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人BDNF重组蛋白

来源: 发布时间:2022年08月01日

市场上重组蛋白通常以冻干形式售卖,这是因为蛋白质对热敏感,冻干能使蛋白质在存储过程中保持活性,延长保存时间,同时也能降低运输成本。但是冻干对蛋白质的活性会有一定的影响,可能造成蛋白质部分失活、聚集和其它变性等。这个时候,就需要通过加入保护剂(稳定剂,添加剂,辅料)和控制冻干的各种条件来尽可能降低这些负面的影响,尽可能的保护蛋白的活性。常见的保护剂或稳定剂包括糖类,多元醇,聚合物,表面活性剂,某些蛋白和氨基酸等。重组蛋白疫苗有着天然的优势。人BDNF重组蛋白

购买的重组蛋白单位一般是 μg,重组蛋白检测结果和用量常用单位是 U/mL 或 IU/mL。U是什么?和IU之间有什么差别?它们又是怎么与 μg 进行换算的呢?首先,U 是蛋白活性单位,用于计量蛋白本身的生物学活性。活性单位指在适条件下,单位时间内产生单位生物学效应的蛋白量。以酶为例,1961年,国际生物化学学会酶学委员会提出采用统一的「国际单位」(IU)来表示酶的活力,在合适条件下,每分钟内催化 1 微摩尔(μmol)底物转化为产物或转化底物中 1 微摩尔的有关基团所需的酶量。即 1 IU=1 U=1 μmol/min。IU 与 μg之间的换算,要引入比活性的概念。比活性是指单位质量蛋白的生物学活性单位,通常用 U/μg 或 μmol/min/μg 表示。以酶为例,在合适条件下,如果 1 μg 酶可以在 1 分钟内催化 1μmol 的底物,那么其比活性就是 1U/μg。比活性是重组蛋白的一项重要指标。进行比活性项目的检测,不仅可以反映产品生产工艺的稳定情况,而且可以比较不同表达体系、不同生产厂家生产同一产品的品质情况。比活性高说明产品的生产工艺更先进、纯度更高、质量更优。ProSpecIL-6重组蛋白怎么样R&D Systems是全球重组蛋白生产的前列。

功能性ELISA是一类以ELISA形式进行的、基于体外配体结合的分析法。该方法用于检测目的蛋白与其天然结合物配体之间(如生长因子与其受体)的结合能力。如果在该检测中生长因子能够与其天然受体相结合,则该生长因子很可能是具有功能的。ED50为OD值读取过程中能够提供50%信号强度的生长因子浓度(在包被了受体的平板上)。重组蛋白使用了基于细胞的检测分析或功能性ELISA分析对其生物学活性进行了检测,产品页上会提供相应的ED50值。也有些重组蛋白没有提供生物活性数据。在大多数情况下,这表明没有进行生物活性测试,但它并不一定意味着蛋白是没有活性的。在没有生物活性数据的情况下,这些蛋白可用做蛋白质分子量标准,蛋白免疫印记阳性对照(如果是全长的重组蛋白)或免疫原。其它可能的用途是配体结合试验或ELISA的标准品。

近年来,用于重组蛋白表达和纯化的技术和产品迅速增长。自从亲和标签融合技术出现以来,多种多样的短肽或蛋白亲和标签极大地方便了外源表达重组蛋白的分离与蛋白质复合体的纯化,已成为蛋白质研究领域不可或缺的工具。多聚组氨酸标签(His-tag)是目前高通量蛋白纯化普遍使用的亲和标签,His 标签融合蛋白的固定化金属离子亲和层析(immobilized metal-ion affinity chromatography, IMAC)被作为主要的蛋白纯化方法。从重组蛋白的表达优化,到小量诱导纯化,再到中试、大规模生产需要众多繁琐、大量的工作。快速、可靠、高效的自动化分离分析技术可极大地提高效率,降低时间、人员成本。进口重组蛋白质量好,能保证实验结果。

蛋白质生物学不仅包含研究内容,也包含了研究所需的工具。即基于蛋白质结构及功能的研究,和利用抗体、蛋白及多肽等作为纯化、检测和分析生物系统的工具。有些蛋白分析方法(如western blotting和ELISA等)已作为实验室的常规实验方法使用了多年。其它方法如定量蛋白质谱的实验方法则是相对较新的实验技术,并且正在快速发展中。针对重组蛋白纯化,赛默飞提供种类丰富的标签选择,包括6xHis, GST, DYKDDDDK (FLAG), c-myc, 和 HA。还提供一系列磁珠和树脂等纯化产品,磁珠、磁性琼脂糖、散装树脂、离心柱或试剂盒,FPLC层析柱,96孔过滤板等,用于从大肠杆菌、酵母、昆虫或哺乳动物表达系统中纯化从微克(μg)到低千克(kg)级重组蛋白。可满足大多实验的需求,包括高通量筛选、批量处理、中试和工艺纯化等。重组蛋白是生物医药行业研发及生产中的关键生物试剂。进口重组蛋白定制

重组蛋白到货后,如何操作?人BDNF重组蛋白

蛋白的溶解性与很多因素有关,其中比较重要的是pH值和离子强度。购买的重组蛋白按照说明上所标明的溶解液来溶解。如果您所用的溶解液的pH值和离子强度与说明书中所标明的不符,很多时候会造成细胞因子或重组蛋白不能完全溶解或者根本无法溶解,这样所配得的细胞因子或重组蛋白必然活性不够或丧失。重组蛋白溶解时一定要溶解到指定的浓度,高于或低于该浓度范围,都可能会导致重组蛋白不稳定,出现活性下降的现象。另外,重组蛋白在溶解时,一定不能用涡旋仪进行快速振荡,以免出现蛋白链断裂。重组蛋白的冻干粉是非常容易溶解的,一般用移液器的吸头轻轻吹几下,即可使细胞因子或重组蛋白完全溶解。人BDNF重组蛋白

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