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上海非脂质体转染试剂

来源: 发布时间:2022年08月30日

简介:X-tremeGENEHPDNA转染试剂是一种高效的无动物源成分的低毒转染试剂,兼容含血清或不含血清的培养基,可用于转染各类真核细胞(包括昆虫细胞)以及多种难转染细胞系。优势:1.简单易用的多组分混合试剂,无动物源性成分,室温稳定。2.高转染效率,对于原代细胞和使用其它试剂难转染的**细胞系有高转染效率。3.使用细胞毒性低的试剂,结果相关性好。图2.X-tremeGENEHP高效低毒的转染性能。通过X-tremeGENEHP和脂质体转染方法将GFP表达质粒转染至CHO-K1。A和C图的荧光视野显示了实验后两种方法均获得了成功转染的细胞。但B和D图的明亮视野表明脂质体转染方法的细胞毒性远高于X-tremeGENEHP,导致存活细胞量减少(图片来源于网络)...我们希望把mRNA转染进入原代细胞,那**适合的转染产品就是Lipofectamine MessengerMAX™或是Neon电转仪。上海非脂质体转染试剂

基于阳离子聚合物的转染试剂,带正电的聚合物与核酸带负电的磷酸基团形成带正电的复合物后与细胞表面带负电的蛋白多糖相互作用,并通过内吞作用进入细胞。其又分为树枝状阳离子聚合物和线性阳离子聚合物两类,前者细胞毒性相对较大,后者细胞毒性较小,但其转染效率都高于脂质体转染,适用也较为广范。以上单一成分的转染试剂或聚焦于提高效率或着重于降低细胞毒性,可谓鱼和熊掌不可兼得也。新一代转染试剂,不局限于单一成分,混合了不同 配方的脂类(非脂质体)、加上蛋白质组分、以及各种的 成分,兼具了转染效率高和细胞毒性小的优势,且操作更加简单,易于高通量。上海动物细胞转染试剂推荐转染试剂--总有一款你想要的.

用于转染的Invivofectamine 3.0试剂及RNAi复合物非常容易获得:只需简单地混合,并进行孵育(30min)、稀释、及注射即可。

靶向敲低

在实验靶标中可观察到高达85%的敲低效果

使用Invivofectamine 3.0试剂可在单次静脉注射后即可在肝脏中实现靶向敲低。Invivofectamine 3.0试剂与靶向Factor VII (FVII)或PPIB mRNA的siRNA组成的复合物,以每千克小鼠体重1 mg(mg/kg)的注射量进行注射,**终靶向mRNA水平出现了高达85%的敲低(使用TaqMan分析对敲低进行评估)。

基于脂质体的转染试剂包括中性脂质体和阳离子脂质体两种。中性脂质体是利用脂质膜包裹DNA,借助脂质膜将DNA导入细胞膜内。目前应用比较***的是带正电的阳离子脂质体转染试剂,DNA并没有预先包埋在脂质体中,而是带负电的DNA自动结合到带正电的脂质体上,形成DNA-阳离子脂质体复合物,从而吸附到带负电的细胞膜表面,经过内吞被导入细胞。此方法操作简单,重复性好,在体外转染中有很高的效率,但具有一定的细胞毒性,可能会干扰细胞的代谢。且活性受血清影响,需要去除血清。采用siRNA转染试剂可以将siRNA轻松导入细胞内。

用 LipoD293™ 体外 DNA 转染试剂(Ver. II)(上图)和受欢迎的品牌产品 Invitrogen 公司的 293fectin™(下图)转染 pEGFP-C1 质粒到 HEK293 细胞中。转染 24 小时后,细胞的尼康 Eclipse 荧光显微镜 DIC 成像图(左侧)和荧光成像图(右侧)。

对悬浮 HEK293F 产生蛋白质效率的比较/

30 毫升的 293F 细胞分别使用 LipoD293™试剂、293fectin、Xfect 和 Fugene 6 等转染试剂按照生产商的标准转染步骤将 pEGFP-6xHis 质粒导入细胞表达,用量为 LipoD293™ 试剂,20 微克,所有其他三种转染试剂均使用 30 微克质粒 DNA。 一般会同时设置对照,对RNAi结果进行比较。RNAi的成功取决于正确导入合适量的siRNA,达到比较大预期反应。上海体内转染试剂

无论有无血清、***存在均可获得很高的转染效率。上海非脂质体转染试剂

.在多种不同类型细胞中基因敲除效率超过90%。

高灵活应用, 同一试剂可用于siRNA和质粒共转染的基因沉默实验。

细胞毒性低,结果相关性好,确保所观察到的细胞效应是由转染的siRNA而非转染过程本身介导。

兼容含血清或不含血清的培养基,转染前后均无需换液(如无血清培养基)。

X-tremeGENE siRNA Transfection Reagent用于4种细胞系的HPRT基因沉默实验。根据各试剂说明书建议的操作流程,或标准实验方法,将100nM HPRT特异性siRNA转染至4种细胞,通过LightCycler® h-HPRT Housekeeping Gene Set的荧光定量法评估基因沉默效率。结果显示用罗氏这款试剂在四种细胞中转染后基因沉默表现均表现优异。 上海非脂质体转染试剂

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