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无锡体外研究D-荧光素钾盐

来源: 发布时间:2022年09月01日

    常见的荧光素酶有两种,分别是萤火虫荧光素酶(fireflyluciferase,编码基因是luc)和海肾荧光素酶(Renillaluciferase,编码基因是Rluc),前者的底物是D-Luciferin,后者的底物是Coelenterazine。它们共同的作用原理是在ATP和荧光素酶的催化作用下,底物被氧化发光(不同底物光的颜色和波长不同),当底物过量时,产生的光量子数与荧光素酶的浓度呈正相关性。***成像技术(opticalinvivoimaging)目前主要采用生物发光(bioluminescence)与荧光(fluorescence)两种技术,生物发光法是基于荧光素酶能催化底物(D-Luciferin或Coelenterazine)化学发光的原理,将体外能稳定表达荧光素酶的细胞株植入动物体内,与后期注射入体内的底物发生反应,利用光学系统检测光强度,间接反映出细胞数量的变化或细胞的定位。这项技术已被广泛应用于多个领域常用的有**或疾病动物模型的建立,并可用于病毒学研究、siRNA研究、干细胞研究、蛋白质相互作用研究等。以下主要介绍D-Luciferin(D荧光素)的分类:D-Luciferin:有三种,分别是D-Luciferin,SodiumSalt/D荧光素钠盐、D-Luciferin,PotassiumSalt/D-荧光素钾盐和D-LuciferinFirefly,freeacid/D-萤火虫荧光素。光量子数与荧光素酶的浓度呈正相关性。无锡体外研究D-荧光素钾盐

    LAR)Promega公司推出的第一种萤光素酶检测试剂LuciferaseAssaySystem(LAR),为灵敏、非放射性的报告基因检测拉开了序幕。LAR与萤火虫萤光素酶(luc)报告基因一起,为研究人员开始了解基因表达调控因子提供了首要的工具。[1]1995Dual-Luciferase®报告基因检测系统(DLR)DLR是第一种允许在单个样本中依次检测两个报告基因的试剂。通过允许萤光素酶活性的内部归一化,在提高报告基因检测的可靠性方面取得了关键进展。此外,pGL3报告基因载体系列具有改良后的萤火虫萤光素酶基因,luc+。这个改造一种报告基因以实现性能改进的例子后来被进一步应用到pGL4和luc2报告基因上,通过生物信息学和合成方法,实现了更大的改进。[1]1999ENLITEN®/UltraGlo™重组萤光素酶Promega公司在早期推出的一种重组萤火虫萤光素酶(Enliten)基础上,改造出了一种称为UltraGlo™的热稳定性萤光素酶。UltraGlo™的开发是在各种检测和储藏条件下进行一步法“加样-读数”检测的关键。此后,通过开发新的方法来改变萤火虫萤光素酶检测的信号动力学,例如Bright-Glo™、Steady-Glo®和Dual-Glo®允许使用微孔板进行检测。而“加样-读数”的形式简化了样品处理。多重荧光试剂盒D-荧光素钾盐使用的注意事项。

    这是一种小分子(19kDa)单体酶,具有独特的底物,其灵敏度比已具备高灵敏度的萤火虫或海肾萤光素酶系统高约100倍。这种新型的报告基因有着***的应用前景,为进一步的技术开发奠定了基础。[1]2015NanoBRET™技术NanoLuc®的小体积和非常明亮的光输出是作为蛋白质标签的理想特征。这些特征还很适合作为生物发光共振能量转移(BRET)的供体。一项针对各种能量受体荧光基团的深入研究发现,红色光谱中的可选择性有助于消除与BRET测定相关的一些挑战。可将这些荧光基团添加到蛋白质配基等分子中以测量靶蛋白的结合,或与HaloTag®配基耦联以进行活细胞中蛋白质:蛋白质相互作用的检测。[1]2016NanoBiT®技术随着NanoLuc®的诞生,Promega的科学家努力将该报告基因改造为多亚基系统,即“NanoLuc®BinaryTechnology”或NanoBiT®。该系统由两部分组成:11个氨基酸的小标签和一个更大,更精细的NanoLuc®亚基,LgBiT。这两部分结构互补结合,重组为一个明亮的萤光素酶。这些亚基的亲和力可以和SmBiT肽一样低,从而可以进行蛋白质相互作用的测定;也可以和HiBiT一样高,从而允许自我组装。[1]2017HiBiT®技术基于NanoBiT®系统的研究。

