GB29989 食品安全国家标准婴幼儿食品和乳品中左旋肉碱的测定
试剂配制
高氯酸溶液（13%）：13mL高氯酸稀释至100mL。
氢氧化钠溶液（10mol/L）：称取40g氢氧化钠用水溶解，冷却后稀释至100mL。3.2.3氢氧化钾溶液（4.0mol/L）：称取22.4g氢氧化钾用水溶解，冷却后稀释至100mL。
显色储备液：分别称取50mg2-硝基苯甲酸、5.96gN-2-羟乙基哌嗪-N-2-乙烷磺酸、185mg乙二胺四乙酸二钠溶于30mL去离子水中，用10mol/LNaOH溶液调pH至7.4～7.6，然后用水定容至50mL。此液置于4℃冰箱中可保存3个月。
显色工作液：吸取5.0mL显色储备液用水定容至25mL。
乙酰辅酶A（AcetylCoA）溶液：称取20.0mg乙酰辅酶A溶于2.0mL水中。临用时配制。 上海普誉科贸有限公司为您提供 左旋肉碱测定用，有想法可以来我司咨询！陕西左旋肉碱测定用左旋肉碱测定用试剂硝基苯甲酸
GB29989食品安全国家标准婴幼儿食品和乳品中左旋肉碱的测定
范围本标准规定了婴幼儿食品和乳品中左旋肉碱的测定方法。本标准适用于婴幼儿食品和乳品中左旋肉碱的测定。
原理试样经过水提取，用高氯酸沉淀蛋白质后过滤。滤液经碱皂化后使溶液中结合态的左旋肉碱游离出来。左旋肉碱与乙酰辅酶A在乙酰肉碱转移酶的催化下反应生成乙酰肉碱和游离的辅酶A。游离的辅酶A和2-硝基苯甲酸反应生成黄色物质，其颜色深浅与游离的辅酶A含量成正比。因游离的辅酶A与左旋肉碱是等摩尔反应关系，可间接求出试样中左旋肉碱含量。
试剂和材料注：除非另有说明，本方法所用试剂均为分析纯，水为GB/T6682规定的三级水。
试剂 高氯酸(HClO4)。 氢氧化钠(NaOH)。氢氧化钾(KOH)。 2-硝基苯甲酸(C14H8N2O8S2)。 N-2-羟乙基哌嗪-N-2-乙烷磺酸(C8H18N2O4S)。 乙二胺四乙酸二钠（C10H14N2Na2·2H2O）。 乙酰辅酶A（AcetylCoA）：在2℃~8℃保存。 乙酰肉碱转移酶(CAT)：在2℃~8℃保存。 上海左旋肉碱测定用左旋肉碱测定用试剂左旋肉碱上海普誉科贸有限公司致力于提供 左旋肉碱测定用，有想法的可以来电咨询！
GB 29989 婴幼儿食品和乳品中左旋肉碱的测定
酶技术法酶技术法是目前测定左旋肉碱较为常用的方法,主要包括酶技术的分光光度法、放射酶法、自动分析仪法、荧光光度法、酶循环法等。1.1(1)酶显色法。酶显色法也被称为2-基甲酸(DTNB)法，是目前测定左旋肉碱较为常用的方法。该方法**开始是由Marquis和Fritz于1964年建立,检测了小鼠组织中的游离肉碱后经进一步完善成为现在的方法。该方法的机理为:左旋肉碱与乙酷辅酶A(乙酷COA)在乙肉碱转移酶(CAT)的催化下反应生成乙酷肉碱和游离辅酶A(COASH。COASH和2-硝基苯甲酸(DTNB)反应生成黄色物质其颜色深浅与COASH的含量成正比。因COASH与左旋肉碱是等摩尔反应关系,通过分光光度法测定COASH生成量即可间接测定左旋肉碱的含量。该方法操作经济、快捷，且该方法中催化全CAT酶对于左旋肉碱和乙酷辅酶A之间的反应具有专一性,从而可以排除右旋肉碱的干扰,故灵√下高检出限为0.6mg/100g重复性和回收率较收率在96.2%~104.7%之间口。而且与化学法(通过比色法测定肉碱和澳酚蓝反应生成的有色物质来测定肉碱)相比,此法不受样品中所含季胺类物质的影响。国家标准《GB29989婴幼儿食品和乳品中左旋肉碱的测定》中使用的便是此方法。
