胎牛血清对细胞贴壁中的作用:在细胞培养时,大部分来自实体组织感官的细胞会贴壁。它们在机体内时,也是与其他细胞或者细胞外基质结合的,贴壁对维持细胞的良好形态和促进细胞的增殖有益处。有人培养许旺细胞,发现贴壁良好的细胞,其增殖率也较高。人的造血干细胞培养,更是需要有贴壁细胞构成“造血微环境”。有人发现这些贴壁细胞包括成纤维细胞,巨噬细胞,上皮样细胞,脂肪细胞,它们交错连接,构成网状支架结构。培养基中加入牛血清,对于粘附细胞的贴壁也很有帮助。牛血清中含有玻连蛋白、纤黏连蛋白,对细胞粘附都有促进作用。需注意,热灭活小牛血清会降低血清对细胞粘附的促进作用,尤其在细胞旋转培养时更为明显。胎牛血清是品质高的,因为胎牛还未接触外界,血清中所含的抗体、补体等对细胞有害的成分较为少。广州标准血清多少钱
胎牛血清应该如何保存,可以存放多久?胎牛血清可长期储存于-20℃冰箱中。倘若把胎牛血清存放在4℃冰箱,请不要超过一个月。如果一次性无法用完一瓶血清,建议将胎牛血清无菌条件下分装并储存于-20℃,避免反复冻融。如何正确地解冻胎牛血清?采用逐步解冻法,将胎牛血清从-20℃冰箱转入4℃冰箱融解,随后分装。切忌直接将胎牛血清从-20℃冰箱转移至室温解冻,这样很容易因为温度变化太大导致胎牛血清中的蛋白质凝集从而出现沉淀。武汉细胞培养用血清品牌血清的主要作用是提供促接触和生长因子使细胞贴壁免受机械损伤、对培养中的细胞起到某些保护作用。
如何区别真假胎牛血清:1、血红蛋白,标准为不高于20mg/dl,颜色越红,数值越高,反之,数值越低。2、pH,国产血清,大多高于7.5,进口胎牛血清,大多低于7.5,具体原因未知,可能和牛龄有关,这也能用来初步鉴别血清的来源。3、微生物。包括细菌、霉菌、支原体、噬菌体、各类病原性的病毒等。随着国内血清厂家生产条件的改善提高,细菌、霉菌等“大型”微生物几乎能100%控制,支原体经过0.1um过滤,大多也能清理。大肠杆菌噬菌体的污染还是比较严重的,主要是生产环境过程中带入,又无法过滤,很难彻底清理,但对血清质量影响不大。病原性的病毒,特别是BVDV,在国产血清中几乎90%以上都存在,这类微生物是影响国产血清质量的重要因素之一,而进口胎牛血清中基本都控制的很好。
胎牛血清的作用:胎牛血清提供对维持细胞指数生长的Hormone,胎牛血清基础培养基中没有或量很少的营养物,以及主要的低分子营养物。胎牛血清提供结合蛋白,能识别维生素、脂类、金属和其他Hormone等,胎牛血清能结合或调变它们所结合的物质活力。有些情况下结合蛋白质能与有毒金属和热原质结合,起到释放毒性作用。胎牛血清是细胞贴壁、铺展在塑料培养基质上所需因子来源。起酸碱度缓冲液作用。胎牛血清提供蛋白酶抑制剂,使在细胞传代时使剩余胰蛋白酶失活,保护细胞不受伤害。血清可提供结合蛋白:结合蛋白作用是携带重要的低分子量物质。
胎牛血清都有哪些重要的指标:一、内的毒性,内的毒性是革兰氏阴性菌的细胞壁外壁层上的特有成分。当细菌死亡自溶或粘附在其它细胞时,才表现其毒性。内的毒性直接参与细胞凋亡,血清中内的毒性含量越低,对细胞毒性越小,越利于细胞的生长和传代;内的毒性含量过高,会直接导致细胞提前老化。国际上规定,胎牛血清的级别,应以内的毒性水平的高低来确定,其中,特级胎牛血清的内的毒性应<10EU/ml。二、血红蛋白含量,胎牛血清的颜色会根据血红蛋白含量的不同表现出黄色、淡黄色、橘红色、微红色等。细胞培养用血清的标准是血红蛋白含量不高于20mg/dl,颜色越红,数值越高;反之,数值越低。实际上,血红蛋白含量的高低对血清并无直接影响。这个指标的意义在于能体现出采的血过程的严谨规范程度,良好的操作能降低血清的溶血。血清在溶解过程中必须规则地摇晃均匀。珠海去外泌体血清报价
热灭活反而影响胎牛血清中的活性成分。广州标准血清多少钱
如何区别真假胎牛血清:主要技术指标,1、内的毒性,标准为不高于5EU/ml。内的毒性是细菌破碎后细胞壁的成分,因此内的毒性含量的高低可表现出采的血到生产一系列过程中的无菌操作情况。目前,国产血清基本都能达到这一要求,很多进口胎牛血清内的毒性含量反而更高,只要求不高于50EU/ml,高出我国标准10倍。可见,内的毒性含量偏高不影响质量,除非含量极高,预示着已经污染。2、总蛋白含量,胎牛血清一般范围是30-40mg/ml,数值偏高,说明牛龄偏大,不是胎牛,数值偏低,表明血清可能掺水了。广州标准血清多少钱
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