很好的胎牛血清:免疫球蛋白,国产血清的只是定性检测,结果也很不准确,进口胎牛血清大多定量检测。免疫球蛋白的数值能完全体现出的时的牛龄情况,国产血清,基本都是新生牛的,血清中容易产生IgM,IgG的含量也偏高,进口胎牛血清,不含IgM,IgG的含量也较低。含量,此外,的使用也是要考虑在内的。国内外的血清,都不对进行测试(无四环素胎牛血消除外)。其中,由于国外使用较为严格,用量有限,同时每头奶牛的产品包括血清都可以追溯源头,所以国外胎牛血清不含或者含量极低。但是国内由于使用普遍,血清中残留量很高,导致国产血清质量很差,不利于细胞培养。血清的主要作用是提供基本营养物质、提供和各种生长因子、提供结合蛋白。金华优级胎牛血清厂家
很好的胎牛血清:好的血清应是透明清亮,土黄色或棕黄色,无沉淀或极少沉淀,比较粘稠。如发现血清浑浊,不透明,含许多沉淀物,说明血清污染或血清中的蛋白质变性;若棕红色,说明血清中的血红蛋白含量太高,有溶血现象。胎牛血清一般范围是30-40mg/ml,数值偏高,说明的牛龄偏大,不是胎牛;数值偏低,表明血清可能掺水了。标准为不高于20mg/dl,颜色越红,数值越高;反之,数值越低。国产血清,大多高于ph7.5,进口胎牛血清,大多低于ph7.5,具体原因未知,可能和牛龄有关,这也能用来初步鉴别血清的来源。金华优级胎牛血清厂家请勿将血清置于37℃太久。若在37℃放置太久,血清会变得混浊。
除了对血清进行检测,有何更直观的方式分辨血清质量?目测法,我们可根据血清的颜色,沉淀,澄清度等进行区分。颜色:颜色根据血清蛋白含量的不同,可表现出黄色或者红色。进口血清质量较为好的呈现出淡黄、微红色,较差质量呈现出橘红色或鲜红色。热灭清或保存不当的,由于血红蛋白的破坏氧化,会呈现出暗红色,甚至咖啡色。沉淀:血清中的沉淀主要是有纤维蛋白的凝聚产生。沉淀产生的原因很多,使用时反复冻融会增加沉淀。进口血清过滤分装前很少反复冻融,因此成品清澈。澄清度:进口血清是由于蛋白和脂类等物质含量低,表现为稀薄、清淡。国产血清绝大多数为新生牛血清,相对而言更加粘稠,颜色略深。
血清为何要热灭活,有必要对所有血清都灭活吗?如何正确的进行灭活?加热可以灭活补体系统。启动的补体系统参与溶解细胞事件,刺激平滑肌收缩,细胞和血小板释放组胺,启动淋巴细胞和巨噬细胞活化。在免疫学研究中,培养ES细胞、昆虫细胞和平滑肌细胞时,推荐使用热灭清。实验显示,热灭清对大多数的细胞而言是不需要的,对于非必须的细胞来说血清灭活对于细胞生长只有微小甚至无任何作用,还可能造成生长速率降低,沉淀物还会明显增多,不利于细胞观察。因此,若非必须,不需要对血清进行灭活处理。将需要进行处理的血清置于56℃水浴30min,建议加放空白对照(同体积水)使用温度计测温,以测得温度为56℃时为计时起始点,加热中可不时轻度旋转混匀血清。胎牛血清应取自剖腹产的胎牛。
购买回来的血清都是冰冻状态,使用时需要融化,融化过程在温度较低的状态下慢慢进行,待溶解完成,我们观察到的胎牛血清会表现出黄色或红色。并不是越红越好,也不是越黄越好,淡黄色到淡红色才是比较正常的颜色范围。很多培养细胞的宝宝会发现进口血清有沉淀,从而怀疑血清的质量问题。那么,血清中可能出现的沉淀物是什么?纤维蛋白,它是经常出现的较大的沉淀物,可以达到1-2mm,可以用肉眼观察到。磷酸钙,它也是常见的一种沉淀物,通常会使血清出现浑浊,并且在37℃培养的时候会增加。这种沉淀物在倒置显微镜下观察像小黑点,这些小黑点由于布朗运动看上去可以活动,因此经常被误认为是微生物污染。胆固醇、脂肪酸酯以及一些蛋白质,它们也是血清中出现沉淀物的常见原因。关于细胞生长,其实很多试验以及经验表明沉淀物不会影响细胞培养,当然血清生产商也是这样说的。含抗体的血清可作为预防或医治疾病之用。金华优级胎牛血清厂家
大量未参加凝血反应的物质则与血浆基本相同。金华优级胎牛血清厂家
血清是由血浆去除纤维蛋白而形成的一种很复杂的混合物,其组成成份虽大部分已知,但还有一部分尚不清楚,且血清组成及含量常随供血动物的性别、年龄、生理条件和营养条件不同而异。血清中含有各种血浆蛋白、多肽、脂肪、碳水化合物、生长因子、、无机物等,这些物质对促进细胞生长或抑制生长活性是达到生理平衡的。胎牛血清的细菌内有毒的 ≤5(EU/ml);牛腹泻病毒:阴性;大肠杆菌噬菌体:阴性;支持细胞增殖(Sp2/0-Ag14) 生长曲线(接种浓度)较为大增殖浓度≥2.5×106 个/ml;细胞倍增时间 ≤15h;克隆率 ≥85%。金华优级胎牛血清厂家