胎牛血清的生产工艺:透析胎牛血清,顾名思义,需经过透析。它是在4°C下用特定的透析膜对血清在0.15MNaCl中透析。由于该透析膜只允许10kDa以下的小分子穿过,在渗透压的作用下,这些小分子便从血清中渗析到透析膜外的NaCl溶液中。10kDa以下的小分子有化学小分子、核苷酸、某些盐、低分子量蛋白质、氨基酸、细胞因子、葡萄糖、残留Antibiotic和其他外源分子。那么透析的效果如何?以及透析到何时呢?由于不可能监测全部小分子,因此常选用葡萄糖为体现。血清中葡萄糖<5mg/dL,即可以停止透析了。透析过程中,除监测葡萄糖浓度外(可采用葡萄糖氧化酶方法测定),还需仔细监测pH值和渗透压。因为胎牛还未接触外界,血清中所含的抗体、补体等对细胞有害的成分较少。湖州去外泌体胎牛血清供应商
胎牛血清:胎牛血清初次解冻后,应按单次习惯用量分装,分装后的血清仍-20°C冻存。若置于4°C的血清,应在一周内用完。为保证细胞培养的较佳效果,血清和培养基的配置,应遵循“现用现配”原则。配好的培养液,应于一周内用完。血清避免反复冻融,避免在4°C或更高温度储存过久,否则会破坏血清中有效活性成分,影响血清品质。胎牛血清是由胎牛血浆去除纤维蛋白而形成的一种很复杂的混合物,含有各种血浆蛋白、多肽、脂肪、碳水化合物、生长因子、无机物等,其组成成份大部分已知,但还有一部分尚不清楚,这些物质对促进细胞生长或抑制生长活性是达到生理平衡的。其中不含细胞、纤维蛋白和凝血因子。深圳优等血清品牌胎牛血清适合脉冲示踪实验(同位素标记研究细胞代谢)适合转染CHO后的筛选。
胎牛血清:胎牛血清(FBS),胎牛血清是一种性状、外观浅黄色澄清、无溶血、无异物稍粘稠液体。胎牛血清应取自剖腹产的胎牛;新牛血清取自出生24小时之内的新生牛;小牛血清取自出生10-30天的小牛。1、性状、外观浅黄色澄清、无溶血、无异物稍粘稠液体。2、蛋白质含量3.5%~5.0%(w/v)。3、血红蛋白含量≤0.02%(w/v)。4、无菌检验阴性。5、支原体检验阴性。6、细菌内的毒性≤5(EU/ml)。7、牛腹泻病毒阴性。8、大肠杆菌噬菌体阴性。9、支持细胞增殖(Sp2/0-Ag14)生长曲线(接种浓度)较大增殖浓度≥2.5×106个/ml,细胞倍增时间≤15h克隆率≥85%。
用于体外细胞培养的胎牛血清及其制备方法:将已存放血浆的试管置入-20~0℃环境下保存备用;将血浆分离提取胎牛血清,具体步骤如下:取6-12g氯化钠、0.1-0.5g磷酸二氢钾和1.4-2.4g磷酸二氢钾放入容器中,向其中加入300-700mL去离子水,搅拌均匀,使用质量分数为10-20%的盐酸溶液调节pH为7.0-7.3,将上述所收集的血浆倒入容器中,搅拌均匀,温度设定为25-38℃,静置8-20min,得混合液C;22)将上述的混合液C放入离心机中离心分离8-20min,转速设定为3000-10000r/min,取上清液。胎牛血清应用在哺乳动物细胞培养中。
胎牛血清要求:1、性状、外观:浅黄色澄清、无溶血、无异物稍粘稠液体。2、蛋白质含量:3.5%~5.0%(w/v)。3、血红蛋白含量:≤0.02%(w/v)。4、无菌检验:阴性。5、支原体检验:阴性。6、细菌内的毒性:≤5(EU/ml)。7、牛腹泻病毒:阴性。8、大肠杆菌噬菌体:阴性。9、支持细胞增殖:(Sp2/0-Ag14)生长曲线(接种浓度)较大增殖浓度≥2.5×106个/ml,细胞倍增时间:≤15h,克隆率:≥85%。血清是由血浆去除纤维蛋白而形成的一种很复杂的混合物,其组成成份虽大部分已知,但还有一部分尚不清楚,且血清组成及含量常随供血动物的性别、年龄、生理条件和营养条件不同而异。血清中含有各种血浆蛋白、多肽、脂肪、碳水化合物、生长因子、无机物等。透析胎牛血清主要用于可能需要关注小分子浓度的特殊研究。厦门标准血清哪里有
胎牛血清保存条件是在-20°C冻存。湖州去外泌体胎牛血清供应商
选购胎牛血清:为了保证胎牛血清产品的均一性和稳定性,胎牛血清生产需遵循相关规定进行操作。一般来说,胎牛血清制备需经过以下几个步骤:采集,离心,分离,无菌过滤,用来制作血清的牛血,是通过采集多头牛的血液混合而成的,因此,想要在同一批次得到大批量品质稳定的血清,获得大量健康、符合当地法律法规的供体动物,是先决条件。采集(5-8月龄牛胚胎)、离心以及粗血清分离的过程,不能保证完全的无菌,因此,整个过程中,无菌过滤就成为重中之重。严格的无菌过滤,能够尽可能祛除细菌、支原体等微生物的污染,保证胎牛血清品质。湖州去外泌体胎牛血清供应商
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