山东口腔拭子口腔拭子批发

    本发明涉及一种快速提取血液和口腔拭子基因组DNA的方法。背景技术：近年来，随着荧光PCR技术的不断成熟。该技术在科研及检验领域得到了应用，成为分子生物学领域不可或缺的一项重要技术。在进行遗传背景分析过程中，血液、唾液和口腔拭子成为重要的生物分析样本。但是，由于血液、唾液和口腔拭子中存在有很多PCR反应物，例如血液中含有血红素，蛋白质，脂肪，抗凝剂等，唾液和口腔拭子含有蛋白质，脂肪，抗凝剂等，使得用血液、唾液和口腔拭子直接进行荧光PCR反应变得尤为困难。因此，现在临床上往往先要从血液、唾液和口腔拭子样本中纯化出DNA，才能进行样本的DNA扩增。提取血液、唾液和口腔拭子基因组的方法种类非常多，传统酚氯仿抽提法，高盐盐析法，模离心柱吸附法，磁珠法，等等。经典的血液核酸提取方法包括几个过程。1.通过低渗液涨破红细胞，将血红素物质释放出来，然后离心，清洗去除血红素。2.通过裂解液裂解白细胞，释放核酸物质。3.通过离心柱或纳米磁珠特异性吸附核酸物质，去除其他杂质。4.通过漂洗液洗掉挂在离心柱或纳米磁珠表面的化学试剂残留和蛋白残留。5.加入洗脱液将核酸从离心柱或纳米磁珠上洗脱下来。 这款口腔拭子是经过标准生产，封闭式独立包装，无菌、无酶、保证结果可靠。山东口腔拭子口腔拭子批发

    本发明涉及生物医药领域，涉及一种常温下长时间口腔拭子DNA保存和提取方法。背景技术：近年来，采用口腔拭子进行DNA检验有逐渐增多的趋势，由于国内没有专门用于采集口腔脱落细胞的工具，而只是使用普通的医用棉签，而不同的人采集口腔脱落细胞在擦拭次数、力度、检材剪取量及扩增用的模板量上都存在一定差异，导致了口腔拭子的DNA常温下保存效果不大稳定，影响了口腔拭子在DNA常温下保存中的应用。

为规范口腔拭子DNA的采集，提高口腔拭子的DNA保存效率，亟需一种常温下长时间口腔拭子DNA保存和提取方法。

山东口腔拭子口腔拭子批发这款口腔拭子拥有新颖的折点设计，让拭子轻松折断并进入管中，更加便于操作。

    本发明的特征在于：应用本发明的血液基因组DNA提取方法在10分钟内提取血液基因组可用于荧光PCR扩增检测，主要步骤如下。（1）将**管颠倒混匀后，吸取100μL血液或者吸取100μL口腔拭子样本保存液至，加入200μL的核酸释放剂，涡旋混匀，然后5000g离心30s，弃上清，获得细胞沉淀。（2）将步骤（1）中得到的血液细胞沉淀中再加入200μL核酸释放剂，涡旋振荡1min，至沉淀完全散开，然后5000g离心30s，弃上清。（口腔拭子样本则无需进行此步骤）。（3）向步骤（2）所获得的沉淀中加入50μL核酸释放剂，涡旋振荡1～2min；室温放置5min，12000g离心30s，取上清液即为提取的基因组DNA；所述的核酸释放剂组成为20mM～80mM的氢氧化钠溶液、～、～、～、～***钠、～3%甲酰胺；所述荧光PCR反应液组成为ROX、TaqMan探针、引物、dNTP、dUTP、UDG、BSA、聚合酶及缓冲液。附图说明图1为实例1检测的8份血液样本平行实验的荧光扩增曲线图。图2～图5为实施例1提供的四份血液样本的三次平行实验的荧光扩增曲线图。图6为实施例2对比实例1提供的对8份血液样本平行实验的荧光扩增曲线图。具体实施方式为了使本领域技术领域人员更好地理解本申请中的技术方案。

    产地：国产|进口品牌：深圳市华晨阳科技有限公司编号S008规格：100mL|250mL|500mL鼻腔/口腔拭子DNA保存液能提供一种简单、安全、方便、有效的口腔/鼻腔拭子DNA样品保存，在室温下（15～25℃）保存口腔（鼻腔）拭子DNA超过1年，DNA保持完整、不降解，为获得下游实验所需要的高质量DNA提供了可靠保障。

