将胶质瘤干细胞（3105）接种至6孔板中，然后使用riboFECTCP转染试剂分别将5μl20μMBMPER、CXCL10和HOXA9siRNA转染进胶质瘤干细胞（DP3321、DP7857）中，48h后，qRT-PCR和westernblots检测siRNA***效率。结果发现DP3321中的siBMPER、siCXCL10和siHOXA9表达水平分别为46.32％、49.71％和43.64％，DP7857中的siBMPER、siCXCL10和siHOXA9表达水平分别为53.21％、47.46％和46.31％。将1.25μlTREM-1siRNA（20μm）和3μlriboFECTTMCPRegent在30μlriboFECTTMCPBuffer中混合以产生转染混合物。然后将混合物加入DMEM（siRNA浓度：50nM）中，与原代小胶质细胞培养48h。RT-PCR和westernblot分析检测转染效率。结果发现转染TREM-1siRNA后******了OGD诱导的TREM-1、p-SYK、SYK、CARD9、p-p65和NLRP3的上调。采用Lipofectamine RNAiMAX转染试剂转染A549细胞时，实现了比较好的基因***效果和比较低的细胞毒性。上海roche转染试剂供应商
在多种不同类型细胞中基因敲除效率超过90%。2.高灵活应用，同一试剂可用于siRNA和质粒共转染的基因沉默实验。3.细胞毒性低，结果相关性好，确保所观察到的细胞效应是由转染的siRNA而非转染过程本身介导。4.兼容含血清或不含血清的培养基，转染前后均无需换液(如无血清培养基)。图4.X-tremeGENEsiRNATransfectionReagent用于4种细胞系的HPRT基因沉默实验。根据各试剂说明书建议的操作流程，或标准实验方法，将100nMHPRT特异性siRNA转染至4种细胞。通过LightCycler®h-HPRTHousekeepingGeneSet的荧光定量法评估基因沉默效率。结果显示用罗氏这款试剂在四种细胞中转染后基因沉默表现均表现优异。上海神经细胞转染试剂梯度mRNA细胞&***转染试剂来助力.
转染产品知多少：转染试剂选择工具收录于话题转染是将核酸导入真核细胞中的过程，是细胞生物学、基因表达和基因***实验中的关键步骤。不同的实验方案和技术差别巨大，我们可以利用化学方法或脂质体将核酸(DNA或RNA)高效输送到细胞内，也可以使用电穿孔方法利用电流在细胞膜上开孔，使核酸进入细胞内。赛默飞提供了多种高质量的转染产品，适用于各种细胞类型的转染。如何选择**受信赖的可用于转染的系统，是实验结果的重要影响因素。
LNCap细胞的培养和传代严格由ATCC建议的操作步骤进行，与pBabe-hygro-SSeCKs（1.5ug）和pEGFP-N3（1:1，共1.0微克）共转染（6孔板中每孔的量），并用LipoD293™试剂（左图）和FugeneHD（右图）分别按照生产制造商的科学实验步骤进行转染。转染24小时后，用尼康Eclipse2000荧光显微镜检测GFP荧光，以此来评价转染效率。在血清和***的存在下，HepG2和SaoS-2细胞用pEGFP-N3和pSV-β-半乳糖苷酶DNAs分别转染达到95%的细胞融合。转染48小时后，分别通过Zeiss510激光共聚焦显微镜和β-半乳糖苷酶染色试剂盒检测效率。所见即所得——分享两款超好用的转染试剂,拯救你的细胞.
胞因素用低代数的细胞293T细胞非常重要！！当然也要保证细胞状态特别好，没有细微污染，铺板均匀。饱满状态好的细胞才可以产生较高滴度的***哦！载体系统在实验中**常见的慢***载体系统有三质粒系统、四质粒系统，当然使用三质粒系统的小伙伴居多，一定要选择成熟商业化的载体系统！载体构建和质粒抽提纯化我们要注意是否构建时导致质粒载体重组或某个部件缺失，或污染别的质粒、杂物?中抽纯化是否污染?要养成同时做阴性对照的习惯：建议目的基因载体和阴性对照GFP载体是同一批，且建议每次包装都如此操作，要保证目的基因的表达载体构建纯化良好，质粒间比例得当，并且对质粒进行酶切验证.转染产品知多少——siRNA转染试剂.脂质体转染试剂原理
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原代细胞直接分离自组织并在适当条件下增殖。因此，它们的形态学和生理特征和体内状态更为相似。但相对于连续细胞系，它们通常更难培养和转染。在经过***次传代培养之后，原代培养物变成了一种细胞系。源自于原代培养物的细胞系具有有限的寿命（即它们是有限细胞系），且随着传代的进行，具有比较高的生长能力的细胞逐渐占据支配地位，从而造成了细胞群内的基因型和表型接近一致的情形。相对来说，这一类细胞要比原代细胞使用起来更为方便，尤其是稳定转染的克隆传代...上海roche转染试剂供应商
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