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构建斑马鱼炎症模型

来源: 发布时间:2023年07月09日

现在,布里斯托大学的科学家通过对半通明斑马鱼进行实时成像和基因分析,将对愈合和伤疤印记形成进行建模,并将研究成果应用于人类,以协助帮助有伤疤印记的人。三五成群、活泼可爱,在一般人眼中,斑马鱼只是一种非常小巧的观赏鱼,但是在科学试验室里,斑马鱼却是各种成效试验的新宠儿。有着“水中小白鼠”之称的斑马鱼,具有许多与生俱来的优点:斑马鱼的基因与人类基因相似度高达87%,试验成果可比性强;斑马鱼与人类心血管系统的一致性达95%,高于老鼠;斑马鱼的胚胎通明,可同时调查分析多个组织结构;斑马鱼试验成功验证中药在体内的效果机理。构建斑马鱼炎症模型

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社交对鱼进行交际测试所需的测试设备首要包括一个通明的Plexiglas十字槽(50×50×10cm,长×宽×高)(图3e)。水槽的每只臂都被一个Plexiglas墙隔开。在水槽中,随机挑选的一个末端腔室(其他三个腔室是空位)和中心腔室各包含一个相同处理的个体。转移后,对鱼进行2分钟的习惯,记录其行为8分钟。数据剖析中,计算出鱼在其同伴(交际圈)邻近区域的时刻,作为对同种视觉影响的呼应。习惯漆黑或噪音影响:open-fieldtank被用来评价鱼对漆黑或噪音影响的惊吓反应。漆黑和噪声影响实验别离进行。简略地说,连续的漆黑影响(5分钟周期)通过放置在通明敞开设备底部的多个主动开/关白色LEDs阵列来传递。此外,用一个塑料立方体(15×9×0.5cm,长×宽×高)将其提升到100cm的高度,用手将其释放到坚固的平面上,发生一系列的噪声影响(图5a、b)。用了一个俯视图照相机来捕捉鱼的动作。斑马鱼用于检测杭州斑马鱼实验动物模型。

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在这项研究中,科研团队利用模式生物斑马鱼来研究肌肉再生。这种小型的热带鱼强大的再生能力和透明性使科学家们能够观实时、长期地观察活的斑马鱼内发生的组织再生全过程。通过转基因技术标记肌干细胞和祖细胞,再通过成像技术可以清晰地看到从初始损伤到在脊椎动物伤口部位形成新分化的肌肉纤维的整个再生过程。而近期一项关于活化PAX7阳性细胞在小鼠体内肌肉修复中的作用的研究,也表明了哺乳动物肌肉生物学和斑马鱼研究的潜在相关性。至于对***的卫星细胞的追踪,由于该体内检查方法在目前的限制性,目前在很大程度上是通过斑马鱼幼体系统克服的。此外,进入伤口部位的增殖肌细胞与初期接触阶段损伤部位纤维、二次接触未受损部位纤维之间的相互作用也是出乎意料的。研究表明,未受损伤的纤维不是再生过程中被动的旁观者,其本身可能会指导分化祖细胞到**需要纤维生成的伤口区域发挥作用。研究还表明,伤口修复的动力学甚至心肌细胞分化的各方面,自然和完整纤维都部分地参与了这一进程。

斑马鱼作为免疫学新模式生物的优点在于:(1)与传统的免疫学模式生物——小鼠相比,斑马鱼有体型小,子代数量多,培育要求低,易于养殖,饲养成本低,便于开展大规模研究。(2)斑马鱼个体发育过程是在全透明状态下完成,使得整个心血管系统的发育过程能十分完整的被观察。特别是免疫系统个体发育的相关资料,是无法从小鼠上所进行的实验中轻易获得的。(3)先期对斑马鱼的遗传学研究积累的丰富突变库也为研究免疫相关基因的功能提供了条件。(4)在已知生物中,鱼类是**早具备获得性免疫系统的纲。斑马鱼在药理学毒理学的应用。

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斑马鱼体长只有3厘米,1升水里可以包容上百条、养殖起来很简单。此外,斑马鱼很简单鉴别男女并且它的胚胎是透明的,人们可以清楚地看到它的内脏、血管和神经的发育变化。正是因为这些特色,斑马鱼引起了美国俄勒冈大学闻名遗传学家乔治博士的留意,这位热带鱼爱好者在20世纪70时代初开始研讨斑马鱼的养殖办法,观察其胚胎发育进程。经过近十年的研讨,乔治博士的研讨组于1981年发表了一篇具有深刻影响的论文。在这篇论文中,他们介绍了斑马鱼的体外受精等许多新技术,接着又介绍了斑马鱼的卵裂特色、不同时期胚胎中细胞的发育进程等,并发现斑马鱼脑中的许多神经元的摆放简单而有规矩。斑马鱼可以在体外试验和哺乳动物试验之间起到了很好的效果。北京 斑马鱼 实验平台

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报告基因选用GFP或RFP,**小启动子来自斑马鱼gata2基因;将上述载体与体外转录得到的Tol2转座酶的mRNA共同注射到斑马鱼的单细胞受精卵中,受精卵长大后成为founder;Founder外交(out-cross)得到F1代胚胎,从中挑选出对于报告基因具有组织特异性表达模式的胚胎,拍照记录后分类培养;F1长大后通过linker-mediatedPCR的方法鉴定对应于GFP(或RFP)表达图式的Tol2插入位点,并通过与已知基因组数据比较,对插入位点进行定位与分析;通过外交纯化得到转基因鱼,直至得到只含有单个插入品系的转基因鱼。构建斑马鱼炎症模型

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