本产品具有以下特点：

1、操作使用简单、安全。

2、口腔（鼻腔）拭子DNA样品在保存液存放，可在室温下贮存超过1年，DNA没有降解，为运输和存储提供方便，并**减**冷成本。

3、获得的口腔鼻腔上皮细胞DNA质量好，产量高，可完成各种基因检测及分析实验。如：qPCR、SNP和sequencing分析。

4、能抑 制各种霉菌的生长，并能杀灭各种传染因子，特别是空气及呼吸道的传染细菌及***，可避免试验人员在处理样品时受到病人***细菌的传染。鼻腔/口腔拭子DNA保存液技术参数：*每100ML的唾液保存液大约可以保持200份口腔（鼻腔）拭子样品（根据所用拭子的大小可能有变化）。*在室温下（15°C–25°C）保存口腔上皮细胞完整的gDNA1年以上。*每个拭子可获得µg～µg的基因组DNA产量(样品不同，DNA产量有所不同）。*提纯的DNA：A260/A280值～。DNA长度≥23Kb。 这款口腔拭子主要用于提取采集人体口腔黏膜DNA用的，采集和释放都比较好。

    加入20μteinaseK溶液，混匀。加入200μL缓冲液GB，充分颠倒混匀，在56℃放置14min（期间颠倒混合样品数次），溶液应变清亮，若未完全变清亮，延长裂解时间至完全变清亮。加人200μL无水乙醇，充分振荡混匀10s，此时可能会出现絮状沉淀。将上一步所得溶液和絮状沉淀都加入一个吸附柱CB3中（吸附柱放入收集管中），12,000rpm离心30s，倒掉废液，将吸附柱CB3放回收集管中。向吸附柱中加入500μLGD（已加入无水乙醇），12,000rpm离心30s，弃废液，将吸附柱CB3放回收集管中。向吸附柱中加入600μLPW（已加入无水乙醇），12,000rpm离心30s，弃废液，将吸附柱CB3放回收集管中。12,000rpm（~13，400×g）离心2min。将吸附柱放置新的，以彻底晾干吸附柱中残余的漂洗液。向吸附柱中悬空滴加50～200μL洗脱缓冲液，室温放置2～5分钟，12,000rpm（~13，400×g）离心2min，将溶液收集到离心管中，测定浓度及纯度后，取3μL，加入到配制好的荧光PCR反应液，于ABI7500荧光PCR仪中进行扩增。用本发明和对照产品对8份样本同时进行荧光PCR扩增。结果如图6，本发明所有反应孔背景信号好、Ct值都在21～25之间，荧光扩增曲线呈典型的S型。口腔拭子（口腔脱落细胞）取样是简单、无痛、无创的DNA标本采集方法。辽宁口腔拭子口腔拭子批发

然后用同样的方法在右侧脸颊部/右侧上下牙床处粘膜处进行第二根拭子的取样。山东口腔拭子口腔拭子批发

    美国ITW-TEXWIPE系列棉签。马来西亚Riverstone丁腈乳胶手套手指套，马来西亚各种乳胶手套，丁腈无硫手指套，产品远销全球各地，北京，天津，上海，南京，苏州，杭州，昆山，陕西，西安，武汉，湖北，南昌，赣州，江西，太原，山西，济南，烟台，山东，石家庄，河北，内蒙古，呼和浩特，昆明，云南，哈尔滨，黑龙江，吉林，长春，沈阳，辽宁，大连，合肥，安徽，河南，郑州，海口，海南，玉林，北海，广西，广东，广州，深圳，东莞，惠州，佛山，中山，珠海，茂名，河源，肇庆，中国香港，中国澳门，中国台湾，美国，泰国，新加坡，越南，日本，韩国，中东，欧美等地区。随着IT行业的迅速发展，华晨阳加强与国际同行交流，充分发挥企业的桥梁作用,严格按照ISO9000管理体系进行规范运作，生产的产品通过国内外检测机构认证。本着以〝质量至上求实创新,质量服务。山东口腔拭子口腔拭子批发

深圳市华晨阳科技有限公司是一家有着先进的发展理念，先进的管理经验，在发展过程中不断完善自己，要求自己，不断创新，时刻准备着迎接更多挑战的活力公司，在广东省等地区的医药健康中汇聚了大量的人脉以及**，在业界也收获了很多良好的评价，这些都源自于自身的努力和大家共同进步的结果，这些评价对我们而言是比较好的前进动力，也促使我们在以后的道路上保持奋发图强、一往无前的进取创新精神，努力把公司发展战略推向一个新高度，在全体员工共同努力之下，全力拼搏将共同深圳市华晨阳科技供应和您一起携手走向更好的未来，创造更有价值的产品，我们将以更好的状态，更认真的态度，更饱满的精力去创造，去拼搏，去努力，让我们一起更好更快的成长！