细胞转染实验是生物医学实验室中**常规的研究手段，目的是把外源基因、蛋白或者小分子导入到靶细胞内。目前主要有三种主流方法：生物转染，物理转染和化学转染。其中生物转染主要是利用***等微生物作为基因导入载体，以慢***、腺***和腺相关***等**常见，其侵染效率可以达到90%以上，但常因安全性等问题，很多实验室对其敬而远之。物理转染主要包括显微注射、电穿孔和基因***，无论哪一种都需要特定的设备，且一分钱一分货，性能好的价格也都很性感电转化化学转染方法是生物医学研究中**常用的转染方法，主要包括两类：阳离子脂质体和阳离子聚合物。其基本原理是利用阳离子的化学分子与带有负电荷的核酸通过正负电荷作用形成稳定的复合物。并更换培养基，继续培养24 h后收取细胞，用PBS洗涤3次以上，以备RNA抽提。上海病毒转染试剂推荐
原代细胞直接分离自组织并在适当条件下增殖。因此，它们的形态学和生理特征和体内状态更为相似。但相对于连续细胞系，它们通常更难培养和转染。在经过***次传代培养之后，原代培养物变成了一种细胞系。源自于原代培养物的细胞系具有有限的寿命（即它们是有限细胞系），且随着传代的进行，具有比较高的生长能力的细胞逐渐占据支配地位，从而造成了细胞群内的基因型和表型接近一致的情形。相对来说，这一类细胞要比原代细胞使用起来更为方便，尤其是稳定转染的克隆传代...上海病毒转染试剂推荐RNAiMAX转染试剂是先进、高效的siRNA输送解决方案。
超级好用的siRNA和miRNA转染试剂——HiPerFect高效沉默低脱靶：HiPerFect是小RNA转染试剂，这种非脂质体的脂质分子可以在siRNA低至100pM浓度的条件下转染（推荐浓度是1nM-5nM）。保持高效基因沉默的同时降低脱靶效应，正是这一产品的精髓所在。除了siRNA，HiPerFect还能够用于miRNA模拟物和***剂的转染，满足miRNA功能分析的需要。操作简单，方便快速：HiperFect转染试剂的方便程度也是***的，甚至***之内可以完成再次接种、转染到检测结果！这对于高通量反应简直是求之不得的福音：转染前将细胞按比例接种到24孔培养皿中，培养基可以是含有***和血清的，在37度培养箱中保温。
图2.采用LipofectamineRNAiMAX转染试剂转染A549细胞时，实现了比较好的基因***效果和比较低的细胞毒性。试验采用的LipofectamineRNAiMAX试剂剂量范围为0.1μL-1.0μL之间，在维持优良的细胞活力的同时，实现了p53基因表达水平的有效敲低.功能多样简便的实验方案，易于针对***的细胞系进行优化Invivofectamine™3.0Reagent突破性的体内转染试剂Invivofectamine3.0试剂是一种突破性的体内RNAi输送试剂，可大幅改善实验性能，使用微克级的siRNA即可达到高达85%的敲低效果。谁来拯救我的细胞之QIAGEN转染试剂.
胞因素用低代数的细胞293T细胞非常重要！！当然也要保证细胞状态特别好，没有细微污染，铺板均匀。饱满状态好的细胞才可以产生较高滴度的***哦！载体系统在实验中**常见的慢***载体系统有三质粒系统、四质粒系统，当然使用三质粒系统的小伙伴居多，一定要选择成熟商业化的载体系统！载体构建和质粒抽提纯化我们要注意是否构建时导致质粒载体重组或某个部件缺失，或污染别的质粒、杂物?中抽纯化是否污染?要养成同时做阴性对照的习惯：建议目的基因载体和阴性对照GFP载体是同一批，且建议每次包装都如此操作，要保证目的基因的表达载体构建纯化良好，质粒间比例得当，并且对质粒进行酶切验证.细胞转染必备——高效低毒转染试剂.DNA转染试剂配方
连续细胞系具有无限增殖的潜能，通常要比原代或有限细胞更易处理.上海病毒转染试剂推荐
在多种不同类型细胞中基因敲除效率超过90%。2.高灵活应用，同一试剂可用于siRNA和质粒共转染的基因沉默实验。3.细胞毒性低，结果相关性好，确保所观察到的细胞效应是由转染的siRNA而非转染过程本身介导。4.兼容含血清或不含血清的培养基，转染前后均无需换液(如无血清培养基)。图4.X-tremeGENEsiRNATransfectionReagent用于4种细胞系的HPRT基因沉默实验。根据各试剂说明书建议的操作流程，或标准实验方法，将100nMHPRT特异性siRNA转染至4种细胞。通过LightCycler®h-HPRTHousekeepingGeneSet的荧光定量法评估基因沉默效率。结果显示用罗氏这款试剂在四种细胞中转染后基因沉默表现均表现优异。上海病毒转染试剂推荐
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