婴幼儿食品和乳品中左旋肉碱的测定
分析过程1.4.1样品预处理在小烧杯中称取5g（精确至0.1mg）奶粉样品，用30mL、40℃的水溶解至100mL的容量瓶中。高氯酸溶液加10mL后，上下混合均匀，静置20min。用三级水定容后混匀，用定量滤纸过滤至100mL的三角瓶中。吸取20mL滤液于50mL的小烧杯中，用氢氧化钾溶液调节滤液的pH值，当pH值达到12.5～13.0，放入40℃水浴锅中60min。经冷却后，用高氯酸调节pH达到7.0～7.5。小心地转入50mL的容量瓶中，定容混匀，放入4℃的冰箱过夜。用时取出放置至室温后，用注射器吸取上清液用滤膜过滤待用。1.4.2绘制标准曲线在2个1cm的比色皿中分别吸取2.0mL的左旋肉碱标准工作液，分别加入0.8mL的显色工作液和100μL的CoA溶液混匀，放入分光光度仪中，在412nm的波长下5min后进行归零。在外槽的比色皿中加入100μL的CAT溶液混匀，反应10min后比色。制作標准曲线，横坐标为左旋肉碱标准工作液浓度，纵坐标为吸光度值[4]。1.4.3测定样品按照步骤“1.4.2”测定处理好的样液的吸光值，查得样液浓度。 上海普誉科贸有限公司致力于提供 左旋肉碱测定用，价格实惠，有需要可以联系我司哦！
乙酰辅酶A是辅酶A的乙酰化形式，可以看作是活化了的乙酸。基团(CH3CO-=乙酰基)与辅酶A的半胱氨酸残基的SH-基团相连。这其实是高能键硫酯键。它是脂肪酸的β-氧化及糖酵解后产生的**酸氧化脱羧的产物。在许多代谢过程中起着关键的作用。
乙酰辅酶A是人体内重要的化学物质。首先，它是**酸脱羧，脂肪酸的β-氧化的产物。当**酸激进入线粒体的基质后，它会被**酸脱氢酶复合体转化为乙酰辅酶A，因为在此过程中，**酸会被氧化（氢原子转移到NADH+）及其羧基会以二氧化碳的形式离开，故此过程被称为**酸脱羧。同时，它是脂肪酸合成，胆固醇合成和生酮作用的碳来源。三大营养物质的彻底氧化殊途同归，都会生成乙酰辅酶A以进入三羧酸循环。 上海普誉科贸有限公司为您提供 左旋肉碱测定用。陕西普誉公司左旋肉碱测定用试剂L肉碱
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为了验证采用分光光度法测定婴幼儿食品和乳品中左旋肉碱含量方法的准确性与可靠性，判断测定结果是否达到标准要求，文章采用《食品安全国家标准婴幼儿食品和乳品中左旋肉碱的测定》中的方法测定乳品中左旋肉碱的含量，并根据《合格评定化学分析方法确认和验证指南》中的相关规定对其线性、线性范围、检出限、定量限、精密度、回收率6个参数进行验证。
左旋肉碱，别名L-肉碱或维生素BT，是一种白色晶体或者白色透明粉末，易溶于水、酒精和碱性溶液，200℃以上熔化分解。左旋肉碱是由俄国科学家Gulewitsch和Krimberg在骨骼肌中发现的。左旋肉碱是参与生物体新陈代谢的重要物质，具有多种生理功能。奶粉中的左旋肉碱是促进奶粉中的脂肪分解、代谢和供能的重要营养素，同时能促进体内的脂肪转化为能量，属于一种类氨基酸类的营养物质[1]。人体内的左旋肉碱主要来源于羊肉、牛肉、猪肉等红色肉类，奶粉中适量添加左旋肉碱对人体无害，可以促进体内脂肪代谢和利用。婴幼儿饮食结构比较单一，主要饮食来源为各种乳制品，主要的能量来源为乳制品中的脂肪，宝宝体内缺乏左旋肉碱，导致脂肪的利用率下降，不利于宝宝体格发育，添加左旋肉碱可以提高宝宝对奶粉中脂肪的利用率[2]。 陕西左旋肉碱测定用左旋肉碱测定用试剂硝基苯甲酸