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义翘神州Wnt-5重组蛋白

来源: 发布时间:2022年08月05日

由于重组蛋白通常在不同的表达系统中生产,容易受到各种因素的影响进而引起蛋白质的性质出现差异,因此为了保证获得高质量,稳定的结果,在药物分析、新药研发、细胞 therapy等应用中优先选择GMP(Good Manufacturing Practice, 良好生产规范)级重组蛋白。GMP要求企业从原料、人员、设施设备、生产过程、包装运输和质量控制等方面达到法规相关要求,形成一套可操作的作业规范。GMP级重组蛋白具有以下几个优点:详实的产品信息;严格的质量管理体系;批次间稳定性高;无外源动物源性。高质量的重组蛋白能提高实验的可重复性与结果的可信度。义翘神州Wnt-5重组蛋白

如果说明书上没有具体的说明,如何重溶(Reconstitute)冻干的重组蛋白?我们建议采用以下方式:(1)将试剂瓶和重溶缓冲液平衡至室温。(2)短暂离心试剂瓶以确保在小瓶底部收集所有冻干物。(3)加入推荐的重溶缓冲液,达到产品说明上推荐的浓度。避免剧烈振荡或移液器吹打,这可能导致蛋白质变性。(4)使试剂瓶在室温下重溶15-30分钟,可使用360度摇床或手动轻轻上下颠倒。(5)每管体积不小于10μL分装,并按产品说明书上的指示储存。(6)如果小瓶内呈现薄片或颗粒,则在室温下将产品混合几小时,然后在4℃过夜。GMP级IL-3重组蛋白定制选择高品质重组蛋白和生长因子。

重组蛋白是应用了重组DNA或重组RNA技术而获得的蛋白质。用于体外生产重组蛋白的宿主细胞主要是细菌(枯草芽孢杆菌、大肠杆菌)、酵母、昆虫细胞、哺乳动物细胞。 生产的蛋白在活性和应用方法方面均有所不同。根据自身的下游运用选择合适的蛋白表达系统,提高表达成功率。重组蛋白已被广泛应用于蛋白结构研究、免疫检测试剂、重组蛋白药物、诊断试剂开发、抗体药物靶点、CAR-T细胞靶点、Fc受体、流感病毒蛋白和细胞因子等大多数热门研究领域。

重组蛋白溶液在低浓度的冰冻条件下冻存时通常不是很稳定。在冻融过程中,溶液中的某些蛋白会粘附在容器壁上,如果蛋白的起始浓度较低,则上述原因可能会导致造成蛋白浓度的进一步下降。因此,重组蛋白溶液中要添加载体蛋白用于减少此类损失。常用的载体蛋白包括牛血清白蛋白(BSA),人血清白蛋白(HSA)或胎牛血清(FBS)。这些载体蛋白通常的使用浓度是在0.1%。依根据经验数据,如果重组蛋白的浓度低于0.5 mg/mL,则推荐加入一些载体蛋白。常见国产重组蛋白品牌:北京义翘神州,武汉普健生物,上海普欣生物,近岸蛋白质科技,武汉华美生物,北京百普赛斯生物等。常见进口重组蛋白品牌:R&D Systems,PeproTech,ProSpec,Gibco等。重组蛋白的应用显著增长,用于重组蛋白表达和纯化的技术和产品也得以增长。

蛋白质生物学不仅包含研究内容,也包含了研究所需的工具。即基于蛋白质结构及功能的研究,和利用抗体、蛋白及多肽等作为纯化、检测和分析生物系统的工具。有些蛋白分析方法(如western blotting和ELISA等)已作为实验室的常规实验方法使用了多年。其它方法如定量蛋白质谱的实验方法则是相对较新的实验技术,并且正在快速发展中。针对重组蛋白纯化,赛默飞提供种类丰富的标签选择,包括6xHis, GST, DYKDDDDK (FLAG), c-myc, 和 HA。还提供一系列磁珠和树脂等纯化产品,磁珠、磁性琼脂糖、散装树脂、离心柱或试剂盒,FPLC层析柱,96孔过滤板等,用于从大肠杆菌、酵母、昆虫或哺乳动物表达系统中纯化从微克(μg)到低千克(kg)级重组蛋白。可满足大多实验的需求,包括高通量筛选、批量处理、中试和工艺纯化等。重组蛋白大规模的瞬时表达是研究热点。普欣重组蛋白定制

重组蛋白干粉如何重溶?义翘神州Wnt-5重组蛋白

糖基化是指糖基转移酶作用下将糖转移至蛋白质,和蛋白质上的氨基酸残基形成糖苷键。蛋白质经过糖基化作用,形成糖蛋白。糖基化是对蛋白的重要的修饰作用,有调节蛋白质,帮助蛋白质折叠功能作用。在大多数情况下,生长因子或细胞因子的糖基化作用不会直接影响该蛋白与受体之间的结合。所以在体外研究中,重组生长因子或细胞因子的生物活性不会受糖基化作用的过多影响。不过,糖基化蛋白通常对蛋白酶的降解更不敏感具耐受性,所以在体内的半衰期比未经无糖基化的同种蛋白更长。因此在体内研究中,以选择哺乳动物表达系统或昆虫表达系统生产的重组蛋白可能是比大肠杆菌中生产的同种重组蛋白效果更好的一个选择要好。义翘神州Wnt-5重组蛋白

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