胎牛血清在细胞培养中的作用:1.提供对维持细胞指数生长的Hormone,基础培养基中没有或量很少的营养物,以及主要的低分子营养物。2.提供结合蛋白,能识别维生素、脂类、金属和其他Hormone等,能结合或调节它们所结合的物质活力。3.有些情况下结合蛋白质能与有毒金属和热原质结合,起到释放毒性作用。4.是细胞贴壁、铺展在塑料培养基质上所需因子来源。5.起酸碱度缓冲液作用。6.提供蛋白酶抑制剂,使在细胞传代时使剩余胰蛋白酶失活,保护细胞不受伤害。7.参与细胞冻存。在细胞培养中,胎牛血清加入基础培养基的浓度大多为5%~20%(常见为10%)的。具体到不同试验,应依据文献报导,或细胞类型或基础培养基的成分来确定较佳浓度。胎牛血清应在-20℃储存,运输应干冰冷链运输,避免反复冻融,确保血清中因子活性不受影响,保证血清优良品质。胎牛血清是由胎牛血浆去除纤维蛋白而形成的一种很复杂的混合物。韶关无外泌体胎牛血清
胎牛血清:解冻胎牛血清时,请按照规定的的逐步解冻法(-20℃至4℃至室温),若胎牛血清解冻时改变的温度太大(如-20℃至37℃),实验显示非常容易产生沉淀物。解冻胎牛血清时,请随时将之摇晃均匀,使温度及成分均一,减少沉淀的发生。请勿将胎牛血清置于37℃太久。若在37℃放置太久,胎牛血清会变得混浊,同时胎牛血清中许多较不稳定的成分也会因此受到损害,而影响胎牛血清的质量。胎牛血清的热灭活非常容易造成沉淀物的增多,若非必要,可以无须做此步骤。若必须做胎牛血清的热灭活,请遵守56℃,30分钟的原则,并且随时摇晃均匀。广州优等胎牛血清价格胎牛血清常用于动物细胞的体外培养,具有极为重要的功能。
用于体外细胞培养的胎牛血清及其制备方法:将已存放血浆的试管置入-20~0℃环境下保存备用;将血浆分离提取胎牛血清,具体步骤如下:取6-12g氯化钠、0.1-0.5g磷酸二氢钾和1.4-2.4g磷酸二氢钾放入容器中,向其中加入300-700mL去离子水,搅拌均匀,使用质量分数为10-20%的盐酸溶液调节pH为7.0-7.3,将上述所收集的血浆倒入容器中,搅拌均匀,温度设定为25-38℃,静置8-20min,得混合液C;22)将上述的混合液C放入离心机中离心分离8-20min,转速设定为3000-10000r/min,取上清液。
胎牛血清:胎牛血清参与细胞培养,是细胞生长天然的培养基,它为细胞提供生长因子、结合蛋白、脂质、矿物质、黏附和铺展因子等来促进体外细胞培养。透析胎牛血清主要用于可能需要关注小分子浓度的特殊研究。这主要包括四个领域:蛋白质组学、同位素标记、细胞通讯以及报告基因细胞系的筛选,其中有些领域是相互交叉的。以下稍作举例。将13C或15N标记的氨基酸掺入到培养基中培养细胞,来标记细胞内新合成的蛋白质,一般培养5-6代,细胞中的蛋白质将都被同位素标记。然后质谱分析,即可比较经过不同处理的细胞,其内部蛋白质丰度的变化。胎牛血清不推荐做热灭活,因为胎牛还未有发育完全的补体系统。
如果胎牛血清解冻后发现有絮状沉淀物出现,应该如何去除?胎牛血清中的沉淀物出现有很多种原因,但较普遍的原因是由于胎牛血清中脂蛋白的变性所造成,而血纤维蛋白在胎牛血清解冻后,也会存在于胎牛血清中,这也是造成沉淀物的主要原因之一。但少量絮状沉淀物,并不影响胎牛血清本身的质量。如果想要去除这些絮状沉淀物,可以采取离心法,400g,离心1~2分钟,将上清重新分装即可使用。胎牛血清中含有丰富的促进细胞生长的成分,如维生素、运输蛋白、微量元素、生长因子等。胎牛血清的细菌内有毒的 ≤5(EU/ml);牛腹泻病毒:阴性;大肠杆菌噬菌体:阴性。衢州细胞培养用血清厂家
含抗体的血清可作为预防或医治疾病之用。韶关无外泌体胎牛血清
如何区别真假胎牛血清:1、血红蛋白,标准为不高于20mg/dl,颜色越红,数值越高,反之,数值越低。2、pH,国产血清,大多高于7.5,进口胎牛血清,大多低于7.5,具体原因未知,可能和牛龄有关,这也能用来初步鉴别血清的来源。3、微生物。包括细菌、霉菌、支原体、噬菌体、各类病原性的病毒等。随着国内血清厂家生产条件的改善提高,细菌、霉菌等“大型”微生物几乎能100%控制,支原体经过0.1um过滤,大多也能清理。大肠杆菌噬菌体的污染还是比较严重的,主要是生产环境过程中带入,又无法过滤,很难彻底清理,但对血清质量影响不大。病原性的病毒,特别是BVDV,在国产血清中几乎90%以上都存在,这类微生物是影响国产血清质量的重要因素之一,而进口胎牛血清中基本都控制的很好。韶关无外泌体胎牛血清
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