胎牛血清制备:离心,将准备好的瓶放入离心套筒调好平衡后,对称放入离心机,按1800转/分钟离心50分钟后,放入4℃冷库备用。抽血清,取出4℃冷库离心好的瓶,注意轻抬轻放,以免将下层血块和血清混层。将经过高压灭菌装有两孔瓶塞的5000ml大瓶的抽气孔一端的管子接好空气滤器,再接到压缩机抽气口上。打开压缩机,用抽血清孔的管子轻轻抽取采的血瓶内的上清液,注意控制好抽管,避免抽到下层血块。将抽好的血清分装,即为粗制胎牛血清,放入-20℃冷库冷藏备用。血清的主要作用:提供基本营养物质:氨基酸、维生素、无机物、核酸衍生物等,是细胞生长必须的物质。舟山优级胎牛血清
胎牛血清:胎牛血清初次解冻后,应按单次习惯用量分装,分装后的血清仍-20°C冻存。若置于4°C的血清,应在一周内用完。为保证细胞培养的较佳效果,血清和培养基的配置,应遵循“现用现配”原则。配好的培养液,应于一周内用完。血清避免反复冻融,避免在4°C或更高温度储存过久,否则会破坏血清中有效活性成分,影响血清品质。胎牛血清是由胎牛血浆去除纤维蛋白而形成的一种很复杂的混合物,含有各种血浆蛋白、多肽、脂肪、碳水化合物、生长因子、无机物等,其组成成份大部分已知,但还有一部分尚不清楚,这些物质对促进细胞生长或抑制生长活性是达到生理平衡的。其中不含细胞、纤维蛋白和凝血因子。丽水标准血清哪家好胎牛血清的牛腹泻病毒:阴性;大肠杆菌噬菌体:阴性。
胎牛血清都有哪些重要的指标:一、内的毒性,内的毒性是革兰氏阴性菌的细胞壁外壁层上的特有成分。当细菌死亡自溶或粘附在其它细胞时,才表现其毒性。内的毒性直接参与细胞凋亡,血清中内的毒性含量越低,对细胞毒性越小,越利于细胞的生长和传代;内的毒性含量过高,会直接导致细胞提前老化。国际上规定,胎牛血清的级别,应以内的毒性水平的高低来确定,其中,特级胎牛血清的内的毒性应<10EU/ml。二、血红蛋白含量,胎牛血清的颜色会根据血红蛋白含量的不同表现出黄色、淡黄色、橘红色、微红色等。细胞培养用血清的标准是血红蛋白含量不高于20mg/dl,颜色越红,数值越高;反之,数值越低。实际上,血红蛋白含量的高低对血清并无直接影响。这个指标的意义在于能体现出采的血过程的严谨规范程度,良好的操作能降低血清的溶血。
胎牛血清是血液凝固后的液体部分,不含血细胞、纤维蛋白及凝集因子等,含有多种对细胞生长必需的营养因子及大分子物质。血清白蛋白是胎牛血清的主要成分。此外,重要的是,胎牛血清中含有大量对细胞生长必需的生长因子。胎牛血清也含有一些小分子物质,如氨基酸、糖类、脂类及Hormone类物质。胎牛血清应用在哺乳动物细胞培养中;因此,胎牛血清应用很普遍。比如,胎牛血清能够用在科研、工业生产、人或兽疫苗生产的质量控制及生物技术药物的质量控制领域。相对于新生动物血清或成体动物血清来说,胚胎期动物血清有什么优点?与其它类型血清相比,胚胎期动物血清含有更多的生长因子,及较少的gamma球蛋白含量。胎牛血清FBS一般需要冷冻保存。
胎牛血清制备:用止血钳夹住血管,切开1厘米左右的切口进行插管,插好管后打开血管的止血钳,让牛血顺采的血管流入另一个洁净房间内的瓶中。采的血瓶采的血前经干烤灭菌(180℃2小时)后,按无菌操作注入10毫升左右经高压灭菌的生理盐水后加塞封口,于采的血前半小时放入37℃恒温箱备用。采的血前先晃动瓶内生理盐水,使其充分湿润瓶壁后倒出,再进行采的血并加塞封口。将采的血后的瓶放37℃恒温室2小时,再放入4℃冷库4小时以备离心。胎牛血清中的物质对促进细胞生长或抑制生长活性是达到生理平衡的。十堰无外泌体血清厂家
胎牛血清非常适合各种细胞的培养。舟山优级胎牛血清
胎牛血清融化方法:只要2.5个小时,温和有效地加快了水融化的速度,另一方面,融化过程中可以间断轻轻摇摆瓶子,让蛋白在瓶中混匀。此方法不但节约了时间,而且较大限度减少了血清沉淀出现的几率。血清融化过程中,蛋白质会比水先融化。冰块底部亮亮的细丝就是融化中的蛋白,血清在培养细胞中,比较重要的是利用它的活性的因子,因此,融化过程中较大限度地保留因子的活性,就变得非常重要。回忆一下,细胞复苏时,要保持细胞的活性,我们是要遵循“快融”原则还是“慢融”原则呢?快融!血清同样如此!三步法需要两个半小时,4℃过夜需要大约10个小时(冰箱一般设2-8℃,所以各实验室融化时间会稍有出入)。舟山优级胎牛血清
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