    tetrametrylrhodarnineisothiocyante,TRITC)是一种紫红色粉末,较稳定,是罗达明(rhodamine)的衍生物。更大吸收光谱550urn,更大发射光谱620urn呈橙红色荧光,与FITC发射的黄绿色荧光对比鲜明,常用于双标记染色。按照抗原抗体反应的结合步聚,免疫荧光法可分为以下三种。1.直接法用荧光素标记的特异性抗体直接与相应的抗原结合,以检查出相应的抗原成分。2.间接法先用特异性抗体与相应的抗原结合,洗去未结合的抗体,再用荧光素标记的抗特异性抗体(间接荧光抗体)与特异性抗体相结合,形成抗原一特异性抗体一间接荧光抗体的复合物。在此复合物上带有比直接法更多的荧光抗体,所以,此法较直接法灵敏。3.补体法用特异性的抗体和补体的混合液与标本上的抗原反应,补体就结合在抗原抗体复合物上,再用抗补体的荧光抗体与之相结合,就形成了抗原一抗体一补体一抗补体荧光抗体的复合物。荧光显微镜下所见到的发出荧光的部分即是抗原所在的部位。补体法具有敏感性强的优势,同时适用于各种不同种属来源的特异性抗体的标记显示,在各种不同种属动物抗体的检测上为更常用的技术方法荧光素酶(英文名称:Luciferase)是自然界中能够产生生物荧光的酶的统称。D-荧光素有时候也叫游离酸。

    GT-NHSCy3-NHS酯Cy7-NHS酯5-羧基荧光素-NHS酯6-羧基荧光素-NHS酯5(6)-羧基荧光素-NHS酯6-羧基荧光素D荧光素钠盐D-Luciferin,SodiumSaltD-荧光素钾盐D-Luciferin,PotassiumSaltD-荧光素萤火虫,游离酸D-LuciferinFirefly,freeacid萤火虫荧光素酶fireflyluciferase海肾荧光素酶Renillaluciferase天然腔肠荧光素Coelenterazineh腔肠素hCoelenterazinef腔肠素fCoelenterazineh/腔肠素h腔肠荧光素活题成像用D-luciferin,potassiumsalt荧光素钾盐介绍一、活题成像技术简介活题生物发光成像技术能够让研究人员直接快速的测量各种哎症模型中肿大的瘤的生长、转移以及对药物的反应。在药效学评价方面,荧光素酶哎症模型可用于哎症体内用药在整体动物水平上进行长期疗效跟踪观察。利用无创伤活题成像对哎细胞生长的检测,可对哎症治的好之前和过程中的哎细胞的变化进行实时观测和评估。荧光素酶的发光是生物发光,不需要激发光,但需要底物荧光素(D-Luciferin)。荧光素酶的底物荧光素,约280道尔顿。荧光素的水溶性和脂溶性都非常好,很容易穿透细胞膜和血脑屏障。荧光素是腹腔注射或尾部静脉注射进入小鼠体内的,约一分钟就可以扩散到小鼠全身。荧光素。做D-荧光素钾盐测试价格是多少。徐州萤火虫荧光素酶D-荧光素钾盐浓度

D-荧光素钾盐测试方法是体外生物发光检测。无锡体外研究D-荧光素钾盐

    可用于需要低检测限的测定具有用于研究基因调控和功能的快速,简单且均一的生物发光测定法与标准细胞生长培养基的使用兼容高斯荧光素酶近年来,其他荧光素酶(例如高斯荧光素酶)的使用有所增加,因为这些报告基因较小,并且不需要ATP的存在。高斯荧光素酶是一种20kD的蛋白质,可通过氧气催化腔肠素氧化,产生光。来自于海洋足类高斯氏菌的生物发光酶在表达后可有效地从哺乳动物细胞中分泌出来。Amplite™高斯荧光素酶报告基因检测试剂盒使用专有的发光配方来定量细胞培养基中的荧光素酶活性。当该试剂与高斯荧光素酶相互作用时,产***光产物,该发光产物提供强发光。Amplite高斯荧光素酶报告基因测定试剂盒特点:提供了与HTS液体处理仪器兼容的所有基本组件它们具有高灵敏度,可以以方便的96孔和384孔微量滴定板形式进行半衰期为一小时的“辉光型”信号在大量检测板之间提供一致的信号与标准细胞生长培养基兼容海肾荧光素酶海肾萤光素酶是一种从海桑(Renillareniformis)分离的36kDa蛋白。与萤火虫荧光素酶相比,海肾荧光素酶的底物和辅因子要求不同。海肾荧光素酶在氧气存在下使用腔肠素,产生480nm的蓝光。与萤火虫萤光素酶类似。无锡体外研究D-荧光素钾盐

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