吉林大学斑马鱼实验室

斑马鱼敲除品系成功案例1、基因分析分析目的基因的保守结构域；2、靶点筛选设计4个gRNA靶点，PCR检测包含靶点的区域真实序列，显微注射验证靶点效率；3、大规模注射养殖F0Cas9pro+gRNA共注射，共养殖F0约80条用于后期Founder筛选；4、Founder筛选F0代斑马鱼与野生型外交，收集48hpf的F1胚胎抽取基因组，PCR鉴定，测序结果在靶点位置出现双峰的认为产生突变，然后TAclone验证其可能产生的突变方式；5、F1代筛选F1代斑马鱼剪尾筛选，TAclone验证突变方式：斑马鱼发育形态学研究成果。吉林大学斑马鱼实验室

斑马鱼血管生成基因如血管内皮细胞生长因子（VEGF）、an-iopoietins、ephrions及相应受体与哺乳动物功能相似，而且斑马鱼血管系统及其对调节血管新生类药物的***反应与哺乳动物类似。另外斑马鱼胚胎在血液循环系统严重缺陷的情况下仍能存活，且胚胎透明，利用血管转基因荧光斑马鱼可以在24小时以内就定量评价药物的血管形成***作用。

与传统的鸡胚尿囊膜、小鼠角膜实验相比，斑马鱼更加便捷、快速、高效，而且结果定量分析的准确度更高。

目前多个出于临床试验阶段的抗血管生成靶向候选***药如SU5416、SU6668、TNP470、SU4312和AG1478等均对斑马鱼的血管形成有***的***效果。用斑马鱼筛选发现具有血管形成***活性的中***体化合物也有很多，如靛玉红、呋喃二烯等。 福建斑马鱼实验抗体斑马鱼药物毒理学评价技术。

斑马鱼基本特点原产地：热带淡水鱼，原产于喜马拉雅山南麓的印度、巴基斯坦、孟加拉和尼泊尔等南亚国家。成鱼体长3-100px，略呈纺锤形，头小而稍尖，吻较短，身躯玲珑而纤细，因其体侧具有像斑马一样纵向的暗蓝色与银色相间的条纹而得名。斑马鱼是体外受精发育，胚体透明。胚胎发育快，受精后3天左右孵化出膜，天左右开口进食，约3个月达到性成熟，寿命可达2年以上。斑马鱼可常年产卵，繁殖周期3-4天，一对成年斑马鱼每次可产卵200-300枚，受精率通常在70%以上。养殖温度一般在23-31℃，15℃左右仍可存活，比较好养殖温度在25-28摄氏度之间，pH值在6.8~7.8，硬度在2~6之间。

报告基因选用GFP或RFP，**小启动子来自斑马鱼gata2基因；将上述载体与体外转录得到的Tol2转座酶的mRNA共同注射到斑马鱼的单细胞受精卵中，受精卵长大后成为founder；Founder外交（out-cross）得到F1代胚胎，从中挑选出对于报告基因具有组织特异性表达模式的胚胎，拍照记录后分类培养；F1长大后通过linker-mediatedPCR的方法鉴定对应于GFP（或RFP）表达图式的Tol2插入位点，并通过与已知基因组数据比较，对插入位点进行定位与分析；通过外交纯化得到转基因鱼，直至得到只含有单个插入品系的转基因鱼。斑马鱼实验周期短，大部分实验能够在一周内完成。

斑马鱼模型发展历史和应用现状2015年10月10日浏览量:2384次评论(0)来源:杭州环特发布者:杭州环特斑马鱼早在20世纪30年代就在欧洲用于环境检测研究，但普遍认为斑马鱼正式作为一种模式生物应用于科学研究始于1972年，美国GeorgeStreisinge教授在该年开始了斑马鱼发育生物学研究和模式动物建系工作。1989年，GeorgeStreisinge教授的同事MonteWesterfield教授出版***本斑马鱼研究专著TheZebrafishBook***版。1994年，“斑马鱼发育和遗传”主题会议在冷泉港实验室召开，斑马鱼模型开始被学术界接受。1998年，发生了多件斑马鱼技术发展的大事件，美国国立卫生研究院（NIH）在该年开始大力度支持斑马鱼基因组资源开发，全球较早斑马鱼模式生物数据库ZFIN在该年成立，而全球***家斑马鱼药物研发服务外包公司也是在这一年成立。2000年，欧洲Sanger中心启动斑马鱼全基因组测序工作，并于2年后发布了***个斑马鱼全基因组序列拼接ZV1。2004年，斑马鱼国际资源中心（ZIRC）在俄勒冈大学成立。2009年，斑马鱼药物毒理学评价技术***通过FDA和EMA的GLP认证。化学品斑马鱼胚胎和卵黄囊仔鱼阶段的短期毒性试。天津医科大学斑马鱼实验室

斑马鱼药物研发服务外包公司。吉林大学斑马鱼实验室

杭州环特生物科技股份有限公司，是亚洲家斑马鱼技术公司，是专注服务于大健康和美妆产业的一站式功效与安全研发检测解决方案提供商。凭借在斑马鱼技术领域逾20年的深厚积累，环特生物将原本用于基础研究的斑马鱼生物技术，开创性地运用到药物、保健食品、化妆品和食品及农产品的研究与评价中。公司研发团队由经验丰富的毒理学、药理学、食品化学、生物化学、生物信息学等各领域专业技术人员组成。技术团队成员中，具有硕博以上学历或高级以上职称占比70%以上。实验室场地面积超过1500平方米，拥有荧光显微镜、斑马鱼行为分析系统、斑马鱼心跳血液分析系统、GC-MS/MS等专业分析测试设备。拥有国际前列的斑马鱼养殖设施，养殖中心现有40,000尾成年斑马鱼，周产胚胎斑马鱼100,000条以上供实验研究用，、完善的设施设备，从硬件层面有效保障了项目顺利开展。吉林大学斑马鱼实验室

杭州环特生物科技股份有限公司是一家有着先进的发展理念，先进的管理经验，在发展过程中不断完善自己，要求自己，不断创新，时刻准备着迎接更多挑战的活力公司，在浙江省等地区的商务服务中汇聚了大量的人脉以及**，在业界也收获了很多良好的评价，这些都源自于自身不努力和大家共同进步的结果，这些评价对我们而言是比较好的前进动力，也促使我们在以后的道路上保持奋发图强、一往无前的进取创新精神，努力把公司发展战略推向一个新高度，在全体员工共同努力之下，全力拼搏将共同杭州环特生物科技供应和您一起携手走向更好的未来，创造更有价值的产品，我们将以更好的状态，更认真的态度，更饱满的精力去创造，去拼搏，去努力，让我们一起更好更快的成长！