胎牛血清的生产工艺:透析胎牛血清,顾名思义,需经过透析。它是在4°C下用特定的透析膜对血清在0.15MNaCl中透析。由于该透析膜只允许10kDa以下的小分子穿过,在渗透压的作用下,这些小分子便从血清中渗析到透析膜外的NaCl溶液中。10kDa以下的小分子有化学小分子、核苷酸、某些盐、低分子量蛋白质、氨基酸、细胞因子、葡萄糖、残留Antibiotic和其他外源分子。那么透析的效果如何?以及透析到何时呢?由于不可能监测全部小分子,因此常选用葡萄糖为体现。血清中葡萄糖<5mg/dL,即可以停止透析了。透析过程中,除监测葡萄糖浓度外(可采用葡萄糖氧化酶方法测定),还需仔细监测pH值和渗透压。胎牛血清含有丰富的细胞生长必须的营养成份,常用于动物细胞的体外培养。上海优级胎牛血清哪里有
胎牛血清:胎牛血清用于细胞培养已经超过半个世纪了,20世纪50年代末TheodorePuck在细胞和组织培养中初次加入胎牛血清(FBS)来刺激细胞生长。后来人们发现,由于胎牛未进食过母乳,所以IgG的含量极低,不会阻碍细胞生长,而且胎牛血清中含有丰富的促进细胞生长的成分,如维生素、运输蛋白、微量元素、生长因子等,胎牛血清生产的一切环节均有严格的质量把控。出厂的血清无细菌、支原体和病毒等微生物的威胁,且内的毒性含量低,满足绝大多数细胞培养需求。镇江细胞培养用胎牛血清厂家倘若把胎牛血清存放在4℃冰箱,请不要超过一个月。
胎牛血清:解冻胎牛血清时,请按照规定的的逐步解冻法(-20℃至4℃至室温),若胎牛血清解冻时改变的温度太大(如-20℃至37℃),实验显示非常容易产生沉淀物。解冻胎牛血清时,请随时将之摇晃均匀,使温度及成分均一,减少沉淀的发生。请勿将胎牛血清置于37℃太久。若在37℃放置太久,胎牛血清会变得混浊,同时胎牛血清中许多较不稳定的成分也会因此受到损害,而影响胎牛血清的质量。胎牛血清的热灭活非常容易造成沉淀物的增多,若非必要,可以无须做此步骤。若必须做胎牛血清的热灭活,请遵守56℃,30分钟的原则,并且随时摇晃均匀。
胎牛血清的作用:胎牛血清提供对维持细胞指数生长的Hormone,胎牛血清基础培养基中没有或量很少的营养物,以及主要的低分子营养物。胎牛血清提供结合蛋白,能识别维生素、脂类、金属和其他Hormone等,胎牛血清能结合或调变它们所结合的物质活力。有些情况下结合蛋白质能与有毒金属和热原质结合,起到释放毒性作用。胎牛血清是细胞贴壁、铺展在塑料培养基质上所需因子来源。起酸碱度缓冲液作用。胎牛血清提供蛋白酶抑制剂,使在细胞传代时使剩余胰蛋白酶失活,保护细胞不受伤害。胎牛血清的细菌内有毒的 ≤5(EU/ml);牛腹泻病毒:阴性;大肠杆菌噬菌体:阴性。
胎牛血清的处理方法主要有以下几种:1.活性炭处理,活性炭可以与亲脂性分子结合,因此已用于从FBS中去除Hormone,例如雄雌二醇、孕酮、皮质醇、睾酮、三碘甲状腺原氨酸(T3)和甲状腺素(T4)。这些血清脂质Hormone倾向于干扰免疫测定系统和胰岛素测定方法。2.透析,透析可以从FBS中去除所有分子量小于10,000MW的分子。这包括极性和非极性分子。去除细胞因子、葡萄糖、氨基酸和许多其他物质。透析还可以去除FBS中的Antibiotic和其他外源性分子。胎牛血清起到为细胞提供营养、支持、保护的作用。台州优级血清
胎牛血清是品质高的,因为胎牛还未接触外界,血清中所含的抗体、补体等对细胞有害的成分较为少。上海优级胎牛血清哪里有
胎牛血清都有哪些重要的指标:一、内的毒性,内的毒性是革兰氏阴性菌的细胞壁外壁层上的特有成分。当细菌死亡自溶或粘附在其它细胞时,才表现其毒性。内的毒性直接参与细胞凋亡,血清中内的毒性含量越低,对细胞毒性越小,越利于细胞的生长和传代;内的毒性含量过高,会直接导致细胞提前老化。国际上规定,胎牛血清的级别,应以内的毒性水平的高低来确定,其中,特级胎牛血清的内的毒性应<10EU/ml。二、血红蛋白含量,胎牛血清的颜色会根据血红蛋白含量的不同表现出黄色、淡黄色、橘红色、微红色等。细胞培养用血清的标准是血红蛋白含量不高于20mg/dl,颜色越红,数值越高;反之,数值越低。实际上,血红蛋白含量的高低对血清并无直接影响。这个指标的意义在于能体现出采的血过程的严谨规范程度,良好的操作能降低血清的溶血。上海优级胎牛血清哪里有
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