色皿，混匀，立即记录340nm处20s的吸光值A1和80s时的吸光值A2，计算ΔA=A2-A1

乙酰肉碱转移酶（硫酸铵悬浮液）英文名：CarnitineAcetyltransferaseCAS号：9029-90-7MDL：MFCD00130725介绍：来源于鸽子胸肌，缓冲体系为：2.9M硫酸铵溶液,50mMK-phosphate,1mMEDTA,pH大约为7.5。酶活浓度为≥70units/mgprotein，即总蛋白量1mg中乙酰肉碱转移酶的酶活至少为70units。（酶活定义：Oneunitwillconvert1.0μmoleofacetyl-L-carnitineandCoAtoL-carnitineandacetyl-CoAperminatpH8.0at25℃）用途：适用于《GB29989-2013婴幼儿食品和乳品中左旋肉碱的测定》储存条件：2-8℃左旋肉碱测定用，就选上海普誉科贸有限公司，欢迎客户来电！

GB 29989 婴幼儿食品和乳品中左旋肉碱的测定

酶技术法酶技术法是目前测定左旋肉碱较为常用的方法,主要包括酶技术的分光光度法、放射酶法、自动分析仪法、荧光光度法、酶循环法等。1.1(1)酶显色法。酶显色法也被称为2-基甲酸(DTNB)法，是目前测定左旋肉碱较为常用的方法。该方法**开始是由Marquis和Fritz于1964年建立,检测了小鼠组织中的游离肉碱后经进一步完善成为现在的方法。该方法的机理为:左旋肉碱与乙酷辅酶A(乙酷COA)在乙肉碱转移酶(CAT)的催化下反应生成乙酷肉碱和游离辅酶A(COASH。COASH和2-硝基苯甲酸(DTNB)反应生成黄色物质其颜色深浅与COASH的含量成正比。因COASH与左旋肉碱是等摩尔反应关系,通过分光光度法测定COASH生成量即可间接测定左旋肉碱的含量。该方法操作经济、快捷，且该方法中催化全CAT酶对于左旋肉碱和乙酷辅酶A之间的反应具有专一性,从而可以排除右旋肉碱的干扰,故灵√下高检出限为0.6mg/100g重复性和回收率较收率在96.2%~104.7%之间口。而且与化学法(通过比色法测定肉碱和澳酚蓝反应生成的有色物质来测定肉碱)相比,此法不受样品中所含季胺类物质的影响。国家标准《GB29989婴幼儿食品和乳品中左旋肉碱的测定》中使用的便是此方法。 上海普誉科贸有限公司是一家专业提供 左旋肉碱测定用的公司，价格实惠，欢迎您的来电哦！辽宁肉碱测定用左旋肉碱测定用试剂硝基苯甲酸

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一般描述乙酰辅酶A，三锂盐应用乙酰辅酶A用于使用放射性同位素测定细胞提取物中的CAT酶活性。细胞提取物中的CAT酶活性催化乙酰基从乙酰辅酶A转移到氯霉素。已经开发了许多测定来测量细胞提取物中的CAT活性。乙酰辅酶A也已用于测定柠檬酸合酶活性。生化/生理作用乙酰辅酶A（Ac-CoA）是糖酵解的**终产物，参与Ac-CoA途径，这是碳化合物的代谢途径。Ac-CoA在胆固醇合成中十分重要。它还参与脂肪酸的生物合成和多胺（如精胺和亚精胺）的分解代谢。低水平的Ac-CoA导致神经胶质细胞和神经元功能的丧失。酮体和甘油三酯在水解时产生Ac-CoA，这间接导致组蛋白乙酰化增加。制备说明工作溶液：比较好溶剂：具有弱酸性pH（4至5）的水或水溶液。储存条件（工作溶液）：-15至-25°C50mg/ml磷酸盐缓冲液，pH7，在-15至-25℃下，可稳定保存3周。未冻存的溶液应立即使用。江苏婴幼儿食品用左旋肉碱测定用试剂