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动物体内转染试剂对照

来源: 发布时间:2022年06月10日

用LipoFectMax™转染Hela细胞,左图转染GFP cDNA,右图共转染GFP CDNA和GFP靶向siRNA。转染siRNA后可以从右图明显看到基因沉默。

4适用于神经细胞的转染图4.  用LipoFectMax™ 和LipoFectamine®2000分别对小鼠神经元细胞进行转染绿色荧光白蛋白(GFP),转染24小时后观察转染效果,LipoFectMax™ 转染效率(左图)比LipoFectamine®2000(右图)高5倍。

LipoFectMax™ 转染试剂转染试剂操作流程

细胞毒性低图2.LipoFectMax™ ,LipoFectamine®2000及LipoFectamine®3000分别对A549细胞进行转染操作,通过计算转染后的细胞存活率比较细胞毒性。 RNAiMAX转染试剂是先进、高效的siRNA输送解决方案。动物体内转染试剂对照

在多种不同类型细胞中基因敲除效率超过90%。2.高灵活应用,同一试剂可用于siRNA和质粒共转染的基因沉默实验。3.细胞毒性低,结果相关性好,确保所观察到的细胞效应是由转染的siRNA而非转染过程本身介导。4.兼容含血清或不含血清的培养基,转染前后均无需换液(如无血清培养基)。图4.X-tremeGENEsiRNATransfectionReagent用于4种细胞系的HPRT基因沉默实验。根据各试剂说明书建议的操作流程,或标准实验方法,将100nMHPRT特异性siRNA转染至4种细胞。通过LightCycler®h-HPRTHousekeepingGeneSet的荧光定量法评估基因沉默效率。结果显示用罗氏这款试剂在四种细胞中转染后基因沉默表现均表现优异。动物体内转染试剂对照连续细胞系具有无限增殖的潜能,通常要比原代或有限细胞更易处理。

用LipoFectMax™转染Hela细胞,左图转染GFPcDNA,右图共转染GFPCDNA和GFP靶向siRNA。转染siRNA后可以从右图明显看到基因沉默。4适用于神经细胞的转染图4.用LipoFectMax™和LipoFectamine®2000分别对小鼠神经元细胞进行转染绿色荧光白蛋白(GFP),转染24小时后观察转染效果,LipoFectMax™转染效率(左图)比LipoFectamine®2000(右图)高5倍。LipoFectMax™转染试剂转染试剂操作流程细胞毒性低图2.LipoFectMax™,LipoFectamine®2000及LipoFectamine®3000分别对A549细胞进行转染操作,通过计算转染后的细胞存活率比较细胞毒性.

基于磷酸钙成分的转染试剂,其主要作用原理是与DNA通过沉淀反应形成磷酸钙-DNA复合物,粘附到细胞膜表面,借助内吞作用进入细胞质。pH值,钙离子浓度,DNA浓度,沉淀时间,细胞孵育时间乃至各组分加入顺序都可能对结果产生影响,因此实验条件摸索和优化时间较长,且重复性不佳。基于脂质体的转染试剂包括中性脂质体和阳离子脂质体两种。中性脂质体是利用脂质膜包裹DNA,借助脂质膜将DNA导入细胞膜内。目前应用比较***的是带正电的阳离子脂质体转染试剂,DNA并没有预先包埋在脂质体中,而是带负电的DNA自动结合到带正电的脂质体上,形成DNA-阳离子脂质体复合物,从而吸附到带负电的细胞膜表面,经过内吞被导入细胞。此方法操作简单,重复性好,在体外转染中有很高的效率,但具有一定的细胞毒性,可能会干扰细胞的代谢。且活性受血清影响,需要去除血清。采用Lipofectamine RNAiMAX转染试剂转染A549细胞时,实现了比较好的基因***效果和比较低的细胞毒性。

对CHO细胞转染效率的比较右图:使用以上转染试剂将编码荧光素酶蛋白的cDNA(phRL-CMV)和绿色荧光蛋白GFP的cDNA按照生产商的提供的转染步骤分别转染到CHO细胞。在转染24小时后,荧光素酶的活性使用Beckman公司的化学发光监测器测定;GFP阳性细胞率使用BD公司的FACS检测。左图:LipoD293试剂(升级版)和Lipofecatmine2000(L2K),TransIT以及Fugene6的价格比较(美元/1000微升)。所有的价格是从生产制造商的网站上收集对CHO细胞转染效率的比较右图:使用以上转染试剂将编码荧采用siRNA转染试剂可以将siRNA轻松导入细胞内。动物体内转染试剂对照

将20μL转染复合物加入孔中的细胞悬液中,前后移动培养皿,混合均匀;动物体内转染试剂对照

用于转染的Invivofectamine 3.0试剂及RNAi复合物非常容易获得:只需简单地混合,并进行孵育(30min)、稀释、及注射即可。

靶向敲低

在实验靶标中可观察到高达85%的敲低效果

使用Invivofectamine 3.0试剂可在单次静脉注射后即可在肝脏中实现靶向敲低。Invivofectamine 3.0试剂与靶向Factor VII (FVII)或PPIB mRNA的siRNA组成的复合物,以每千克小鼠体重1 mg(mg/kg)的注射量进行注射,**终靶向mRNA水平出现了高达85%的敲低(使用TaqMan分析对敲低进行评估)。 动物体内转染试剂对照

上海儒安生物科技有限公司拥有从事生物技术、物联网技术、网络技术领域内的技术开发、技术咨询、技术转让、技术服务,软件开发,电子商务(不得从事增值电信、金融业务),化工产品及原料(除危险化学品、监控化学品、民用物品、易制毒化学品)、实验窒设备的销售。等多项业务,主营业务涵盖细胞转染试剂,ecl发光液,cck8细胞增殖,内参抗体。目前我公司在职员工以90后为主,是一个有活力有能力有创新精神的团队。公司业务范围主要包括:细胞转染试剂,ecl发光液,cck8细胞增殖,内参抗体等。公司奉行顾客至上、质量为本的经营宗旨,深受客户好评。公司力求给客户提供全数良好服务,我们相信诚实正直、开拓进取地为公司发展做正确的事情,将为公司和个人带来共同的利益和进步。经过几年的发展,已成为细胞转染试剂,ecl发光液,cck8细胞增殖,内参抗体行业出名企业。