胎牛血清:解冻胎牛血清时,请按照规定的的逐步解冻法(-20℃至4℃至室温),若胎牛血清解冻时改变的温度太大(如-20℃至37℃),实验显示非常容易产生沉淀物。解冻胎牛血清时,请随时将之摇晃均匀,使温度及成分均一,减少沉淀的发生。请勿将胎牛血清置于37℃太久。若在37℃放置太久,胎牛血清会变得混浊,同时胎牛血清中许多较不稳定的成分也会因此受到损害,而影响胎牛血清的质量。胎牛血清的热灭活非常容易造成沉淀物的增多,若非必要,可以无须做此步骤。若必须做胎牛血清的热灭活,请遵守56℃,30分钟的原则,并且随时摇晃均匀。我们常会看到胎牛血清的标注上有对产品灭活也有没有灭活的。南通OriCell血清报价
胎牛血清在细胞培养中的作用:1.提供对维持细胞指数生长的Hormone,基础培养基中没有或量很少的营养物,以及主要的低分子营养物。2.提供结合蛋白,能识别维生素、脂类、金属和其他Hormone等,能结合或调节它们所结合的物质活力。3.有些情况下结合蛋白质能与有毒金属和热原质结合,起到释放毒性作用。4.是细胞贴壁、铺展在塑料培养基质上所需因子来源。5.起酸碱度缓冲液作用。6.提供蛋白酶抑制剂,使在细胞传代时使剩余胰蛋白酶失活,保护细胞不受伤害。7.参与细胞冻存。在细胞培养中,胎牛血清加入基础培养基的浓度大多为5%~20%(常见为10%)的。具体到不同试验,应依据文献报导,或细胞类型或基础培养基的成分来确定较佳浓度。胎牛血清应在-20℃储存,运输应干冰冷链运输,避免反复冻融,确保血清中因子活性不受影响,保证血清优良品质。南通OriCell血清报价胎牛血清不推荐做热灭活,因为胎牛还未有发育完全的补体系统。
如何区别真假胎牛血清:外观,拿到血清,较先接触的是血清外观,对于缺少细胞培养经验的人来说,外观的判断尤为重要,颜色根据血红蛋白含量的不同,胎牛血清可表现出黄色或红色,我国的细胞培养用血清标准是不高于20mg/dl,实际上,血红蛋白含量的高低对血清并无直接影响,这个指标的意义在于能体现出采的血过程的严谨规范程度,良好的操作能降低血清的溶血。国产血清的点很分散,大多是由屠户采的血后马上离心收集,所以很少会有溶血,表现出明亮的蜡黄色,当然,国产血清也很少有标准意义上的胎牛血清。进口胎牛血清或多或少总有点溶血,因为真正的胎牛血清凝血功能差,红细胞容易破裂。总的来说,国产的血清呈现出蜡黄。进口的血清,质量较好的呈现出谈黄、微红色,差点的呈现出橘红色或鲜红色。当然,热灭活胎牛血清或保存不当的血清,由于血红蛋白的破坏氧化,会呈现出暗红,甚至咖啡色。
选购胎牛血清:为了保证胎牛血清产品的均一性和稳定性,胎牛血清生产需遵循相关规定进行操作。一般来说,胎牛血清制备需经过以下几个步骤:采集,离心,分离,无菌过滤,用来制作血清的牛血,是通过采集多头牛的血液混合而成的,因此,想要在同一批次得到大批量品质稳定的血清,获得大量健康、符合当地法律法规的供体动物,是先决条件。采集(5-8月龄牛胚胎)、离心以及粗血清分离的过程,不能保证完全的无菌,因此,整个过程中,无菌过滤就成为重中之重。严格的无菌过滤,能够尽可能祛除细菌、支原体等微生物的污染,保证胎牛血清品质。胎牛血清适合脉冲示踪实验(同位素标记研究细胞代谢)适合转染CHO后的筛选。
活性炭处理胎牛血清的应用:活性炭处理胎牛血清主要用于受体研究和雌Hormone相关的细胞研究实验。同时活性炭处理胎牛血清极大的降低了多种Hormone和生长因子,减少了影响细胞生化分析的干扰因子。性炭处理胎牛血清减少了血清中的类固醇类化合物,3x100nm无菌过滤内的毒性≤10EU/mL,血红素≤20mg/dL。胎牛血清是一种性状、外观浅黄色澄清、无溶血、无异物稍粘稠液体。胎牛血清应取自剖腹产的胎牛;新牛血清取自出生24小时之内的新生牛;小牛血清取自出生10-30天的小牛。显然,胎牛血清是品质较高的,因为胎牛还未接触外界,血清中所含的抗体、补体等对细胞有害的成分较少。胎牛血清应用在哺乳动物细胞培养中。广州标准级胎牛血清供应商
胎牛血清起到为细胞提供营养、支持、保护的作用。南通OriCell血清报价
胎牛血清对细胞贴壁中的作用:在细胞培养时,大部分来自实体组织感官的细胞会贴壁。它们在机体内时,也是与其他细胞或者细胞外基质结合的,贴壁对维持细胞的良好形态和促进细胞的增殖有益处。有人培养许旺细胞,发现贴壁良好的细胞,其增殖率也较高。人的造血干细胞培养,更是需要有贴壁细胞构成“造血微环境”。有人发现这些贴壁细胞包括成纤维细胞,巨噬细胞,上皮样细胞,脂肪细胞,它们交错连接,构成网状支架结构。培养基中加入牛血清,对于粘附细胞的贴壁也很有帮助。牛血清中含有玻连蛋白、纤黏连蛋白,对细胞粘附都有促进作用。需注意,热灭活小牛血清会降低血清对细胞粘附的促进作用,尤其在细胞旋转培养时更为明显。南通OriCell血清报价
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