胎牛血清的主要成分有哪些?脂联素,有人发现,将牛脂联素注射入C57小鼠,可降低循环血糖水平和在高脂饮食后提高脂肪清理率。持续注射牛脂联素两周后,胰岛素敏感性和葡萄糖耐受性明显增强,高脂喂养小鼠肝脏脂质堆积减少。这些结果提供了直接的证据表明内源性牛脂联素是一种调节脂肪和葡萄糖代谢的生理Hormone。以上可以看到,胎牛血清提供的一些活性因子参与营养的运输、促进营养分子向细胞的转运和利用,调节细胞的代谢和生理状态。可见胎牛血清在细胞环境中发挥着积极的作用,这是人工合成的基础培养基所比拟不了的。细胞培养胎牛血清是不可或缺重要培养基。无锡优级血清供应商
胎牛血清对细胞贴壁中的作用:在细胞培养时,大部分来自实体组织感官的细胞会贴壁。它们在机体内时,也是与其他细胞或者细胞外基质结合的,贴壁对维持细胞的良好形态和促进细胞的增殖有益处。有人培养许旺细胞,发现贴壁良好的细胞,其增殖率也较高。人的造血干细胞培养,更是需要有贴壁细胞构成“造血微环境”。有人发现这些贴壁细胞包括成纤维细胞,巨噬细胞,上皮样细胞,脂肪细胞,它们交错连接,构成网状支架结构。培养基中加入牛血清,对于粘附细胞的贴壁也很有帮助。牛血清中含有玻连蛋白、纤黏连蛋白,对细胞粘附都有促进作用。需注意,热灭活小牛血清会降低血清对细胞粘附的促进作用,尤其在细胞旋转培养时更为明显。舟山OriCell血清哪家好反复冻融会破坏胎牛血清中有效成分,影响血清品质。
胎牛血清在细胞培养中的作用:1.提供对维持细胞指数生长的Hormone,基础培养基中没有或量很少的营养物,以及主要的低分子营养物。2.提供结合蛋白,能识别维生素、脂类、金属和其他Hormone等,能结合或调节它们所结合的物质活力。3.有些情况下结合蛋白质能与有毒金属和热原质结合,起到释放毒性作用。4.是细胞贴壁、铺展在塑料培养基质上所需因子来源。5.起酸碱度缓冲液作用。6.提供蛋白酶抑制剂,使在细胞传代时使剩余胰蛋白酶失活,保护细胞不受伤害。7.参与细胞冻存。在细胞培养中,胎牛血清加入基础培养基的浓度大多为5%~20%(常见为10%)的。具体到不同试验,应依据文献报导,或细胞类型或基础培养基的成分来确定较佳浓度。胎牛血清应在-20℃储存,运输应干冰冷链运输,避免反复冻融,确保血清中因子活性不受影响,保证血清优良品质。
胎牛血清:胎牛血清(FBS),胎牛血清是一种性状、外观浅黄色澄清、无溶血、无异物稍粘稠液体。胎牛血清应取自剖腹产的胎牛;新牛血清取自出生24小时之内的新生牛;小牛血清取自出生10-30天的小牛。1、性状、外观浅黄色澄清、无溶血、无异物稍粘稠液体。2、蛋白质含量3.5%~5.0%(w/v)。3、血红蛋白含量≤0.02%(w/v)。4、无菌检验阴性。5、支原体检验阴性。6、细菌内的毒性≤5(EU/ml)。7、牛腹泻病毒阴性。8、大肠杆菌噬菌体阴性。9、支持细胞增殖(Sp2/0-Ag14)生长曲线(接种浓度)较大增殖浓度≥2.5×106个/ml,细胞倍增时间≤15h克隆率≥85%。血清白蛋白是胎牛血清的主要成分。
胎牛血清融化方法:只要2.5个小时,温和有效地加快了水融化的速度,另一方面,融化过程中可以间断轻轻摇摆瓶子,让蛋白在瓶中混匀。此方法不但节约了时间,而且较大限度减少了血清沉淀出现的几率。血清融化过程中,蛋白质会比水先融化。冰块底部亮亮的细丝就是融化中的蛋白,血清在培养细胞中,比较重要的是利用它的活性的因子,因此,融化过程中较大限度地保留因子的活性,就变得非常重要。回忆一下,细胞复苏时,要保持细胞的活性,我们是要遵循“快融”原则还是“慢融”原则呢?快融!血清同样如此!三步法需要两个半小时,4℃过夜需要大约10个小时(冰箱一般设2-8℃,所以各实验室融化时间会稍有出入)。胎牛血清中的物质对促进细胞生长或抑制生长活性是达到生理平衡的。优等胎牛血清
血清的保存应该注意:热灭活是指56℃,30分钟加热已完全解冻的血清。无锡优级血清供应商
胎牛血清应该如何保存,可以存放多久?胎牛血清可长期储存于-20℃冰箱中。倘若把胎牛血清存放在4℃冰箱,请不要超过一个月。如果一次性无法用完一瓶血清,建议将胎牛血清无菌条件下分装并储存于-20℃,避免反复冻融。如何正确地解冻胎牛血清?采用逐步解冻法,将胎牛血清从-20℃冰箱转入4℃冰箱融解,随后分装。切忌直接将胎牛血清从-20℃冰箱转移至室温解冻,这样很容易因为温度变化太大导致胎牛血清中的蛋白质凝集从而出现沉淀。无锡优级血清供应商
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