细胞培养是很多下游实验的基础,细胞培养的好坏会直接影响后续实验的成功和稳定,而胎牛血清作为细胞培养的主要试剂对实验的重要性不言而喻!胎牛血清是细胞培养中常用的天然培养基,因为胎牛未进食过母乳,所以IgG含量低,且含有丰富的细胞生长必须的营养成份,故目前多数实验人员选择的都是胎牛血清进行动物细胞的体外培养,具有极为重要的功能。提供对维持细胞指数生长的,基础培养基中没有或量很少的营养物,以及主要的低分子营养物。提供结合蛋白,能识别维生素、脂类、金属和其他等,能结合或调变它们所结合的物质活力。有些情况下结合蛋白质能与有毒金属和热原质结合,起到医治作用。是细胞贴壁、铺展在塑料培养基质上所需因子来源。起酸碱度缓冲液作用。提供蛋白酶抑制剂,使在细胞传代时使剩余胰蛋白酶失活,保护细胞不受伤害。胎牛血清:性状、外观 浅黄色澄清、无溶血、无异物稍粘稠液体。珠海特级胎牛血清品牌
胎牛血清是细胞培养重要的培养基且不可替代,它是采自5-8个月胎龄牛胚胎中的胎血。此时胎牛各脏器正处生长分化阶段,血中含有丰富的生长发育因子,非常适合各种细胞的培养。因此,如何在使用过程中保护这些因子的活性,达到较为大的细胞培养效果,就需要正确地使用胎牛血清。正确地使用胎牛血清可分为以下四个方面:正确储存,避免反复冻融:血清在-20°C冻存。血清避免反复冻融,以免降低因子活性。如一次用不完,应进行分装。血清和培养基应尽可能“现用现配”,配好的培养液,应于一周内用完。血清避免在4°C或更高温度静置过久,否则会破坏血清中有效活性成分,影响血清品质。湖州优级血清哪家好为避免抗凝剂的干扰,血液中许多化学成分的分析,都以血清为样品。
血清的保存应该注意:热灭活是指56℃,30分钟加热已完全解冻的血清。加热过程中须规则摇晃均匀,此热处理的目的是使血清中的补体成分(complement)灭活,除非必须,一般不建议作此热处理,因为热处理会造成血清沉淀物明显增多,而且还会影响血清的质量,补体参与反应有:细胞毒作用,平滑肌细胞收缩,肥大细胞和血小板释放组胺,增强吞噬作用,促进淋巴细胞和巨噬细胞发生化学趋化和活化。一般厂商提供的血清为无菌,无需再过滤除菌,如发现血清有悬浮物,则可将血清加入培养液内一起过滤,切勿直接过滤血清。
胎牛血清是一种性状、外观 浅黄色澄清、无溶血、无异物稍粘稠液体。胎牛血清应取自剖腹产的胎牛;新牛血清取自出生24小时之内的新生牛;小牛血清取自出生10-30天的小牛。显然,胎牛血清是品质较为高的,因为胎牛还未接触外界,血清中所含的抗体、补体等对细胞有害的成分较为少。胎牛血清:性状、外观 浅黄色澄清、无溶血、无异物稍粘稠液体;蛋白质含量:3.5%~5.0%( w/v);血红蛋白含量 ≤ 0.02%( w/v);无菌检验:阴性;支原体检验: 阴性;细菌内有毒的 ≤5(EU/ml);牛腹泻病毒:阴性;大肠杆菌噬菌体:阴性。胎牛血清有些情况下结合蛋白质能与有毒金属和热原质结合,起到医治作用。
胎牛血清用于细胞培养不过百年历史,但发展得相当快,每年的需求量也不断上升。在胎牛血清和细胞培养技术的方面,国外起步较早,认识也较深入。应该说,胎牛血清在细胞培养基方面,具有的优势。因为其营养,所以几乎适合所有类型的细胞生长,每种细胞都可以从中摄取自己所需的养分。而且,胎牛血清还含有适合细胞贴壁铺展以及抗氧化和医治的成分,这使得它成为天然通用的很好培养基。据研究,胎牛血清中含有至少四百多种成分,而且这些成分的含量在不同批次的血清中存在波动,有时甚至波动较大。因此,在持续使用胎牛血清时,要注意尽量同一批次的。通常,同一批次的血清数量有限,一次大约不超过2000升。因此,在更换批次时,要注意观察细胞的生长和状态。血清是由血浆去除纤维蛋白而形成的一种很复杂的混合物。十堰标准血清厂家
经过热处理过的血清,沉淀物的形成会明显增多。珠海特级胎牛血清品牌
避免产生沉淀物:请勿将血清置于37℃太久。若在37℃放置太久,血清会变得混浊,同时血清中许多较不稳定的成分也会因此受到损害,而影响血清的质量。血清的热灭活非常容易造成沉淀物的增多,若非必要,可以无须做此步骤。若必须做血清的热灭活,请遵守56℃,30分钟的原则,并且随时摇晃均匀。温度过高,时间过久或摇晃不均匀,都会造成沉淀物的增多。若血清解冻后发现有絮状沉淀物出现,可以将血清分装至无菌离心管内,以400g稍微离心,上清液即可接着加入培养基内一起过滤。但不建议以过滤的方法去除这些絮状沉淀物,因为它可能会阻塞过滤膜。珠海特级胎牛血清品牌
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