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GMP级BMP-1重组蛋白

来源: 发布时间:2022年08月01日

重组蛋白具有极高的经济价值和科研价值,但是在哺乳动物细胞中使用稳定转染方法将会消耗大量的时间,而传统的瞬时转染方法,在产量上也难以令人满意。所以重组蛋白大规模的瞬时表达技术是近年来的一个研究热点,已有报道能放大到 100L反应器中生产重组蛋白,产量(分泌型蛋白)可达 1-10mg/L。不过该方法技术条件要求高,如质粒的纯度、转染的效率等。哺乳动物细胞表达系统中,重组蛋白的表达水平与许多 因素相关,如转录和翻译调控元件、RNA剪接过程、mRNA稳 定性、基因在染色体上的整合位点、重组蛋白对细胞的毒性作 用以及宿主细胞的遗传特性等。重组蛋白包括各类受体、细胞因子、生长因子、转录因子、激素、酶、毒性蛋白、病毒抗原等。GMP级BMP-1重组蛋白

在昆虫细胞表达系统中,昆虫细胞需要杆状病毒作为重组蛋白表达的中间体。杆状病毒是一组不同的DNA病毒,能够侵染各种昆虫细胞。它们就像一个穿梭机,将目标基因导入给定的宿主细胞。加州亲笔多核多角体病毒(AcMNPV) 在利用杆状病毒这方面表现出突出的特征。简单地说,将编码感兴趣蛋白质的基因插入一个主要载体,然后将其克隆到一个名为Bacmid的次要载体上。Bacmid被转移到一株细菌(通常是大肠杆菌)中进行初步病毒生产和组装,以获得一代杆状病毒(P1)。P1病毒在昆虫细胞中被扩增(例如sf9)以获得合适的滴度(P2),然后P2病毒被用于侵染相同或不同的昆虫细胞系(例如High-five)以实现重组蛋白表达。无动物源性TNF-alpha重组蛋白重组蛋白,可用于细胞生长和分化、细胞信号转导以及涉及疾病发作和进展的研究。

在生物学研究和蛋白质功能研究中,常用的方法之一是重组融合蛋白,简称融合蛋白。重组融合蛋白是由两个或两个以上原为不同蛋白质编码的基因组合而成的。由融合基因翻译而来的包含单个或多个多肽的重组融合蛋白获得了来自每个原蛋白的功能特性。融合蛋白有三个重要的用途:帮助纯化克隆基因,报告表达水平,作为组织化学标签,使蛋白质在细胞、组织或有机体中的位置可视化。在重组蛋白纯化中,重组融合蛋白法通常用于亲和层析,在亲和层析中,将易于纯化的蛋白与研究人员希望研究的蛋白相连接。许多蛋白质和多肽已被用作融合标签,包括谷胱甘肽- s -转移酶(gst标签)、麦芽糖结合蛋白(mbp标签)、多组氨酸(his标签)、人类生长因子、泛素和抗体表位。此外,β-半乳糖苷酶、荧光素酶和绿色荧光蛋白(GFP)通常作为部分蛋白表达和定位的报告因子。

哺乳动物蛋白表达系统在生产重组蛋白中的应用中,优势明显。具体表现为以下方面,能实现翻译后修饰及正确的蛋白折叠复性:哺乳动物为真核细胞,细胞器可以对蛋白正确折叠加工。表达水平高:载体可在哺乳动物细胞中高表达重组蛋白,表达量可高达1-3g/L。蛋白表达高效稳定:高效启动子控制,稳定表达,并可以选择多种表达,如瞬时表达、稳定细胞株表达、营养缺陷型细胞株表达(DHFR/GS)、大规模悬浮细胞表达等。适合大规模蛋白表达:常用的哺乳动物表达宿主细胞(HEK293和CHO),使用悬浮细胞培养,可以在一个月内可产生数克级蛋白。普欣生物是国内外多家著名生物试剂公司和临床诊断公司的重组蛋白OEM供应商。

重组蛋白的许多生产厂家都是不限制产品使用期限的,不规定重组蛋白和抗体产品的失效期或生产日期。在适当的存储条件下,重组蛋白和抗体可以保持活性稳定多年。这些条件包括以冻干粉形式存储蛋白,以大于 0.1 mg/mL 的蛋白浓度存储冷冻的产品(-20 °C 或 -80 °C)以及限制冻融循环的次数。但是,厂家常规质量控制测试可确保所有产品在销售时都具有可接受的生物活性。在实验室的正常条件下使用时,我们保证产品达到或超过我们提供的技术参数。由于无法控制终端用户的存储条件,通常,保质期为自购买之日起 6-12 个月。若有特殊要求,请参见各产品说明书。如何长期保存重组蛋白?大鼠BMP-6重组蛋白定制

严格的质量控制系统, 才能保证重组蛋白产品的生物活化与一致性。GMP级BMP-1重组蛋白

上海普欣生物技术有限公司是一家专业从事生物试剂研发、生产和销售的****,创立于2006年,总部位于中国上海。其产品和服务涵盖了分子生物学、蛋白化学、细胞生物学、免疫学等生命科学的诸多领域。普欣生物拥有基因克隆,蛋白表达,菌种发酵,蛋白纯化,蛋白冻干以及抗体制备等完整的技术平台,并拥有自己的GMP中试生产车间。开发和生产的重组蛋白细胞因子产品远销海外,已成为国内外多家生物试剂公司和临床诊断公司的OEM供应商。其众多重组蛋白产品被用于研究和临床前试验。2014年,普欣加入了Bio-Techne的大家族。GMP级BMP-1重组蛋白

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