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淮安体外研究D-荧光素钾盐使用说明

来源: 发布时间:2022年11月07日

    这是一种小分子(19kDa)单体酶,具有独特的底物,其灵敏度比已具备高灵敏度的萤火虫或海肾萤光素酶系统高约100倍。这种新型的报告基因有着***的应用前景,为进一步的技术开发奠定了基础。[1]2015NanoBRET™技术NanoLuc®的小体积和非常明亮的光输出是作为蛋白质标签的理想特征。这些特征还很适合作为生物发光共振能量转移(BRET)的供体。一项针对各种能量受体荧光基团的深入研究发现,红色光谱中的可选择性有助于消除与BRET测定相关的一些挑战。可将这些荧光基团添加到蛋白质配基等分子中以测量靶蛋白的结合,或与HaloTag®配基耦联以进行活细胞中蛋白质:蛋白质相互作用的检测。[1]2016NanoBiT®技术随着NanoLuc®的诞生,Promega的科学家努力将该报告基因改造为多亚基系统,即“NanoLuc®BinaryTechnology”或NanoBiT®。该系统由两部分组成:11个氨基酸的小标签和一个更大,更精细的NanoLuc®亚基,LgBiT。这两部分结构互补结合,重组为一个明亮的萤光素酶。这些亚基的亲和力可以和SmBiT肽一样低,从而可以进行蛋白质相互作用的测定;也可以和HiBiT一样高,从而允许自我组装。[1]2017HiBiT®技术基于NanoBiT®系统的研究。D-荧光素钾盐的测试方法有哪几种?淮安体外研究D-荧光素钾盐使用说明

    LAR)Promega公司推出的第一种萤光素酶检测试剂LuciferaseAssaySystem(LAR),为灵敏、非放射性的报告基因检测拉开了序幕。LAR与萤火虫萤光素酶(luc)报告基因一起,为研究人员开始了解基因表达调控因子提供了首要的工具。[1]1995Dual-Luciferase®报告基因检测系统(DLR)DLR是第一种允许在单个样本中依次检测两个报告基因的试剂。通过允许萤光素酶活性的内部归一化,在提高报告基因检测的可靠性方面取得了关键进展。此外,pGL3报告基因载体系列具有改良后的萤火虫萤光素酶基因,luc+。这个改造一种报告基因以实现性能改进的例子后来被进一步应用到pGL4和luc2报告基因上,通过生物信息学和合成方法,实现了更大的改进。[1]1999ENLITEN®/UltraGlo™重组萤光素酶Promega公司在早期推出的一种重组萤火虫萤光素酶(Enliten)基础上,改造出了一种称为UltraGlo™的热稳定性萤光素酶。UltraGlo™的开发是在各种检测和储藏条件下进行一步法“加样-读数”检测的关键。此后,通过开发新的方法来改变萤火虫萤光素酶检测的信号动力学,例如Bright-Glo™、Steady-Glo®和Dual-Glo®允许使用微孔板进行检测。而“加样-读数”的形式简化了样品处理。上海荧光素钾盐D-荧光素钾盐活题成像D-荧光素钾盐适用于哪些领域?

    而发出不同颜色的荧光。萤火虫有2000多种,而叩甲总科(包括萤火虫、叩头虫和相关昆虫)则有更多,因此它们的荧光素酶对于分子系统学研究很有用。目前研究得更透彻的荧光素酶是来自Photinini族萤火虫中的北美萤火虫(Photinuspyralis)。荧光素酶报告基因(Luc)是指以荧光素(luciferin)为底物来检测萤火虫荧光素酶(fireflyluciferase)活性的一种报告系统。荧光素酶可以催化luciferin氧化oxyluciferin,在luciferin氧化的过程中,会发出生物荧光(bioluminescence)。荧光素酶是能够催化不同底物氧化发光的一类酶,哺乳细胞无内源性荧光素酶。更常用的荧光素酶有细菌荧光素酶、萤火虫荧光素酶和Renilla荧光素酶。细菌荧光素酶对热敏感,因此在哺乳细胞的应用中受到限制。萤火虫荧光素酶灵敏度高,检测线性范围宽达7~8个数量级,是更常用于哺乳细胞的报道基因,用荧光比色计即可检测酶活性,因而适用于高通量筛选。随着具有膜通透性和光裂解作用的萤火虫荧光素酶的应用,无需裂解细胞即可检测酶活性。Renilla荧光素酶催化肠腔(coelenterazine)氧化,产物可透过生物膜,可能是更适用于活细胞的报告分子。将荧光素酶报告基因载体转染到细胞中。

    而是对于所有能够产生萤光的底物和其对应的酶的统称,虽然它们各不相同。不同的能够控制发光的生物体用不同的萤光素酶来催化不同的发光反应。**为人所知的发光生物是萤火虫,而其所采用不同的萤光素酶与其他发光生物如荧光菇(发光类脐菇,Omphalotusolearius)或许多海洋生物都不相同。在萤火虫中,发光反应所需的氧气是从被称为腹部气管(abdominaltrachea)的管道中输入。一些生物,如叩头虫,含有多种不同的萤光素酶,能够催化同一萤光素底物,而发出不同颜色的萤光。萤火虫有2000多种,而叩甲总科(包括萤火虫、叩头虫和相关昆虫)则有更多,因此它们的萤光素酶对于分子系统学研究很有用。如今研究得**透彻的萤光素酶是来自Photinini族萤火虫中的北美萤火虫(Photinuspyralis)。[1]萤光素酶可以在实验室中用基因工程的方法生成,并被用于多种不同的实验。萤光素酶的基因可以被合成并插入到生物体中或转染到细胞中。研究者利用基因工程已经使得小鼠、家蚕、马铃薯等一些生物可以合成萤光素酶。间接体外成像是一种强大的研究手段,可以对整个动物体中的细胞群落进行分析:将不同类型的细胞(骨髓干细胞、T细胞等)标记上(即表达)萤光素酶。D-荧光素钾盐检测公司招代理吗?

    可用于需要低检测限的测定具有用于研究基因调控和功能的快速,简单且均一的生物发光测定法与标准细胞生长培养基的使用兼容高斯荧光素酶近年来,其他荧光素酶(例如高斯荧光素酶)的使用有所增加,因为这些报告基因较小,并且不需要ATP的存在。高斯荧光素酶是一种20kD的蛋白质,可通过氧气催化腔肠素氧化,产生光。来自于海洋足类高斯氏菌的生物发光酶在表达后可有效地从哺乳动物细胞中分泌出来。Amplite™高斯荧光素酶报告基因检测试剂盒使用专有的发光配方来定量细胞培养基中的荧光素酶活性。当该试剂与高斯荧光素酶相互作用时,产***光产物,该发光产物提供强发光。Amplite高斯荧光素酶报告基因测定试剂盒特点:提供了与HTS液体处理仪器兼容的所有基本组件它们具有高灵敏度,可以以方便的96孔和384孔微量滴定板形式进行半衰期为一小时的“辉光型”信号在大量检测板之间提供一致的信号与标准细胞生长培养基兼容海肾荧光素酶海肾萤光素酶是一种从海桑(Renillareniformis)分离的36kDa蛋白。与萤火虫荧光素酶相比,海肾荧光素酶的底物和辅因子要求不同。海肾荧光素酶在氧气存在下使用腔肠素,产生480nm的蓝光。与萤火虫萤光素酶类似。南京翌科生物科技有限公司D-荧光素钾盐测试价格。南京荧光素D-荧光素钾盐生物公司

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